免费文献传递   相关文献

山橿治疗胃溃疡及镇痛抗炎有效部位的筛选



全 文 :2011 年 5 月 1 日 第 5 期
No. 5 1 May 2011
中 医 学 报
CHINA JOURNAL OF CHINESE MEDICINE
第 26 卷 总第 156 期
Vol. 26 Serial No. 156
表 2 样品含量测定结果 (n = 2)
样品名称 平均含量 (%)
生黑丑 0. 010 0
炒黑丑 0. 001 2
生白丑 0. 016 0
炒白丑 0. 001 5
3 讨论
牵牛子经炒制后中咖啡酸含量降低为原来的 10%左右,
且高效液相色谱图显示炮制后化学成分发生了变化,含量有
升有降,并有新成分产生。炮制加热可能使具有强烈的泻下
作用的苷类分解,如牵牛子苷,起到缓和药性的目的;咖啡酸
对高温不稳定,导致炒制后咖啡酸含量降低;牵牛子经炒制
后,生物碱等成分的含量有减少[3]。传统理论认为牵牛子经
炒制后泻下作用缓和,临床使用更加安全,本研究通过实验
予以佐证。综上认为有必要对牵牛子进行液相色谱 -质谱
研究,为进一步揭示牵牛子的炮制机制奠定基础。
参考文献:
[1]刘春生,马泽新,常立军.黑丑和白丑的考证[J].中药材,1995,18
(8) :420 - 421.
[2]郑虎占.中药现代研究与应用[M].北京:学苑出版社,1998:3274 -
3279.
[3]王初,孙建宇.炮制对牵牛子有效成分及药效的影响[J]. 医药导
报,2008,27(7) :781 - 782.
收稿日期:2010 - 12 - 18
作者简介:田连起(1979 -) ,男,山东德州人,医学硕士,讲
师,研究方向为中药炮制与新药研发。Email:tianlianqi@ si-
na. com;Tel:15838264315。
编辑:秦小川
山橿治疗胃溃疡及镇痛抗炎有效部位的筛选*
Experimental Study on the Anti - ulcer and Anti - inflammatory Components in Lindera Reflexa
张 涛 Zhang Tao,陈随清 Chen Sui-qing,张 峰 Zhang Feng,雷敬卫 Lei Jing-wei
河南中医学院,河南 郑州 450008
Henan University of Chinese Medicine,Zhengzhou,Henan,China 450008
摘要:目的:筛选山橿对胃溃疡、镇痛抗炎作用的有效部位。方法:分别通过幽门结扎法和醋酸法制备大鼠胃溃疡模型实验;
扭体法和热板法小鼠疼痛模型实验;二甲苯致小鼠耳壳水肿炎症模型实验,观察山橿不同溶剂提取部位对各模型的影响。结
果:在抗胃溃疡实验中,挥发油组、乙酸乙酯组和正丁醇组对胃溃疡均有明显的抑制作用,其他部位组对胃溃疡的抑制作用不
明显。在镇痛抗炎实验中,挥发油组和乙酸乙酯组具有明显的镇痛抗炎作用,其他部位镇痛抗炎作用不明显。结论:山橿的
挥发油部位、乙酸乙酯部位对山橿的抗胃溃疡及抗炎镇痛作用效果明显。
Abstract:Objective:To filt the effective loc of Lindera reflexa Hemsltreating on gastrelcosis and analgesia and anti - inflammatory ac-
tion. Methods:Through model experiments,such as the pylorus ligation method and the acetic acid ulcer model of rats,writhing and hot
plate pain model of mice,xylene - induced earlap edema inflammation model of mice,observing the effect of Lindera reflexa Hemsl. in
different parts of solvent extraction. Results:In the experiments of anti - ulcer,volatile oil group,ethyl group and n - butyl alcohol group
were significantly inhibited gastric ulcer,the other parts of the group was not obvious inhibitory effect on gastric ulcer. In the Analgesic
experiment and anti - inflammatory experiment of mice,the volatile oil group and ethyl group have a significant anti - inflammatory and
analgesic effect,but the other groups have no significant anti - inflammatory and analgesic effect. Conclusion:The parts of volatile oil
and ethyl acetate part of Lindera reflexa Hemsl has obviously effect on anti - ulcer and anti - inflammatory.
