全 文 ：匀的液体制剂，混悬剂中部分溶解的药物和小颗粒药
物注射入动物机体后，可在较短时间内达到血药峰浓
度，从而迅速发挥药效;缓释部分为药物悬浮颗粒，由
于其释放缓慢，因而起到长时间维持有效药物浓度的
作用［8-11］。帕潘立酮自身性质符合制成混悬剂的条
件。在筛选处方时，考虑到混悬剂药物的分散度大、化
学性质不稳定等因素，因此按照正交设计进行了严格
筛选，并以混悬剂稳定性为重点考察项目对样品进行
了考察，同时考虑到在未来实际使用的需要，对终产品
进行了冷冻干燥处理，增加了存储过程中的稳定性。
结果显示，根据最终处方制成的样品符合混悬剂的要
求，稳定性较好。
对由难溶性药物制备的混悬剂而言，主药的粒径
对混悬剂的体外释放行为有直接的影响，通过对粒径
的控制可以在一定程度上控制混悬剂在体内的起效速
度，因此本实验在正交筛选过程中以粒径为指标进行
筛选，并选取粒径最小的处方为最优处方，考察该处方
条件下样品稳定性，通过加速实验证明了该混悬剂的
稳定性良好，也为以后进一步研究混悬液的粒径与其
体内外释药速度的关系奠定了基础。
参考文献
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DOI 10． 3870 /yydb． 2014． 09． 029
鄂西北地区不同采收期竹叶柴胡中柴胡多糖含量变化*
叶方1，杨光义1，杜士明1，王刚1，杜婷1，孙荣进2
(1．湖北医药学院附属太和医院药学部，十堰 442000;2．湖北医药学院药学院，十堰 442000)
摘 要 目的 以鄂西北地区竹叶柴胡为样本，研究柴胡多糖的动态变化规律，探讨该地区竹叶柴胡最佳采收期。
方法 采用蒽酮-硫酸比色法，检测波长 620 nm，分别测定柴胡中可溶性多糖和粗多糖，计算总多糖含量。结果 不同采
收期竹叶柴胡中柴胡多糖含量为 9． 642% ～15． 479%，具有明显差异，总多糖含量在 11 月底种子成熟时最高。结论 鄂
西北地区竹叶柴胡的最适采收期为每年 11 月底。
关键词 竹叶柴胡，鄂西北;多糖;采收期
中图分类号 Ｒ282． 71;Ｒ927． 2 文献标识码 B 文章编号 1004 － 0781(2014)09 － 1219 － 03
Content Variation of Bupleurum Polysaccharides from Bupleurum marginatum at
Different Collecting Periods in Northwest of Hubei Province
YE Fang1，YANG Guang-yi1，DU Shi-ming1，WANG Gang1，DU Ting1，SUN Ｒong-jin2 (1． Department of
Pharmacy，Taihe Hospital Affiliated with Hubei University of Medicine，Shiyan 442000，China;2． School of
Pharmacy，Hubei University of Medicine，Shiyan 442000，China)
ABSTＲACT Objective To study the dynamic change of polysaccharides from Bupleurum marginatum in Northwest of
Hubei province，and to explore the optimal harvest period for Bupleurum marginatum． Methods The contents of soluble and
crude Bupleurum polysaccharides were determined by anthrone-sulphuric acid colorimetric method and detected at 620 nm，and
total polysaccharide content was calculated． Ｒesults The content of polysaccharides at various collecting periods was very
different from 9． 642% to 15． 479%，and reached the highest level in November when the seed comes to mature． Conclusion
·9121·医药导报 2014 年 9 月第 33 卷第 9 期
The optimal harvest period for Bupleurum marginatum in Northwest of Hubei is at the end of November．
KEY WOＲDS Bupleurum marginatum Wall． ex DC．;Northwest of Hubei province;Polysaccharides;Collecting periods
柴胡是传统大宗药材，《中华人民共和国药典》只
收载了伞形科植物北柴胡(BupLeurum chinese DC．)或
狭叶柴胡(BupLeurum scorzonerifo Lium willd．)的干燥
