全 文 ：书第 30 卷 第 1 期
2014 年 2 月
哈 尔 滨 商 业 大 学 学 报(自然科学版)
Journal of Harbin University of Commerce (Natural Sciences Edition)
Vol． 30 No． 1
Feb． 2014
收稿日期:2013 － 04 － 29．
基金项目:黑龙江省自然科学基金项目(B201001)．
作者简介:王珊珊(1987 －)，女，硕士，研究方向:食品化学．
AB － 8 大孔树脂对芫荽黄酮的纯化工艺研究
王珊珊，吴 春
(哈尔滨商业大学 食品工程学院，哈尔滨 150076)
摘 要:利用 AB － 8 大孔树脂纯化芫荽黄酮，通过静态和动态结合的方法，确定最佳工艺参数．结果
表明，静态，吸附平衡时间为 3 h，解析平衡时间为 1． 5 h;动态，上样液质量浓度为 1． 0 mg /mL，上样液
pH值为 6． 0，上样流速为 2 mL /min，洗脱剂质量浓度为 70%乙醇溶液，洗脱流速为 2 mL /min．在此条
件下，AB － 8 大孔树脂可以较好的分离纯化芫荽中总黄酮．
关键词:芫荽;总黄酮;AB － 8 大孔树脂;纯化
中图分类号:Ｒ284 文献标识码:A 文章编号:1672 － 0946(2014)01 － 0033 － 03
Study on purification of flavonoids from coriander with AB －8 macroporous resin
WANG Shan-shan，WU Chun
(School of Food Engineering，Harbin University of Commerce，Harbin 150076，China)
Abstract:AB － 8 macroporous resin was used to separate and purify coriander flavonoids，
static and dynamic adsorption and desorption behaviors of AB － 8 macroporous resin were e-
valuated for achieving the best purification of total flavonoids． The static:adsorption equilib-
rium time was 4 h，desorption time was 1． 5 h． The dynamic:the best adsorption was sample
concentration of 1． 0 mg /mL，pH of 6． 0 and the flow rate of 2． 0 mL /min． The desorption
flow rate of 2． 0 mL /min and 70% ethanol elution were the best． With definite technical
process，the AB －8 macroporous resin could be used to purify the flavonoids of coriander．
Key words:coriander;flavonoids;macroporous resin;purification
芫荽(Coriandrum sativum L)又名胡荽，俗称
香菜．芫荽属伞形科植物，是一年生香叶类蔬菜，是
人类历史上用于药用和调味食品中最古老的芳香
蔬菜之一［1］． 芫荽主要含有蛋白质、多糖、维生素
C、挥发油、黄酮甙、油酸等化学成分． 具有芳香健
胃、祛风解毒的功效．
黄酮类化合物(Flavonoid)，又称生物类黄酮，
广泛分布于植物界，具有多种生物学活性，主要包
括抗氧化、清除自由基、抗肿瘤等［2］，可作为合成
抗氧剂如 BHT、BHA 等替代品，具有高效、低毒等
特点［3］．
大孔树脂是一类有较好吸附性的有机高聚物，
主要由吸附作用使化学物质产生分离．近年来广泛