关键词:山橿;抗胃溃疡;抗炎;镇痛;有效部位
Key words:Lindera reflexa Hemsl;anti - ulcer;anti - inflammatory;analgesic;effective parts
中图分类号 CLC number:R285. 5 文献标识码 Document code:A 文章编号 Article ID:1674 - 8999(2011)05 - 0597 - 03
山橿系樟科山胡椒属植物山橿(Lindera reflexa Hemsl)
* 基金项目:国家教育部科学技术研究重点项目(编号:
206085) ;河南省重点科技攻关计划(编号:082102330026)
的根。俗名土沉香、香棍等,主产于河南信阳大别山区,为中
成药“胃疼宁片”的主要原料,收载于《河南省中药材标
准》[1]。功能理气止痛,止血,消肿,主治胃脘胀痛,胃寒疼
痛,嗳气吞酸及消化性溃疡等症。本研究采用回流提取法将
·795·
DOI:10.16368/j.issn.1674-8999.2011.05.049
2011 年 5 月 1 日 第 5 期
No. 5 1 May 2011
中 医 学 报
CHINA JOURNAL OF CHINESE MEDICINE
第 26 卷 总第 156 期
Vol. 26 Serial No. 156
山橿分成石油醚组、乙酸乙酯组、正丁醇组、水部位组、挥发
油组 5 个部位组,分别通过大鼠急性和慢性胃溃疡模型,小
鼠扭体法和热板法疼痛模型,小鼠炎症模型等 5 种模型,筛
选出山橿抗胃溃疡及抗炎镇痛作用的有效部位,为进一步研
究山橿的活性成分提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 药品及试剂
山橿,采自于河南省新县,经我院鉴定为樟科山胡椒属
植物山橿(Lindera refLexa Hemsl.)的根。
胃疼宁片,河南羚锐制药股份有限公司,批号:071102。
水合氯醛,天津市化学试剂三厂,批号:20080109。冰醋酸,
开封化学试剂总厂,批号:20060603。二甲苯,洛阳市恒辉精
细化学品有限公司,批号:20060307。
1. 2 实验动物
清洁级 Wistar 小鼠 390 只,体质量 18. 0 - 25. 0 g,4 - 6
周龄,雌性,由河南省实验动物中心提供,动物合格证号:scxk
(豫)2007 - 0013。清洁级 Wistar 大鼠 140 只,体质量
180. 0 - 220. 0 g,4 - 6 周龄,雌雄各半,由河南省实验动物中
心提供,动物合格证号:scxk(豫)2006 - 0008。
1. 3 实验仪器
RE - 52A 旋转薄膜蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) ,Sar-
torius电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司) ,
FW100 型高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司) ,
YLS - 6A智能热板仪(山东省医学科学院设备站)。
1. 4 实验方法
1. 4. 1 药物制备 山橿药材,打粉,过 24 目筛,取粗粉
500. 0 g,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水溶剂回流提取
3 次,每次 2 h,滤过,浓缩至稠膏。得石油醚部位浸膏质量
17. 8 g,乙酸乙酯部位浸膏质量为 12. 4 g,正丁醇部位浸膏质
量为 12. 7 g,水部位浸膏质量为 36. 5 g。另取山橿粗粉
500. 0 g,用水蒸气蒸馏法提取挥发油得 10. 5 mL。
1. 4. 2 抗胃溃疡模型实验
包括急性胃溃疡模型实验(幽门结扎法)和慢性胃溃疡
模型实验(醋酸法)[2]。
1. 4. 2. 1 急性胃溃疡模型实验(幽门结扎法) Wistar 大鼠