根，但竹叶柴胡(BupLeurum marginatum Wall． ex DC．)
也作为柴胡市场上第三大药材来源广泛应用［1-2］。鄂西
北地区所产竹叶柴胡因质量较优而畅销国内外［3］，说明
鄂西北地区的气候条件适合该植物生长，有利于在本地
区发展符合《中药材生产质量管理规范》(Good
Agricultural Practices，GAP)的种植。而确定最佳采收期
是 GAP种植的关键技术，笔者以柴胡多糖为指标考察
其在不同生长周期累积情况，为建立柴胡 GAP 种植的
关键技术提供参考。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 TU-1901 型双光束紫外-可见光分光光度
计(北京普析通用仪器有限责任公司);FA2004 型电
子天平(上海精科公司);CQX25-06 型超声波震荡器
(上海必能信超声有限公司)。
1． 2 试药 柴胡样品经湖北中医药大学中药资源和
中药复方教育部重点实验室陈科力教授鉴定为竹叶柴
胡(BupLeurum marginatum Wall． ex DC．)。样品在阳
光下晒干后打粉，过孔径 0． 25 mm(四号)筛备用。无
水葡萄糖(天津市科密欧化学试剂开发中心，批号:
20020128，含量 99． 2%);蒽酮、浓硫酸、盐酸等试剂均
为分析纯，水为自制纯化水。
2 方法与结果
2． 1 样品溶液的制备
2． 1． 1 可溶性多糖的提取 精密称取 60 ℃干燥至
恒质量的竹叶柴胡粉末 1 g，置具塞三角烧瓶中，加入
82%乙醇溶液 45 mL 浸泡 30 min 后超声提取 30 min
两次，过滤，合并两次滤液于 100 mL 量瓶中，加 82%
乙醇溶液定容，备用［4］。保留滤渣备用。
2． 1． 2 粗多糖的提取 将“2． 1． 1”项中的滤渣 60 ℃
收稿日期 2013 － 09 － 20 修回日期 2014 － 03 － 30
基金项目 * 科技部 2010 年度科技型中小企业技术创新
基金资助项目(10C26214204534);湖北省 2011 年计划项目
(2011JA-2013CXTT09)
作者简介 叶方(1971 －)，男，湖北十堰人，副主任药师，
副教授，学士，从事医院药学工作。电话:0719 － 8801393，E-
mail:yxwen8801129@ sina． com。
通讯作者 杨光义(1975 －)，男，湖北十堰人，副教授，副
主任药师，博士，主要研究方向:中药资源开发和新药研究。电
话:0719 － 8801393，E-mail:ygy996@ 163． com。
烘干，加入 2%盐酸溶液 45 mL，100 ℃水浴提取两次，
每次 1 h，冷却后过滤。合并两次滤液至 100 mL 量瓶
中，以 2%盐酸溶液定容，备用。
2． 2 对照品溶液的制备 取无水葡萄糖于 60 ℃烘
1 h，再逐渐升温至 105 ℃干燥至恒质量。精密称取干
燥恒质量的无水葡萄糖 10． 3 mg置 100 mL量瓶中，用
纯化水溶解并定容至刻度，作为对照品溶液贮备液。
2． 3 显色剂的制备 称取蒽酮 0． 2 g，置 100 mL量瓶
中，逐渐加入浓硫酸至刻度，边加边搅拌使蒽酮充分溶
解，作为显色剂备用(需用前现配)。
2． 4 线性关系考察 分别精密量取“2． 2”项中的对
照品贮备液 0． 0，0． 2，0． 4，0． 6，0． 8，1． 0 mL 置于具塞
试管中，以纯化水补足 1． 0 mL 后每支试管中加入蒽
酮-硫酸 5． 0 mL，迅速摇匀，暗处放置 30 min待溶液完
全冷确后于 620 nm处测定吸光度，记录数据，以无水
葡萄糖的质量 X(mg)为横坐标，以吸光度(A)为纵坐
标，绘制标准曲线，得回归方程:A = 5． 887 5X －
0． 022 2，r = 0． 995 7，说明无水葡萄糖在 0． 021 ～
0． 103 mg范围内呈良好的线性关系。
2． 5 精密度实验 取含量测定项下同一供试品溶液，
连续测定 6 次，记录吸光度，得 ＲSD为 1． 59%，表明仪
器精密度良好。
2． 6 稳定性实验 取含量测定项下同一供试品溶液，
分别于 0，15，30，60，120，180 min 测定吸光度，结果
ＲSD为 1． 82%，表明供试品溶液在 3 h内稳定。
2． 7 重复性实验 精密称取 9 月采集的竹叶柴胡粉
末 6 份，每份 1． 0 g，按“2． 1”项样品提取方法处理，提
取可溶性多糖和粗多糖，测定吸光度，结果可溶性多糖
和粗多糖的 ＲSD 分别为1． 73%，1． 96%，表明方法重
复性较好。
2． 8 加样回收率实验
2． 8． 1 可溶性多糖加样回收率实验 精密称取已知
可溶性多糖含量的 9 月采集的竹叶柴胡粉末 6 份，每
份 1． 0 g，置具塞锥形瓶按“2． 1． 1”项方法处理，样品
提取后于滤液中分别精密加入 6． 03 mg·mL －1葡萄糖
对照品溶液 4 mL，以 82%乙醇定容后，按“2． 4”项操
作，计算可溶性多糖含量和回收率，结果平均回收率为
97． 65%，ＲSD =2． 13%，见表 1。
2． 8． 2 粗多糖加样回收率实验 取“2． 1． 1”项滤渣按
“2． 1． 2”项方法处理，样品提取后于滤液中分别精确加
入 19． 02 mg·mL －1葡萄糖对照品溶液 5 mL，以 2%盐
