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HPLC法测定了哥王药材不同药用部位西瑞香素的含量



全 文 :2. 87mg /g、2. 76mg /g。结果见表 6。
表 6 样品含量测定结果(n = 2)
批号 峰面积 含量(mg /g) 平均含量(mg /g)RSD(%)
20120216 2495725 2. 912 2. 913
2489895 2. 913
20120219 2299128 2. 705 2. 866 2. 8
2593733 3. 027
20120222 2468761 2. 905 2. 756
2216195 2. 608
3 讨 论
本文曾参考文献资料[3]提取制剂中的齐墩果酸,但是
其含量较低,提取也不完全。综合制剂的制备工艺提取方
法,确定了供试品溶液采取先超声后回流水解的步骤,另
外,笔者还单因素考察了超声提取溶剂的用量,提取时间,
萃取溶剂的用量等,最终确定了 70%乙醇的用量为 50mL、
超声时间为 30min、萃取溶剂的量与提取溶液等体积时,提
取更完全,齐墩果酸含量更高。
采用高效液相色谱法测定小花清风藤胶囊中齐墩果
酸的含量,方法简单、稳定、重现性较好,且制剂中的其他
成分对测定不形成干扰,可用于小花清风藤胶囊的质量控
制。
参考文献
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术 -中医药现代化,2006,8(6) :73 - 78.
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技,2010,46(4) :20 - 24.
[3]罗小军. HPLC 法测定天胡荽愈肝胶囊中齐墩果酸的
含量[J].中国药事,2006,20(11) :696 - 697.
2012 年 6 月 15 日收稿
△基金项目:贵州省科学技术厅“贵州省中药、民族药炮制技
术研究平台建设”(黔科合社字[2009]5001 号)。
作者简介:沈沫凡(1988 -) ,女(汉族) ,辽宁人,2010 级研究
生,研究方 向:中 药 材、民 族 药 材 的 炮 制 工 艺 研 究。 Tel:
13765819809 Email:327042117@ qq. com
* 通讯作者:李玮,Tel: (0851)5652239,E - mail:lw64@ sina.
com
HPLC法测定了哥王药材不同药用部位西瑞香素的含量△
沈沫凡 李 玮* 王建科 林 昶 郭建民 杨长福 杨 艳
(贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002)
摘 要:目的:采用 HPLC测定了哥王药材不同部位西瑞香素的含量。方法:采用 HPLC测定,Alltima C18 柱(250 mm ×4. 6
mm,5μm)色谱柱,以 0. 1%磷酸水 -甲醇(48∶ 52)作为流动相。结果:西瑞香素在 0. 078 ~ 0. 624μg范围内与峰面积呈良
好的线性关系,回收率为 98. 04%,RSD为 2. 72%;了哥王药材根、茎、细枝、叶中西瑞香素的平均含量分别为 0. 093%、0.
132%、0. 096%、0. 414%。结论:本方法可靠、可行,能快速、准确测定了哥王药材不同部位西瑞香素含量;了哥王不同药用
部位西瑞香素的含量差异较大。
关键词:了哥王;西瑞香素;HPLC
中图分类号:R29 文献标识码:A 文章编号:1006 - 6810(2012)08 - 0065 - 03
了哥王为瑞香科荛花属植物南岭荛花 Wikstromia in-
dica (L.)C. A. Mey,其根、茎叶分别入药,性苦、辛、寒,有
毒。了哥王茎叶具有清热解毒,化痰散结,消肿止痛的功
效;主治痈肿疮毒,瘰疬,风湿病,跌打损伤,蛇虫咬伤。了
哥王根具有清热解毒,散结逐瘀,利水杀虫的功效;主治肺
炎,支气管炎,腮腺炎,咽喉炎,淋巴结炎,乳腺炎,风湿性
关节炎,水肿膨胀,麻风,跌打损伤[1]。
现代药理及临床研究表明,了哥王具有消炎、解毒、镇
痛等作用[2]。西瑞香素是了哥王主要药效成分之一,不仅
具有明显改善小鼠心肌营养血流量的作用[3],也可显著降
低大鼠肾上腺内维生素 C的含量,可促进单核巨噬细胞的
吞噬作用,有利于炎症的恢复;同时又具有较好的抗炎、抗
肿瘤作用[4 - 5]。为了评价药材质量,也为临床用药提供依