70 只,随机分成 7 组:模型组、阳性对照组、石油醚组、乙酸乙
酯组、正丁醇组、水部位组,挥发油组,分别灌胃给药:模型组
生理盐水、阳性对照组胃疼宁片溶液(0. 225 g /kg剂量)及其
余各组山橿各溶剂部位提取物溶液(均按山橿药材 7 g /kg剂
量) ,每日 1 次灌胃给药,连续灌胃 7 d。用幽门结扎法造模,
于造模前 48 h禁食不禁水,造模 18 h 后脱颈椎处死,剖腹,
结扎贲门取胃。用肉眼和放大镜观察胃黏膜面,记录每组产
生溃疡的鼠数、溃疡数、每个溃疡面的最大直径、溃疡面积及
病变情况。计算溃疡指数和溃疡抑制百分率。
溃疡指数按 Guth标准[3]由每个溃疡面的最大直径计算
其溃疡指数,在解剖显微镜下以测微尺测定损伤长度(mm) ,
黏膜损伤长度 > 1 mm 者,每 1 mm 计 1 分;2 mm < 损伤长
度 < 3 mm计分加倍;3 mm <损伤长度 < 4 mm 按 3 倍计分,
以此类推,计分相加即为该动物的溃疡指数。
溃疡抑制百分率 =模型组溃疡指数 -给药组溃疡指数
模型组溃疡指数
×100%
1. 4. 2. 2 慢性胃溃疡模型实验(醋酸法) Wistar 大鼠半空
腹状态下随机分 7 组,分组方法同“1. 4. 2. 1”。从手术次日
起,分别灌胃给药:模型组生理盐水、阳性对照组胃疼宁片溶
液(0. 225 g /kg剂量)及其余各组山橿各溶剂部位提取物溶
液(均按山橿药材 7 g /kg 剂量) ,每日 1 次,连续灌胃 12 d。
第 14 天处死,观察并记录溃疡情况,计算溃疡指数和溃疡抑
制百分率。
1. 4. 3 疼痛模型实验
1. 4. 3. 1 扭体法 Wistar小鼠 130 只随机分为 7 组,分组方
法同“1. 4. 2. 1”。分别灌胃给药:模型组生理盐水、阳性对照
组胃疼宁片溶液(0. 289 g /kg)及其余各组山橿各溶剂部位
提取物溶液(均按山橿药材 9 g /kg) ,每天 1 次,连续灌胃
5 d。于造模前 24 h禁食不禁水,各组小鼠灌胃给药 120 min
后,腹腔注射 0. 6%冰醋酸 0. 015 mL /g,观察各组小鼠扭体
反应潜伏期,记录 15 min内每只小鼠扭体的次数。
1. 4. 3. 2 热板法 Wistar 小鼠 130 只,实验室适应 3 d 后,
进行预试:用 YLS - 6A智能热板仪(55 ± 5)℃筛选热板痛反
应时间合格的实验小鼠。分组方法同“1. 4. 2. 1”。分别灌胃
给药:模型组生理盐水、阳性对照组胃疼宁片溶液
(0. 289 g /kg)及其余各组山橿各溶剂部位提取物溶液(均按
山橿药材 9 g /kg) ,每天 1 次,连续灌胃 5 d。末次灌胃给药
后分别在 60、120、180 min时,将小鼠放入热板,测定痛阈值。
1. 4. 4 抗炎实验(小鼠耳廓肿胀法) 取 Wistar 小鼠 130
只,随机分为 7 组,分组方法同“1. 4. 2. 1”。分别灌胃给药:
模型组生理盐水、阳性对照组胃疼宁片溶液(0. 289 g /kg)及
其余各组山橿各溶剂部位提取物溶液(9 g /kg) ,每天 1 次,
连续灌胃 5 d。末次给药 1. 5 h后,将二甲苯均匀涂于小鼠右
耳前后两面,40 μL /只,左耳作自身空白对照。1 h后将小鼠
脱椎处死,用内径 9 mm打孔器分别在左、右双耳同一部位打
下圆耳片,天平上称取质量,右耳圆片质量减去左耳圆片质
量之差为肿胀度,计算肿胀抑制率[4]。
肿胀抑制率 =模型组肿胀度 -给药组肿胀度
模型组肿胀度
1. 5 统计学方法
结果采用 SPSS 13. 0 统计学软件,数值变量采用均数 ±
标准差(珋x ± s)进行统计描述,用单因素方差分析方法
(One - Way ANOVA)。P < 0. 05 为差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 抗胃溃疡实验
2. 1. 1 急性胃溃疡模型(幽门结扎法) 由统计结果显示:
乙酸乙酯组和挥发油组与模型组比较有显著性差异(P <
0. 01) ,正丁醇组与模型组比较差异有统计学意义(P <
