全 文 ：基金项目:国家“十二五”科技支撑计划(No 2012BAI30B02)
通信作者:王晓梅，女，副教授，研究方向:天然药物活性成分的研究
与开发，E-mail:forever． wxm@ 163． com
◇药学研究◇
维吾尔药铁力木不同极性部位体外抗氧化作用的研究
马俊鹏1，王新玲2，李 芸3，胡君萍2，王小青2，丁燕楠2，王晓梅2
(1．新疆维吾尔自治区人民医院米东医院药械科，新疆 乌鲁木齐 830000;2． 新疆医科大学药学院，
新疆 乌鲁木齐 830011;3．新疆生产建设兵团第五师医院药剂科，新疆 博乐 833400)
摘要:目的 研究维吾尔药铁力木不同极性部位的体外抗氧化活性。方法 以 Vc为对照，通过测定铁力木乙醇提取物、水提
取物及乙醇提取物石油醚(沸程 60 ～ 90℃)、乙酸乙酯、正丁醇、水各萃取物对 Fe3 +的还原能力、对 DPPH自由基(DPPH·)和
超氧自由基(O·
－
2 )的清除能力，研究铁力木的体外抗氧化活性。结果 铁力木各部位对 Fe
3 +均表现出一定的还原能力，对
DPPH·及 O·
－
2 均表现出一定的清除作用，但作用均弱于 VC。其中水层及正丁醇层对 Fe
3 +的还原能力较强，而其石油醚层和
乙酸乙酯层还原能力较弱;水层和水提取物对 DPPH·具有一定的清除能力;石油醚层及水提取物清除 O·
－
2 的作用较强。结
论 铁力木具有较好的抗氧化能力。
关键词:铁力木;抗氧化活性;铁离子还原反应;DPPH自由基;超氧自由基
doi:10． 3969 / j． issn． 1009 － 6469． 2016． 03． 004
Antioxidant activities of different polarity chemical
constituents from Mesua ferrea in vitro
MA Jun-peng1，WANG Xin-lin2，LI Yun3，et al
(1． Department of Pharmacy，Midong Hospital of People’s Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Ｒegion，
Urumqi，Xinjiang 830000，China;2． Pharmacy College，Xinjiang Medical University，
Urumqi，Xinjiang 830011，China;3． Department of Pharmacy，the Fifth Division Hospital
of Xinjiang Production and Construction Corps，Bole，Xinjiang 833400，China)
Abstract:Objective To study the antioxidant activity of the different polarity chemical constituents from the buds of Mesua ferrea．
Methods The capacity of ferric reducing antioxidant power and scavenging DPPH·，O·
－
2 of the ethanol total extract，water extract，pe-
troleum ether fraction，ethylacetate fraction，n － butanol fraction and water fraction from the buds of Mesua ferrea were evaluated by Fe3 +
reduction capacity experiments and DPPH·，O·
－
2 scavenging assay in vitro at different concentrations． The results were compared with
those of positive control vitamin C (VC)． Ｒesults The ferric reducing antioxidant power and DPPH·，O
·－
2 scavenging activity of dif-
ferent polarity chemical constituents from the buds of Mesua ferrea were weaker than those of VC ． Among them，the water fraction and n
－ butanol fraction exhibited strong reduction power of Fe3 + ． The water extract and water fraction demonstrated strong scavenging activi-
ties of DPPH·． The petroleum ether fraction and water extract demonstrated the strong scavenging activities of O·
－
2 ． Conclusions
Mesua ferrea has a strong antioxidant activity．
