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鸡蛋果种子中一新的抗真菌二聚蛋白passiflin



全 文 :文 摘
姜油对自主性和前列腺素 F2α诱导的大鼠子宫肌层
收缩的抑制作用 〔英〕/Buddhakala N …∥Planta
Med.-2008 ,74(4).-385 ~ 391
  姜 Zing iber o f f icinale Roscoe 根茎的溶剂提
取物对平滑肌的药理活性已得到广泛研究 ,但其挥
发油对平滑肌收缩的影响尚未阐明。研究了姜挥发
油对自主性和前列腺素 F2α(PGF2α)刺激的大鼠离体
子宫肌层收缩的影响 。
GC-MS 分析显示 ,姜油保留时间分别为 5.70 、
7.43 、12.35 、13.03 、17.61 、17.88 、18.09 、18.45 min
时 ,分离 、鉴定了 8个主要化合物 ,即莰烯(7.74%)、
β-水芹烯(7.44%)、橙花醛(10.00%)、牻牛儿醛
(14.49%)、姜黄烯(4.71%)、α-姜烯(16.21%)、α-金
合欢烯(6.80 %)、β-倍半水芹烯(5.70 %)。在 CO2
麻醉下将大鼠脱颈处死 ,剥离子宫 ,分离出纵向子宫
平滑肌。在张力实验中 ,对照组子宫平滑肌标本持
续灌注 Kreb′s缓冲液;实验组灌注含姜油 10 ~ 150
μL/100 mL 或 PGF2α1 μmo l/L 的 Kreb′s 缓冲液 ,
或灌注含姜油+PGF 2α的 Kreb′s缓冲液 ,姜油和子
宫肌条的接触时间为15 min 。记录在不同浓度的姜
油作用下子宫肌层收缩的振幅和频率。结果显示 ,
姜油能浓度相关地抑制自主性子宫收缩 ,降低子宫
的收缩振幅和频率 ,其抑制作用从给药后 5 min开
始持续至给药末且是不可逆的。姜油浓度为 30
μL/100 mL 时 ,开始显示明显的收缩抑制作用 , MIC
为 50 μL/100 mL ,其 IC50亦为 50 μL/100 mL。使
缓冲液中的钙离子浓度从 2 mmo l/L 上升至 5
mmo l/L ,以观察姜油的抑制作用与 L-钙通道的关
系。结果显示 ,胞外钙离子浓度升高后 ,尽管姜油存
在 ,但肠标本的收缩完全恢复 。PGF 2α可明显增加子
宫收缩的振幅和频率 ,加入姜油 50 μL/100 mL 后 ,
PGF2α增加的收缩力与收缩频率均降低 ,但姜油的这
一作用可被胞外钙离子浓度的升高而逆转。向自主
收缩实验系统加入钙离子抑制剂硝苯地平10μmol/
L 后 ,收缩力快速消失;之后加入 PGF 2α ,其张力逐
渐加大并与PGF 2α共存;不管是在加入 PGF2α之前还
是之后给以姜油 ,均对肠标本的收缩产生影响。柠
檬醛以浓度相关方式抑制肠标本的自主收缩 , 50
μL/100 mL 时还能抑制 PGF2α引起的收缩。增加胞
外钙离子浓度 ,可抑制柠檬醛的作用。总之 ,姜油是
一强的子宫收缩抑制剂 ,其作用主要由柠檬醛引起
的 ,而且可能是通过抑制 L-型钙离子通道实现的 。
(李国熊摘 许重远校)
鸡蛋果种子中一新的抗真菌二聚蛋白 passi fl in
〔英〕/Lam S K …∥Phy tomedicine .-2009 , 16(2/
3).-172 ~ 180
  鸡蛋果 Passi f lora ed ulis Sims 的许多部位具
有生物活性 。从该植物种子中分离了一新的抗真菌
蛋白 ,并与其他已知蛋白和牛 β-乳球蛋白做了比较 ,
其中牛 β-乳球蛋白与 β-乳球蛋白 N-末端氨基酸序
列相似。
将鸡蛋果种子粗提物溶解于 Tris-HCl缓冲液
(pH 7.4),用 Q-Sepharo se 柱(5 cm ×10 cm)进行
色谱分离。用相同的缓冲液洗脱得未吸附蛋白部位
Q1;用含 NaC l的该缓冲液梯度洗脱得吸附蛋白部
位 Q2 ~ Q5。用含有 0.1 mol/ L NaCl的 Tris-HCl
缓冲液洗脱得部位 Q2 ,用含有 0.5 mol/L NaCl的
缓冲液洗脱依次得部位 Q3 ~ Q5。部位 Q4溶解于
含有 1.5 mol/ L 硫酸铵的 20 mmo l/L T ris-HCl缓
冲液(pH 7.4)中进行疏水性交互色谱分离 ,Phenyl-
Sepha ro se柱用相同的缓冲液平衡 。分离出未吸附
蛋白部位 PS1后 ,用20 mmo l/L T ris-HCl缓冲液洗
脱得部位 PS2 。PS2经进一步分离 、精制 ,得抗真菌
蛋白 passif lin ,其相对分子质量为 6.7×104 ,系首次
发现的 N-末端氨基酸序列与牛 β-乳球蛋白相似的
抗真菌蛋白。 Passiflin 对立枯丝核菌 Rhizotonia
solani 菌丝体生长显示抑制作用 , IC50为 16 μmo l/
L ,对照药制霉菌素 IC50为 10.2 μmo l/L 。Passiflin
还对乳腺癌细胞株 MCF-7显示强的抗增殖活性 ,
IC50为 15μmol/ L ,对照药多柔比星和油菜脂转移蛋
白 IC50分别为 4.3 、38μmo l/L 。研究还证实 ,passif-
lin 与抗-β-乳球蛋白抗血清无交叉反应。与 passif-
lin 相比 ,未受损的 β-乳球蛋白缺乏抗真菌和抗增殖
活性 ,且相对分子质量小 。这些结果表明 passiflin
与 β-乳球蛋白截然不同 。
(何 远摘)
313现代药物与临床  Modern Pharmacy and Clinic  2009 年第 24卷第 5期