0. 05)。见表 1。
·895·
2011 年 5 月 1 日 第 5 期
No. 5 1 May 2011
中 医 学 报
CHINA JOURNAL OF CHINESE MEDICINE
第 26 卷 总第 156 期
Vol. 26 Serial No. 156
表 1 山橿各部位对幽门结扎法所致大鼠胃溃疡的影响(珋x ± s)
组别 动物数(只) 剂量(g /kg) 溃疡指数(分) 抑制率(%)
模型组 10 - 35. 22 ± 3. 28 0. 00
阳性对照组 10 0. 225 17. 13 ± 2. 12** 51. 36
石油醚组 10 7. 000 28. 63 ± 1. 46 18. 71
乙酸乙酯组 10 7. 000 18. 88 ± 1. 93** 46. 39
正丁醇组 10 7. 000 24. 75 ± 2. 23* 29. 73
水部位组 10 7. 000 28. 00 ± 2. 58 20. 50
挥发油组 10 7. 000 14. 50 ± 1. 36** 58. 77
注:与模型组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05。
2. 1. 2 慢性胃溃疡模型(醋酸法) 由统计结果显示:挥发
油组、乙酸乙酯组和正丁醇组与模型组比较有显著性差异
(P < 0. 01)。见表 2。
表 2 山橿各部位对醋酸法所致大鼠胃溃疡的影响(珋x ± s)
组别 动物数(只) 剂量(g /kg) 溃疡指数(分) 抑制率(%)
模型组 10 - 20. 88 ± 2. 00 0. 00
阳性对照组 10 0. 225 10. 03 ± 1. 09** 51. 48
石油醚组 10 7. 000 16. 38 ± 1. 35 21. 55
乙酸乙酯组 10 7. 000 11. 38 ± 0. 98** 45. 50
正丁醇组 10 7. 000 14. 38 ± 1. 22* 31. 13
水部位组 10 7. 000 16. 78 ± 1. 36 19. 64
挥发油组 10 7. 000 9. 89 ± 1. 05** 52. 63
注:与模型组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05。
2. 2 疼痛模型实验
2. 2. 1 扭体法 统计结果显示:挥发油组和乙酸乙酯组与
模型组比较差异有统计学意义(P < 0. 05)。见表 3。
表 3 山橿各部位对冰醋酸法所致小鼠扭体反应的影响(珋x ± s)
组别 动物数(只) 剂量(g /kg) 扭体次数 15 min平均数
模型组 10 - 44. 90 ± 11. 39
阳性对照组 20 0. 289 28. 30 ± 8. 07*
石油醚组 20 9. 000 38. 10 ± 8. 94
乙酸乙酯组 20 9. 000 32. 15 ± 7. 08*
正丁醇组 20 9. 000 36. 15 ± 7. 08
水部位组 20 9. 000 40. 20 ± 9. 05
挥发油组 20 9. 000 31. 20 ± 8. 21*
注:与模型组比较,* P < 0. 05。
2. 2. 2 热板法 统计结果显示:挥发油组和乙酸乙酯组与
模型组比较有显著性差异(P < 0. 01) ,正丁醇组与模型组比
较,差异有统计学意义(P < 0. 05)。见表 4。
表 4 山橿各部位对热板法小鼠痛域值的影响(珋x ± s)
组别 动物数(只)
给药前
痛阈(S)
给药后 1 h
痛阈(S)
给药后 2 h
痛阈(S)
给药后 3 h
痛阈(S)
模型组 10 18. 7 ± 5. 3 17. 9 ± 5. 1 19. 2 ± 5. 3 18. 3 ± 4. 8
阳性对照组 20 19. 3 ± 5. 7 23. 2 ± 4. 8 25. 6 ± 4. 1** 24. 1 ± 4. 9**
石油醚组 20 19. 6 ± 5. 4 21. 3 ± 4. 2 22. 5 ± 4. 7 20. 8 ± 4. 8
