全 文 ：第 34卷第 3期
2013年 3月
超高效液相色谱法测定紫参胶囊中芍药苷含量
刘晓闯 高家荣 段贤春 张艳艳 韩燕全 陈 浩 萧 伟
［摘 要］ 目的 建立超高效液相色谱法测定紫参胶囊中芍药苷含量的方法。 方法 采用超高效液相色谱法，色谱柱为 Waters
Acquity BEH C18（2.1 mm×50 mm，1.7 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（15∶85），流速 0.25 ml/min，检测波长 230 nm，柱温 30℃。 结果
芍药苷在 14～84 μg/ml范围内与峰面积线性关系良好，r＝0.9997，平均加样回收率为 97.3%，RSD＝1.93%（n＝6）。 结论 本法准确、简便、
重现性好，可用于紫参胶囊中芍药苷的含量测定。
［关键词］ 紫参胶囊；含量测定；芍药苷；超高效液相色谱法
doi：10.3969/j.issn.1000-0399.2013.03.038
Determination of paeoniflorin in Zishen capsules by UPLC
Liu Xiaochuang，Gao Jiarong，Duan Xianchun，et al
Anhui University of Traditional Chinese Medicine，the First Affiliated Hospital of Anhui University of TCM, Hefei 230031, China
[Abstract] Objective To establish a method for the determination of paeoniflorin in Zisheng capsules. Methods Waters Acquity
UPLC BEH Cl8（2.1 mm×50 mm，1.7 μm）column was adopted. The mobile phase consisted of acetonitrile- phosphoric acid solution（15∶85）at
the flow rate of 0.25 ml/min. The detecting wavelength was 230 nm，and the column temperature was 30℃ . Results Paeoniflorin was well
separated and the liner range of calibration was14～84 μg/ml （r＝0.9997）. The average recovery was 97.3%，and RSD was 1.93%（n＝6）. Con－
clusion The method is accurate，simple and highly reproducible，which could be used for the determination of paeoniflorin in Zisheng capsules.
[Key words] Zishen capsules；Determination；Paeoniflorin；UPLC
基金项目： 安徽省康缘中医药科技创新基金（项目编号：KYCX201011），国家中医药重点学科临床中药学建设项目（国中医药人教发[2012]325）
作者单位： 230031 合肥 安徽中医学院（刘晓闯）
230031 合肥 安徽中医学院第一附属医院，国家中医药管理局中药制剂三级实验室（刘晓闯，高家荣，段贤春，韩燕全，陈浩）
230601 合肥 安徽医学高等专科学校（张艳艳）
222001 连云港 江苏康缘药业股份有限公司，中药制药过程新技术国家重点实验室（萧伟）
通信作者： 高家荣，zyfygjr2006@163.com
紫参胶囊为安徽中医学院第一附属医院特色制剂，
由紫河车、太子参、白芍、首乌藤等 10味中药组成；具有
温肾填精、益气养血、宁心安神、阴阳双调的作用，主治
围绝经期综合征；白芍为方中臣药，有养血调经、敛阴止
汗、柔肝止痛、平抑肝阳之功效。对围绝经期综合征中血
虚萎黄、自汗、盗汗、头痛眩晕治疗效果明显，白芍总苷
为白芍药材中主要有效成分，现代研究表明白芍总苷具
有镇静、抗惊厥、调节免疫、调节心血管系统的活性[1]，芍
药苷为其代表成分，且含量较高。本文采用超高效液相
色谱法对制剂中芍药苷的含量进行了测定，为有效控制
该制剂的质量提供了依据。
1 材料与方法
1.1 检测材料
1.1.1 检测仪器 Waters Acquity H-Class UPLC 超高效
液相色谱仪，包括四元高压梯度泵、自动进样器、柱温箱
以及 Empower 2数据处理工作站；Sartorius BP211D 十
万分之一电子天平，SK3200 H超声仪（上海科导超声仪器
有限公司），HH-S型水浴锅（郑州长城科工贸有限公司）。
1.1.2 试药 紫参胶囊（安徽中医学院第一附属医院，
批号：20111121，20120608，20121018），芍药苷对照品
（中国药品生物制品检定所，批号：110736－200934）；甲
醇、乙腈均为色谱纯（美国 Tedia公司）；水为屈臣氏蒸
馏水；其余试剂均为分析纯。
1.2 检测方法
1.2.1 对照品溶液的制备[2] 取芍药苷对照品适量，精密
称定，加甲醇制成每 1 ml含 14 μg的溶液，作为芍药苷
对照品溶液。
1.2.2 供试品溶液的制备[3-7] 取紫参胶囊内容物 0.09 g，
精密称定，置 10 ml量瓶中，加甲醇 8 ml，超声处理（功率
240 W，频率 45 kHz）30 min，放冷，加甲醇定容至刻度，
摇匀，滤过，取续滤液过 0.22 μm微孔滤膜，即得供试品
溶液。
1.2.3 色谱条件[2] 色谱柱：Waters Acquity BEH C18柱
（2.1 mm×50 mm，1.7 μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（15∶
85，V∶V）；波长检测：230 nm；柱温：30℃；流速：0.25 ml/min。
·药学研究·