据,本实验通过 HLPC法测定了了哥王不同药用部位西瑞
香素的含量。
1 仪器与试药
1. 1 仪器:LC - 20AT 高效液相色谱仪(LC - 20AT 二元
梯度泵、SPD - 20A 检测器,日本岛津) ;远红外干燥箱
(YHG -600 - S -Ⅱ,上海贺德实验设备有限公司) ;十万
分之一电子天平(AUW220D,日本岛津) ,超声清洗机
(HS10260D,天津恒奥科技公司) ;粉碎机(浙江省温岭市
562012 年 8 月第 8 期 中 国 民 族 医 药 杂 志
大鹏机械有限公司)。
1. 2 试药:西瑞香素对照品(自制,经 HPLC 峰面积归一
化计算,含量大于 98%) ,甲醇为色谱醇,水为娃哈哈纯净
水;其余试剂均为分析纯。了哥王药材采自广东罗定,经
贵阳中医学院生药教研室周汉华教授鉴定为瑞香科植物
南岭荛花 Wikstroemia indica (L.)C. A. Mey.。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件与系统适应性试验:色谱条件:色谱柱为
Alltima C18 柱(250 mm × 4. 6 mm,5μm) ;流动相:甲醇 -
0. 1%磷酸水溶液(52∶ 48) ;检测波长:345 nm;流速:1. 0
mLμmin -1;柱温:30 ℃;进样量:10μL。在此条件下,对照
品、供试品在 15 min相同时间有同一色谱峰,见图 1、图 2。
图 1 对照品液相色谱图
图 2 供试品液相色谱图
2. 2 样品溶液的制备:称取了哥王样品 0. 2 g,置锥形瓶
中,精密加入甲醇 25mL,称定重量,85℃的水浴回流 30
min,放冷至室温,补足减失的重量,滤过,取续滤液以 0. 45
μm微孔滤膜滤过,作为样品溶液。
2. 3 对照品溶液的制备:精密称取在五氧化二磷(P2O5)
中干燥至恒重的西瑞香素对照品适量,置 25 mL 容量瓶
中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成 0. 156 mgμmL -1
的西瑞香素对照品溶液,经 0. 45 μm微孔滤膜滤过,即得。
2. 4 线性关系的考察:精密吸取浓度为 0. 156 mg /mL 的
西瑞香素对照品溶液 0. 5,1. 0,2. 0,3. 0,4. 0 mL,分别置于
10 mL的容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。分别吸取
10μL,注入液相色谱仪中,按上述色谱条件测定对照品峰
面积,以西瑞香素的质量为横坐标,以峰面积为纵坐标,将
进样量与峰面积进行线性回归,得回归方程:y = 3 × 106x
+ 7177. 2,r = 0. 99995,西瑞香素对照品进样量在 0. 078 ~
0. 624 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,见图 3。
图 3 西瑞香素的标准曲线图
2. 5 精密度试验:精密吸取同一份对照品溶液 10 μL,按
2. 1 项下色谱条件,重复进样 7 次进行测定。实验结果表
明,RSD值为 2. 44%,仪器精密度良好。
2. 6 重复性试验:精密称取同一样品粉末 6 份,每份 0. 2
g,按供试品溶液制备项下方法制备并测定,结果表明 RSD
值为 1. 25%,试验方法可靠。
2. 7 稳定性试验:精密称取样品粉末 0. 2 g,按供试品溶
液制备项下方法制备。精密吸取供试品溶液 10 μL,按上
述色谱条件,每隔 0. 5 h,测定供试品溶液中西瑞香素的含
量,结果表明,RSD值为 2. 85%,3 小时内含量稳定。
2. 8 加样回收率试验:精密称取已知含量的样品粉末 6
份,每份约 0. 1 g,分别加入西瑞香素对照品 0. 34 mg,按供
试品溶液的制备方法制备并测定,计算回收率,实验结果
表明,平均回收率为 98. 04%,RSD 值为 2. 72%,说明采用
上述实验条件进行含量测定,重现性好,准确可靠。见表
1。
表 1 加样回收率试验结果
称样量
(g)
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
0. 101 0. 340 0. 340 0. 678 99. 41 98. 04 2. 72
0. 101 0. 340 0. 340 0. 675 98. 53