Key words:Mesua ferrea;antioxidant activity;ferric reducing antioxidant power;DPPH·;O·
－
2
维吾尔药铁力木为藤黄科(Guttiferae)植物铁
力木(Mesua ferrea Linn．)的干燥花蕾。其原植物主
要分布于在海拔 500 ～ 600 m 的亚热带地区，如:中
国云南、广东、广西及印度、斯里兰卡、马来西亚等
地［1］。铁力木植物的叶子、花、种子油脂及树皮均
可作为印度传统药物的常用药材，在民间主要作为
敷剂用于治疗消化不良、发烧、肾脏疾病等，铁力木
的花还具有治疗哮喘、咳嗽、发烧等功效［2］。铁力
木花蕾为维吾尔医常用药材，维吾尔名为那尔米西
克，主治湿寒性或黏液质性疾病，如寒性心虚、抑郁
症、神经衰弱、身寒阳痿、湿性胃虚等［3 － 4］。铁力木
还可制成复方制剂，如维药复方“艾比那尔米西克”
·124·安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2016 Mar;20(3)
用于治疗胃脘塞虚、胃纳不佳、腹痛腹胀等［3］。目
前，国外已有学者对铁力木花的化学成分及活性进
行了研究，从中分离得到萜类、环己二烯类、香豆素
类等化合物;还通过预实验确定铁力木花的环己烷
和苯提取物中主要有三萜类、树脂;乙醇提取物中
富含低聚糖、鞣质和皂苷类成分;而甲醇提取物中
也发现有生物碱、糖苷、鞣质、酚类、香豆素、甾体、
黄酮、皂苷及挥发油类成分。其甲醇提取物对雌性
大鼠具有体外的抗氧化活性和肝保护作用;水提取
物具有较强的清除 DPPH自由基的活性等［5 － 9］。但
国内对铁力木花的化学成分及活性研究报道较少，
艾力克木·吐尔逊等［10］报道了铁力木花的生药学
特征及其不同萃取部位抗血小板的聚集作用。因
此，为了更好地开发和利用该药材资源，本实验对
铁力木花不同极性溶剂的提取物及各萃取部位进
行体外抗氧化活性的初步研究，以期为其综合利用
和深入开发提供理论依据。
1 仪器与试药
1． 1 药材 铁力木药材购于新疆维吾尔自治区维
吾尔医院中心药房，经新疆医科大学药学院天药 /
生药教研室王晓梅副教授鉴定为藤黄科铁力木属
植物铁力木(Mesua ferrea Linn．)的干燥花蕾(批号:
201510301)。
1． 2 试药 DPPH(Sigma) ;VC 抗坏血酸(南京化
学试剂有限公司) ;铁氰化钾、邻苯三酚、过氧化氢、
硫酸亚铁、邻菲啰啉(郑州市德众化学试剂厂)。上
述试剂均为分析纯。
1． 3 仪器 T6 新世纪紫外可见分光光度计(北京
普析通用仪器有限责任公司) ;AB104 － N 电子分
析天平(梅特勒 － 托利多仪器上海有限公司，d =
0． 1 mg) ;HH － S4 数显恒温水浴锅(金坛市医疗仪
器有限公司) ;真空干燥箱(DZF － 6090 型，上海一
恒科学仪器公司) ;EYELAN － 1001 旋转蒸发仪(上
海爱朗仪器有限公司)。
2 方法
2． 1 铁力木不同极性部位的制备 称取 0． 5 kg 的
铁力木药材，以乙醇回流提取 3 次，每次 2 h，合并
提取液，浓缩得乙醇提取物。将乙醇提取物水混悬
后，依次用石油醚(沸程 60 ～ 90℃)、乙酸乙酯及正
丁醇萃取，得石油醚层，乙酸乙酯层，正丁醇层，水
层。另外，将乙醇提取后药渣用水煎煮 3 次，合并
煎煮液，浓缩得水提取物。流程图见图 1。
图 1 流程图
2． 2 抗氧化活性研究
2． 2． 1 Vc 溶液的制备 精密称取 Vc 对照品 10
mg 于 10 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，得 1 g·
L －1的 Vc 储备液。测定时，吸取适量储备液至 10
mL的容量瓶中，配成一系列浓度梯度的 Vc溶液。
2． 2． 2 各极性部位溶液的制备 精密称取铁力木
不同极性部位的浸膏各 10 mg，分别置于 10 mL 的
容量瓶中，加甲醇定容至刻度，得 1 g·L －1的不同
极性部位的储备液。测定时，吸取适量储备液至 10
mL的容量瓶中，配成一系列浓度梯度的供试品
溶液。
2． 2． 3 Fe3 +还原能力的测定［11］ 取干净试管若干
支，分别依次加入各样品溶液 2． 5 mL、pH 值为 6． 6
的磷酸盐缓冲溶液 2． 5 mL、1%铁氰化钾溶液 2． 5
·224· 安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2016 Mar;20(3)
mL，摇匀;将试管置于 50℃水浴中保温 20 min，取
出，快速冷却，分别加入 10% 三氯乙酸溶液 2． 5
mL，摇匀，离心 10 min;再分别取上清液 2． 5 mL，依
次加入蒸馏水 2． 5 mL、0． 1% FeCl3 溶液 0． 5 mL，充
分混匀，静置 10 min，在波长 700 nm 下测定吸光度
值 A(以蒸馏水作参比)。吸光度值越大，说明样品
对 Fe3 +的还原能力越强。
2． 2． 4 对 DPPH·的清除率的测定［12］ (1)DPPH·
溶液的配制:精密称取 DPPH 20 mg于 250 mL容量
瓶中，加无水乙醇溶解并定容至刻度，制成 0． 08 g·
L －1的 DPPH溶液，0 ～ 4℃避光保存。
(2)清除 DPPH·能力的测定:分别吸取 0． 08 g