应用于植物中活性成分的分离，它具有吸附量大、
稳定性高、选择性强、再生简便、使用周期长、节约
费用等优点［4］． 本文选择 AB － 8 大孔树脂对芫荽
中总黄酮进行纯化，并对其静态和动态吸附解吸条
件进行了研究，为今后芫荽中黄酮类化合物的应用
和开发作出一定的参考．
1 材料与方法
1． 1 原料与试剂
新鲜芫荽购买于哈尔滨市菜市场，将芫荽茎叶
清洗并晾干，60 ℃烘箱烘干至恒重，粉碎磨粉过筛
(60 目)，将芫荽样品放入磨口广口瓶，置于干燥器
中保存，备用．
芦丁标准品(中国药品集团上海化学试剂公
司，纯度 95． 0 %)，AB － 8 型大孔树脂(天津市光
复精细化工研究所)，无水乙醇(天津市天力化学
试剂有限公司)，36% － 38%盐酸，石油醚，NaNO2，
Al(NO3)3，NaOH等试剂均为分析纯，
1． 2 仪器与设备
DFY 型摇摆式高速万能粉碎机(温岭市林大
机械有限公司)，DHG － 9123A 型电恒温热鼓风干
燥箱(上海一恒科技有限公司)，FA2004N 电子天
平(上海精密科学仪器有限公司)，KQ3200DE型数
控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，
721E型可见分光光度计(上海光谱仪器有限公
司)，SHB － III 型循环水式多用真空泵(郑州长城
科工贸有限公司)，pHS － 25 型酸度计(上海伟业
仪器厂)，SHZ － A水浴振荡器(上海申胜生物技术
有限公司)，Ｒ － 205 旋转蒸发仪(上海申胜生物技
术有限公司)
1． 3 实验方法
1． 3． 1 标准曲线的绘制
采用亚硝酸钠 －硝酸铝分光光度法［5］． 在最
大吸收波长 510 nm 处测定吸光度，以芦丁质量质
量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线．
1． 3． 2 芫荽总黄酮粗提液的制备
精确称取一定量芫荽粉末，在乙醇体积分数
40%，料液比 1∶ 30，超声时间 40 min，超声温度 65
℃，超声功率 96 W 的条件下进行提取，提取液通
过真空抽滤后，收集滤液，将滤渣按以上条件再提
取两次，合并滤液，旋转蒸发至无乙醇气味时，用等
体积的石油醚萃取 3 次，用来除去脂肪． 经旋转蒸
发至粉末状，收集芫荽总黄酮的粗提物．
1． 3． 3 大孔树脂的预处理
取适量干大孔树脂用 95%的乙醇充分浸泡 24
h后，通过真空抽滤除去乙醇并用蒸馏水洗至无乙
醇味．将树脂用 5%HCl浸泡 4 h，用蒸馏水漂洗至
中性过滤后，再用 5% NaOH 浸泡 4 h，用蒸馏水充
分漂洗至中性，过滤．浸泡于蒸馏水中，备用．
1． 3． 4 大孔树脂对芫荽总黄酮的静态吸附实验
1)静态吸附动力学曲线
精确称取已经处理好的大孔树脂 2 g，真空抽
滤至不滴水为止，加入到 250 mL磨口三角瓶中，加
入初始质量浓度为 0． 209 mg /mL 的黄酮粗提液
100 mL，在 25 ℃的条件下恒温水浴震荡，每隔 30
min取样一次，测定总黄酮质量浓度，绘制动力学
曲线，确定合理的吸附时间．
2)静态解析动力学曲线
取吸附饱和的树脂，加入 50%的乙醇溶液 100
mL，置于 25 ℃的条件下恒温水浴震荡器上，每隔
30 min取样 1 次，测定总黄酮质量浓度，绘制动力
学曲线，确定合理的解析时间．
1． 3． 5 大孔树脂对芫荽总黄酮的动态吸附实验
称取一定量经预处理的大孔树脂，采用湿法装
柱将其装入层析柱中，准确量取芫荽黄酮提取液，
分别缓慢地加入到层析柱中，选取上样流速、样液
质量浓度、解析流速、解析剂质量浓度四个因素进
行实验，收集吸附后样液，测定吸附后样液及洗脱
液的吸光度值，分别计算大孔树脂动态吸附实验的
吸附率和解析率．
吸附率(%)=
C0 － C
C0
× 100%;
解析率(%)=
V1 × C1
(C0 － C)× V
× 100%
其中:C0 为吸附前样液质量浓度(mg /mL);C 为吸
附后滤液质量浓度(mg /mL);C1 为洗脱液质量浓
度(mg /mL);V 为萃取液体积(mL);V1 为洗脱液
体积(mL).