0. 100 0. 337 0. 340 0. 663 95. 88
0. 103 0. 347 0. 340 0. 670 95. 00
0. 104 0. 350 0. 340 0. 680 97. 06
0. 101 0. 340 0. 340 0. 688 102. 35
66 中 国 民 族 医 药 杂 志 2012 年 8 月第 8 期
3 了哥王药材不同部位西瑞香素含量测定
广东罗定市了哥王根、茎、细枝、叶西瑞香素含量测定
结果,见表 2。
表 2 了哥王药材不同部位西瑞香素的含量测量结果
样品
西瑞香素含量(%)
1 2 3
平均
含量(%)
RSD
(%)
根 0. 091 0. 096 0. 093 0. 089 0. 093 0. 098 0. 093 2. 96
茎 0. 134 0. 132 0. 138 0. 134 0. 129 0. 127 0. 132 2. 97
细枝 0. 093 0. 095 0. 097 0. 097 0. 101 0. 096 0. 096 2. 76
叶 0. 418 0. 43 0. 397 0. 406 0. 407 0. 423 0. 414 2. 97
4 结果与讨论
4. 1 实验表明,了哥王药材不同部位西瑞香素平均百分
含量叶部最高,根部最低,分别为 0. 414%、0. 093%,了哥
王药材不同部位的西瑞香素含量有较大差异。
4. 2 了哥王不同部位的作用不尽相同,研究表明了哥王
根的提取物、水煎剂有引产作用和抗肿瘤作用,根皮能治
疗肺部炎症、慢性支气管炎且具有有泻下作用;茎的甲醇
提取物具有镇静、抗炎和抗肿瘤的作用[6];叶能治痰火疬、
疮疡乳痈、无名肿毒、妇科风结腹痛、梅毒、下疳等[7]。了
哥王不同药用部位的功效是否与西瑞香素含量的差异有
关,有待我们进一步研究。
参考文献
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海科学技术出版社,2006:255 - 256.
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(Daphnoretin)的分离、鉴定[J]. 中草药通讯,1978,
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[7]田代华. 实用中药辞典[M]. 北京:人民卫生出版社,
2002:43 - 45.
2012 年 6 月 15 日收稿
△基金项目: (贵州省科学技术厅联合基金)“石苇化学成分
及活性研究”[2010]LKZ7030. 2011 年贵阳中医学院创新计划。
作者简介:杨武德(1968 - ) ,男,教授,学士,研究方向:中药
质量标准及中药化学成分。
苗药石苇多糖及总糖的含量测定△
杨武德 崔 敏 王 翔
(贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002)
摘 要:目的:测定石苇这一品种的中多糖和总糖的含量。方法:硫酸 -苯酚[1]显色后用紫外 -可见分光光度计[2]测定吸
光度,测定波长为 491. 0nm,按照回归方程计算含量。结果:葡萄糖在 55. 008 ~ 330. 048 mg·L -1之间线性关系好,回归方
程为 A =0. 0047C - 0. 1025,r = 0. 9993。石苇中多糖含量为 5. 49%,总糖含量为 17. 67%。结论:本法操作简单,可准确地
进行定量检测,重复性较好,为评价石苇的质量评价提供实验依据。
关键词:石苇;多糖;总糖;分光光度法
中图分类号:R291. 6 文献标识码:A 文章编号:1006 - 6810(2012)08 - 0067 - 03
石苇为水龙骨科植物石苇 Pyrrosia lingua(Thunb.)
Farwell的叶,性微寒,味苦甘,具有利尿通淋,清肺止咳,凉
血止血的功效[1],临床上主要用于治疗热淋、血淋、石淋,
小便不通,淋沥涩痛,肺热喘咳,吐血,血崩等症状。
中药多糖,有增强机体免疫功能及抗肿瘤等药理作
用,而几乎没有毒性,越来越引起国内外科学家的重
视[2、3]。本实验以雷山县的石苇为原料,初步研究其多糖
提取分离技术和植物中多糖及总糖的含量,对石苇的质量
评价提供试验依据。本文采用硫酸 -苯酚法分析石苇多
762012 年 8 月第 8 期 中 国 民 族 医 药 杂 志