乙酸乙酯组 20 19. 1 ± 5. 1 23. 1 ± 4. 4 24. 6 ± 3. 8** 23. 6 ± 4. 0*
正丁醇组 20 19. 3 ± 6. 4 22. 8 ± 5. 7 23. 7 ± 4. 3* 21. 8 ± 3. 2
水部位组 20 18. 9 ± 5. 8 19. 8 ± 5. 2 21. 0 ± 4. 2 20. 3 ± 5. 3
挥发油组 20 19. 3 ± 6. 1 21. 3 ± 4. 7 24. 2 ± 4. 7** 23. 3 ± 5. 3
注:与模型组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05。
2. 3 抗炎实验
统计结果显示:挥发油组与模型组比较有显著性差异
(P < 0. 01) ,乙酸乙酯组与模型组比较有差异(P < 0. 05)。
见表 5。
表 5 山橿各部位对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(珋x ± s)
组别 动物数(只) 剂量(g /kg) 肿胀度(mg) 肿胀抑制率(%)
模型组 10 - 15. 21 ± 5. 73 -
阳性对照组 20 0. 289 8. 04 ± 4. 35** 47. 14
石油醚组 20 9. 000 10. 97 ± 4. 57 27. 88
乙酸乙酯组 20 9. 000 9. 17 ± 5. 03* 39. 71
正丁醇组 20 9. 000 10. 59 ± 5. 34 30. 37
水部位组 20 9. 000 11. 49 ± 5. 10 24. 46
挥发油组 20 9. 000 8. 91 ± 4. 37** 41. 42
注:与模型组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05。
3 讨论
本研究发现山橿的乙酸乙酯组及挥发油组和正丁醇组
均有抑制胃溃疡的作用,乙酸乙酯组和挥发油组效果更好一
些。在镇痛、抗炎实验中山橿的挥发油及乙酸乙酯部位表现
出了明显的镇痛、抗炎作用,其他部位镇痛、抗炎作用不明
显。综合考虑,山橿治疗胃溃疡及抗炎镇痛作用的部位应为
挥发油和乙酸乙酯部位[5 - 6]。
“胃疼宁片”的提取工艺为水蒸气蒸馏提取挥发油,残渣
水煎煮,浓缩成膏。因此,“胃疼宁片”是山橿挥发油与水提
取物综合发挥疗效的。而本实验中山橿挥发油及各溶剂提
取部位是分别进行实验观察的。所以,各部位疗效作用均弱
于阳性对照(胃疼宁片)组,这也是符合实际情况的。
参考文献:
[1]河南省卫生厅.河南省中药材标准[S].郑州:中原农民出版社,
1992:10.
[2]陈奇.中药药理研究方法学[M]. 北京:人民卫生出版社,1993:
462.
[3]Guth ph,Aures D,Paulsen G. Topical aspirin plns Hcl gastric lesion
in the rat[J]. Gastroenterology,1979:76(1) :76 - 88.
[4]辛增辉,季春,肖丹,甘丽,吴启富,佟丽.湿热痹颗粒镇痛抗炎作
用的实验研究[J].中药新药与临床药理,2009,20(2) :123 - 126.
[5]雷敬卫,陈随清,王三姓. 山橿正丁醇部位成分研究[J]. 中医学
报,2010,25(1) :116 - 117.
[6]李雪菊,雷敬卫,陈随清. 山橿对幽门螺杆菌的抑菌实验研究
[J].中医学报 2010,25(5) :908,911.
收稿日期:2010 - 12 - 28
作者简介:张涛(1983 -) ,男,河南郑州人,硕士研究生,研究
方向:中药规范化种植及质量标准研究。Email:379117207@
qq. com;Tel:13938468361。
通讯作者:陈随清,博士,教授,研究方向:中药品种整理及质
量标准研究。Email:suiqingchen@ sohu. com;Tel:86 - 371 -
65676686。
编辑:秦小川
·995·