酸定容至 100 mL，混匀，从中精密量取 2 mL 稀释至
·0221· Herald of Medicine Vol. 33 No. 9 September 2014
50 mL，测定吸光度，计算粗多糖加样回收率，结果粗多
糖平均回收率为 98． 04%，ＲSD =1． 29%。见表 2。
表 1 可溶性多糖的加样回收实验
Tab． 1 Ｒecovery test of the soluble polysaccharide
样品量 /
g
原有量 加入量 测得量
mg
回收率 /
%
0． 999 3 24． 37 24． 11 47． 53 96． 06
1． 021 0 24． 90 24． 11 48． 18 96． 56
1． 000 4 24． 39 24． 11 47． 79 97． 06
1． 005 8 24． 53 24． 11 48． 37 98． 88
1． 016 1 24． 78 24． 11 47． 93 96． 02
1． 005 7 24． 52 24． 11 48． 95 101． 33
表 2 粗多糖的加样回收实验
Tab． 2 Ｒecovery test of the crude polysaccharide
样品量 /
g
原有量 加入量 测得量
mg
回收率 /
%
0． 999 3 94． 78 95． 09 188． 42 98． 48
1． 021 0 96． 84 95． 09 189． 01 96． 93
1． 000 4 94． 89 95． 09 189． 16 99． 14
1． 005 8 95． 40 95． 09 187． 98 97． 36
1． 016 1 96． 38 95． 09 188． 25 96． 61
1． 005 7 95． 39 95． 09 190． 23 99． 74
2． 9 含量测定
2． 9． 1 可溶性多糖的含量测定 精密量取“2． 1． 1”项
可溶性多糖提取液5． 0 mL加82%乙醇稀释至25 mL量
瓶中，混匀后，从中精密量取 1． 0 mL 加入具塞试管中，
再加入显色剂蒽酮-浓硫酸试剂5． 0 mL，迅速混匀，避光
放置 30 min，冷却至室温，以 82%乙醇为空白，在波长
620 nm处测定吸光度，计算可溶性多糖含量。
2． 9． 2 粗多糖的含量测定 取“2． 1． 2”项粗多糖提
取液 2． 5 mL 置 25 mL 量瓶中，加 2%盐酸定容至刻
度，混匀后，精密移取1． 0 mL至具塞试管中，再加入蒽
酮-浓硫酸试剂 5． 0 mL，迅速混匀，避光放置 30 min，冷
却至室温，以 2%盐酸溶液为空白，于波长 620 nm 处
测定吸光度，记录数据，结果见表 3。
可见，柴胡中可溶性多糖、粗多糖的动态变化规律
基本一致，从春末到秋季，柴胡多糖含量呈上升趋
势［5］，到种子成熟、地上部分枯萎，根部开始发出越冬
芽时多糖含量又开始下降。
3 讨论
对鄂西北地区竹叶柴胡不同采收期多糖含量动态
积累规律分析表明，水溶性多糖含量呈持续上升趋势;
粗多糖在 7 月底含量反而下降，随后又明显上升，直到
11 月种子完全成熟，地上部分开始枯萎，至 12 月从根
部发出越冬芽，多糖含量又开始缓慢下降，但仍然高于
春末夏初柴胡中多糖含量，说明从柴胡多糖的角度，种
植基地竹叶柴胡最佳采收期是在种子成熟以后。
表 3 不同采收期柴胡中柴胡多糖含量测定结果
Tab． 3 Content determination of polysaccharides from
Bupleurum at various collecting %
样品编号 采集时间 可溶性多糖 粗多糖 总多糖
1 2012 年 5 月 30 日 2． 062 9． 789 11． 851
2 2012 年 6 月 30 日 1． 627 9． 869 11． 496
3 2012 年 7 月 31 日 1． 862 7． 780 9． 642
4 2012 年 8 月 30 日 2． 680 9． 474 12． 154
5 2012 年 10 月 7 日 2． 438 9． 485 11． 923
6 2012 年10 月30 日 2． 879 12． 000 14． 879
7 2012 年11 月30 日 3． 385 12． 094 15． 479
8 2012 年12 月30 日 3． 665 11． 031 14． 696
对柴胡生长的物候学观察发现:同一地域，不同产
区种植的柴胡生长周期也有明显差别，十堰城区湖北
医药学院百草园种植的竹叶柴胡生长周期比房县柴胡
种植示范基地中种植的柴胡提前 1 个月。种植时间不
同、每年气候差异也会影响其生长周期，所以应根据时
间结合生命周期确定柴胡最佳采收期。
前期实验表明，按照《中华人民共和国药典》控制
柴胡质量方法测定不同采收期柴胡皂苷 a、d 含量，结
果在 7 月柴胡皂苷 a、d 含量达最高值，随后呈下降趋
势［5］，与本实验中测量柴胡多糖走势相反，说明柴胡
在生长过程中，不同成分动态累积过程并不一致，可能
会发生相互转化，也说明采收药材的最佳时期还应结
合用药目的确定。
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·1221·医药导报 2014 年 9 月第 33 卷第 9 期