1)上样液 pH值对吸附效果的影响
称取预处理好的大孔树脂 10 g，采用湿法装
柱，加入配制好的粗提液 5 份，调节 pH 值为 4、5、
6、7、8，测定流出液的吸光度值，计算吸附率．
2)上样液质量浓度对吸附效果的影响
称取预处理好的大孔树脂 10 g，采用湿法装
柱，上样速度为 1 mL /min，分别加入相同 pH 值和
相同量的质量浓度为 1． 0、2． 0、3． 0、4． 0、5． 0 mg /
mL粗提液，收集流出液，测定其吸光度值，计算吸
附率．
3)上样液流速对吸附效果的影响
称取预处理好的大孔树脂 10 g，采用湿法装
柱，控制上样速度为 1、2、3、4、5 mL /min，将同一质
量浓度相同量的粗提液加入层析柱中，收集流出
液，测定其吸光度值，计算吸附率．
4)洗脱剂体积分数对解析效果的影响
吸附饱和的大孔树脂，调节流速为 1 mL /min，
分别用 4 倍柱床体积的体积分数为 50%、60%、
70%、80%、90%乙醇溶液进行洗脱，收集流出液，
测定其吸光度值，计算解析率．
5)洗脱剂流速对解析效果的影响
吸附饱和的大孔树脂，调节流速为 1、2、3、4、5
mL /min，用 70%的乙醇溶液 50 mL进行洗脱，收集
·43· 哈 尔 滨 商 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) 第 30 卷
流出液，测定其吸光度值，计算解析率．
2 结果与讨论
2． 1 总黄酮标准曲线
将实验结果进行线性回归，得回归方程和相关
系数为 Ｒ2 = 0． 999 6．结果表明，在芦丁质量浓度为
0． 008 ～ 0． 040 mg /mL时线性关系良好．见图 1.
图 1 芦丁标准曲线
2． 2 大孔树脂对芫荽总黄酮的静态吸附性的研究
2． 2． 1 静态吸附平衡时间的确定
由图 2 可以得到，随着吸附时间的延长，总黄
酮质量浓度逐渐下降． 当吸附时间达到 3 h 后，总
黄酮质量浓度随时间变化趋于平缓，吸附量逐渐达
到饱和，故选择 3 h为静态最佳吸附时间．
图 2 大孔树脂静态吸附曲线
2． 2． 2 静态解析平衡时间的确定
由图 3 可知，随着解析时间的增加，总黄酮质
量浓度逐渐上升．当解析时间达到 1． 5 h 质量浓度
达到最大，之后随着时间的延长，黄酮质量浓度基
本保持不变，因此，选择 1． 5 h 为大孔树脂静态最
佳解析时间．
图 3 大孔树脂静态解析曲线
2． 3 大孔树脂对芫荽总黄酮的动态吸附性的研究
2． 3． 1 上样液 pH值对吸附效果的影响
由图 4 可以看出，pH 值在 4 ～ 6 呈上升趋势，
pH值大于 6 后吸附率开始下降，在 pH 值为 6 时
有较大的吸附率．这是因为黄酮类化合物为多羟基
酚类，多显酸性，在酸性或弱酸的条件下能达到较
好的吸附效果［6］． 所以，本实验的中上样液 pH 值
为 6．
图 4 pH值对吸附效果的影响
2． 3． 2 上样液质量浓度的确定
由图 5 可知，随着上样液质量浓度的升高吸附
率逐渐降低，在质量浓度为 1． 0 mg /mL 时吸附率
最高，原因是黄酮质量浓度较高时，不能被充分吸
附，导致吸附率较低．所以，最适合上样质量浓度为
1． 0 mg /mL．
图 5 上样液质量浓度对吸附效果的影响
2． 3． 3 上样液流速的确定
由图 6 可知，随着上样液流速的增加，大孔树
脂对黄酮的吸附率先上升后开始下降，流速在 1 ～
2 mL /min时吸附率较高，原因是流速较快时大孔
树脂对黄酮吸附不充分． 因此，综合吸附率和实验
时间选择 2 mL /min为最佳上样流速．
图 6 上样液流速对吸附效果的影响
2． 3． 4 洗脱剂体积分数的确定
由图 7 可以得到，随着乙醇体积分数的增加，
总黄酮的解析率逐渐增大，当乙醇体积分数达到
70%时达到最大解析率，超过 70%时解析率有略
微的下降，综合解析率和节约药品选择 70%为最
佳洗脱剂体积分数．
(下转 49 页)