·L －1的 DPPH 溶液 2 mL 于试管中，各加系列样品
溶液 1 mL和甲醇 1 mL，混合均匀，在 517 nm 处测
定吸光度值 Ai;另取试管，加入 3 mL 甲醇和各系列
样品溶液 1 mL，混合均匀，在 517 nm处测定吸光度
值 Aj;另取试管，分别吸取 0． 08 g·L
－1的 DPPH 溶
液 2 mL，加入甲醇 2 mL，混合均匀，在 517 nm 处测
定吸光度值 A0;每组测定三次。DPPH·清除率计
算公式如下:清除率(%)=［1 －(Ai － Aj)/A0］ ×
100%。
2． 2． 5 对超氧自由基清除率的测定［13］ 分别吸取
磷酸盐缓冲液(pH =8． 2)9 mL与各样品溶液 1 mL，
混合均匀后于 25℃恒温水浴 15 min。再分别吸取
混合液 3 mL，加入 45 mmol·L －1邻苯三酚溶液 0． 1
mL，摇匀，在第 4 分钟加入 10 mol·L －1盐酸 1 滴终
止反应，于 325 nm处测定样品吸光值 A1;同时分别
测定不加邻苯三酚溶液的样品溶液和磷酸盐混合
液的吸光值 A2 和以 1 mL溶剂代替样品溶液的磷酸
盐和邻苯三酚混合液的吸光值 A3，每组重复测定 3
次。超氧自由基清除率的计算公式如下:清除率
(%)=［1 －(A1 － A2)/A3］ × 100%。
3 结果
3． 1 铁力木不同极性部位对 Fe3 +还原能力的测定
还原能力的测定可以评价物质抗氧化活性的强
弱。实验中，样品的吸光度值越大，说明样品对
Fe3 +的还原能力越强。铁力木各极性部位和 Vc 对
Fe3 +的还原能力见图 2。由实验结果可以看出，铁
力木各极性部位和 Vc 对 Fe3 +均表现出一定的还原
能力，在实验浓度范围内它们对 Fe3 +的还原能力呈
良好的量效关系，即随着浓度的增加，清除率也逐
渐增加。但铁力木各极性部位的作用均弱于 Vc。
3． 2 铁力木不同极性部位清除 DPPH·的能力
因 DPPH·溶液在 517 nm处有最大吸收，当样品对
DPPH·有清除作用时，其吸光度值下降。因此，样
图 2 铁力木提取物和 Vc的还原能力
品对 DPPH· 的清除能力可以通过比较各溶液吸
光度值的变化来评价。铁力木各极性部位和 Vc 对
DPPH·的清除能力如图 3 所示。由实验结果可以
看出，铁力木各极性部位和 Vc对 DPPH·均表现出
一定的清除作用。在实验浓度范围内它们对DPPH·
的清除能力呈良好的量效关系，即随着浓度的增
加，清除率也逐渐增加。经过计算得各部位的 IC50
值分别为:Vc(0． 06 g·L －1)、水层(0． 06 g·L －1)、
正丁醇层(0． 18 g·L －1)、乙酸乙酯层(1． 19 g·
L －1)、石油醚层(0． 37 g·L －1)、水提物(0． 12 g·
L －1)、乙醇提取物(0． 83 g·L －1)。通过比较各部
位的 IC50值可知铁力木各极性部位的作用强弱顺序
为:水层 ＞水提取物 ＞正丁醇层 ＞石油醚层 ＞乙醇
提取物 ＞乙酸乙酯层。其水层对 DPPH·具有较强
的清除能力，作用相当于 Vc。
3． 3 铁力木不同极性部位清除超氧自由基的能力
对 O·
－
2 的清除能力实验采用邻苯三酚自氧化法。
根据公式计算出各样品对 O·
－
2 清除率，从而比较它
们对 O·
－
2 清除作用的大小。铁力木不同极性部位和
Vc对 O·
－
2 的清除作用见图 4。由实验结果可以看
出，铁力木各极性部位和 Vc 对 O·
－
2 均表现出一定的
清除作用，在实验浓度范围内它们对 O·
－
2 的清除能
力呈良好的量效关系，即随着浓度的增加，清除率
也逐渐增加。经过计算得各部位的 IC50值分别为:
Vc(0． 23 g·L － 1)、水层(1． 57 g·L － 1)、正丁醇层
(1 ． 46 g·L － 1)、乙酸乙酯层(1 ． 07 g·L － 1)、石
·324·安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2016 Mar;20(3)
图 3 对 DPPH·的清除能力
油醚层(0． 54 g·L －1)、水提物(0． 92 g·L －1)、乙醇
提取物(2． 93 g·L －1)。通过比较各部位的 IC50值
可知铁力木各极性部位的作用均弱于 Vc，其作用强
弱顺序为:它们的作用强弱顺序为:石油醚层 ＞水
提取物 ＞乙酸乙酯层 ＞正丁醇层 ＞水层 ＞乙醇提
取物。其中，石油醚层清除 O·
－
2 的作用最强，而正丁
醇层在低浓度时对 O·
－
2 基本无清除作用，只有当浓
度增大到0． 8 g·L －1时，才显出清除作用。
图 4 对 O·
－
2 的清除能力
4 讨论
体外抗氧化实验结果表明，铁力木不同极性
部位均具有一定抗氧化能力，尤其是高浓度的作
用明显强于低浓度，从而可以推断铁力木的抗氧
化作用与其各部位所含的的化学成分含量有关，
含量越高，则其抗氧化活性也就较强。因为本实
验为体外实验，并不能完全阐明铁力木的抗氧化
作用机制，因此若想把铁力木开发成天然的抗氧
化剂，还需对其体内的抗氧化作用机制进行更深
入的研究。
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·424· 安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2016 Mar;20(3)