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1.2.4 专属性试验 根据处方组成，取除白芍外的其余
药材，按紫参胶囊制备工艺制成缺白芍的阴性制剂，再
按 1.2.2制备方法 制得阴性样品溶液，按“1.2.3”项下
色谱条件自动进样 2 μl，测定，阴性对照液在芍药苷对
照品保留时间位置上均未见干扰。对照品溶液、缺白芍
的阴性样品溶液、样品溶液 UPLC见图 1。
1.2.5 线性关系考察 自动进样对照品溶液 1、2、3、4、5、6
μl，按“1.2.3”项下色谱条件测定，以色谱峰峰面积为纵坐
标，以进样浓度为横坐标，绘制标准曲线并进行线性回
归，线性回归方程及相关系数为：Y = 8 4267.7 X-4
981.9，r＝0.999 7，芍药苷在 14～84 μg/ml范围内与峰面
积呈良好的线性关系。
1.2.6 稳定性试验 自动进样供试品（批号：20111121）
溶液 2 μl，分别在第 0、2、4、8、12、24 h，按“1.2.3”项下色
谱条件自动进样 2 μl，测定，测得样品中芍药苷峰面积
的 RSD＝1.54%（n＝6），表明供试品溶液在 24 h内稳定。
1.2.7 精密度考察 取芍药苷对照品溶液，自动重复进样
6次，每次 2 μl，测得芍药苷峰面积 RSD＝0.38%（n＝6）。
结果表明仪器精密度良好。
1.2.8 重复性试验 取同一批号样品 6 份（批号：
20111121），按 1.2.2 方法分别制成供试品溶液，按
“1.2.3”项下色谱条件自动进样 2 μl，测定峰面积并计算
芍药苷的含量，其 RSD＝0.65%（n＝6）。
1.2.9 加样回收率试验 取已知芍药苷含量的批号为
20111121胶囊内容物 6份，每份 0.09 g，精密称定，分别
加入芍药苷对照品溶液适量，按“1.2.2”项下方法制备，
参照“1.2.3”项下色谱条件自动进样 2 μl，测定，计算得
平均值为 97.30 %，RSD＝1.93%（n＝6），见表 1。
1.2.10 样品含量测定 取 3批紫参胶囊内容物，批号
分别为：20111121，20120608，20121018，按 1.2.2 方法制
备供试品溶液，测定其芍药苷含量。
2 结果
分别测得 3批样品（批号为：20111121，220120608，
20121018）中芍药苷含量分别为 1.310 mg/g，1.332 mg/g
和 1.326 mg/g。
3 讨论
白芍为紫参胶囊处方中臣药，结合水提工艺特点，
确定芍药苷为本品含量控制的指标成分；通过简单超声
提取后补重，取续滤液进行测定，最大限度避免供试品
制备过程中芍药苷的损失；采用高效液相色谱法测定芍
药苷的含量，干扰少，实验效果好，且有良好的回收率。
注：A为对照品；B为阴性对照；C为供试品；1为芍药苷
图 1 紫参胶囊的 UPLC 图
表 1 芍药苷加样回收率的测定结果
编号 样品中芍药苷的量（mg） 加入芍药苷的量（mg） 测得芍药苷的量（mg） 回收率（％） 平均回收率（％） RSD（％）
1
2
3
4
5
6
0.118 4
0.118 3
0.118 8
0.118 8
0.118 6
0.118 9
0.118 0
0.118 0
0.118 0
0.118 0
0.118 0
0.118 0
0.236 2
0.230 9
0.232 1
0.231 8
0.235 5
0.234 1
99.85
95.41
96.02
95.71
99.08
97.68
97.30 1.93
A
B
C
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在流动相筛选过程中，曾采用药典方法：乙腈-
0.1%磷酸溶液（14∶86，V∶V），结果峰形较差（扁平），综合
峰形及分离度要求，调整流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液
（15∶85，V∶V）。
2010版中国药典（一部）白芍药材含量测定项下规
定：芍药苷含量不得低于 1.6%，紫参胶囊内容物中芍药
苷含量测定结果表明，该制剂的水提工艺对组方中芍药
苷有很好的提取效率。
参考文献
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酸的含量[J]. 安徽医学，2012，33（7）：903-905.
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芍饮片中 9个成分的含量[J]. 药物分析杂志，2011，31（2）：
2208-2212.
（2012-12-10收稿 2013-01-15修回）
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答题卡填写后沿此虚线剪下寄回（答题卡复印无效）
2013年《安徽医学》继续医学教育答题卡（1- 3期）
注：学习 3期为 1个单元（3分），全年共 12分。如答题卡空间不够，可附页答题；作者寄答案时，请详细写出联系电话、联系地址。
第 1期答题卡
1.下面关于鳃裂囊肿描述错误的有（ ）
A 第一鳃裂囊肿Ⅰ型位于腮腺周围区域
B 第二鳃裂囊肿多见于左侧，可发生于左侧梨状窝至甲状腺左叶的任何位置
C 典型腮腺囊肿表现为长 T1 长 T2 信号，囊壁较薄
D 腮腺囊肿可表现为短 T1 短 T2 信号，CT 上不呈水样密度
2.简述腮腺囊肿的 CT 及 MRI 影像学表现
3.简述第二鳃裂囊肿的分型
第 2期答题卡
1.下列选项不正确的是（ ）
A 骨肉瘤是最常见的恶性成骨性骨肿瘤之一
B 约占恶性骨肿瘤的 34.17％
C 骨肉瘤恶性程度高，侵袭性强，易复发和转移。
D 青少年少见，30 岁以下好发于扁骨。
2.简述骨肉瘤的 CT 表现
第 3期答题卡
1.下列选项不正确的是（ ）
A 腮腺不含有神经成分，因此腮腺不会发生神经源性肿瘤
B 以 A 区为主型的腮腺神经鞘瘤的密度多较均匀，增强呈均匀一致强化
C 以 B 区为主型的腮腺神经鞘瘤的密度大多不均匀，增强呈不均匀强化
D 腮腺神经鞘瘤源于面神经，好发于成年人
2.简述腮腺神经鞘瘤的鉴别诊断
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