·53·第 1 期 王珊珊，等:AB － 8 大孔树脂对芫荽黄酮的纯化工艺研究
(2):5．
［13］ 王 擎，梁 爽，郑爽英，等． 饮用水消毒技术研究与应用
［J］． 中国消毒学杂志，2006，23(4):349 － 351．
［14］ FOSHINO Ｒ，NEＲVEGNA I，MOTTA A，et al． Bactericidal
activity of chlorine dioxide against Escherichia coli in water and
on hard surfaces［J］． Journal of Food Protection，1998，61
(6) :668．
［15］ 刘 南． 二氧化氯消毒研究进展［J］． 重庆医学，2005，34
(3):449 － 451．
［16］ CHANG C Y，SHIH I C，HSU S S，et al． The formation and
control of disinfection by － products using chlorine dioxide［J］．
Chemosphere，2000，41(8) :1181 － 1186
［17］ KATZ A，NAＲKIS N． Ｒemoval of chlorine dioxide disinfection
by － products by ferrous salts［J］． Water Ｒesesrch，2001，35
(1) :101 － 108．
［18］ 刘丽娜，张 鑫，崔崇威，等 . 氯系消毒剂杀灭饮用水中隐
孢子虫试验研究［J］. 哈尔滨商业大学学报:自然科学版，
2013，29(4):412 － 415，425.
(上接 35 页)
图 7 乙醇体积分数对洗脱率的影响
2． 3． 5 洗脱剂流速的确定
由图 8 可以看出，洗脱剂流速在 1 ～ 2 mL /min
时解析率变化不大，超过 2 mL /min 时解析率快速
下降，此时，解吸流速过快，吸附在树脂上的物质来
不及解吸，所以洗脱不完全．解吸流速过慢，会延长
实验周期，增加成本［7 － 8］．因此，综合洗脱率和洗脱
时间选择 2 mL /min为最佳洗脱流速．
图 8 洗脱剂流速对洗脱率的影响
3 结 语
AB －8 大孔树脂对芫荽黄酮提取液吸附平衡
时间为 1． 5 h，解析平衡时间为 3 h．当芫荽黄酮进
样液 pH值为 6． 0、进样质量浓度为 1． 0 mg /mL、进
样速率为 2 mL /min时，AB － 8 对芫荽黄酮的吸附
率较大． 洗脱时使用 4 倍柱床体积的体积分数
70%乙醇溶液，当洗脱剂流速为 2 mL /min 时，AB
－8 树脂对芫荽黄酮的洗脱率较高．
参考文献:
［1］ 赵秀玲．芫荽的成分及保健功能的研究进展［J］．食品工业科
技，2011，32(4):427 － 429．
［2］ 耿敬章，冯君琪．黄酮类化合物的生理功能与应用研究［J］．
中国食物与营养，2001(7):19 － 21．
［3］ 宋 惠，李 勇．黄酮类化合物的保健作用［J］．中国食物与
营养，2004(11):45 － 47．
［4］ 徐 青，卢莹莹，辛建美，等．大孔树脂吸附分离海芦笋中黄
酮类化合物工艺［J］．食品科学，2011，32(2):115 － 119．
［5］ 王恩福．蓝靛果中黄酮类化合物的提取纯化及功能的研究
［D］．哈尔滨:东北林业大学，2007．
［6］ 刘延吉，孙素梅，王学密，等． AB － 8 型大孔树脂分离纯化南
果梨黄酮类化合物的研究［J］．食品工业科技，2008，29(2):
68 － 70．
［7］ 戴文娟，郭璇华．大孔树脂吸附纯化火龙果茎黄酮类化合物
的研究［J］．食品研究与开发，2009，30(11):65 － 68．
［8］ 陆海莲，吴 春，刘 宁 . AB － 8 大孔树脂对黑米花色苷的
吸附性能研究［J］. 哈尔滨商业大学学报:自然科学版，
2013，29(1):93 － 96.
·94·第 1 期 李 妍，等:北方某城市饮用水管网中亚氯酸盐调查