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作 者 ：郝朝运;张小平;范睿;

期 刊 ：激光生物学报 2008年 05期 页码：701-706

关键词：永瓣藤；ISSR；反应体系；热循环参数；

摘 要 ：以永瓣藤基因组DNA为模板,通过单因子、双因子实验研究了ISSR反应体系中主要成分(Mg2+、dNTP、引物、模板DNA、TaqDNA聚合酶)以及热循环参数(退火温度、循环数、变性时间、退火时间、延伸时间)对扩增结果的影响,并找出各自的最适条件,建立了适合永瓣藤ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μL反应体系中,内含1×PCRbuffer、1.5mmol/LMg2+、200μmol/LdNTP、0.5μmol/L引物、50ng模板、2UTaqDNA聚合酶。扩增程序为94℃预变性5min,然后进行35个循环:94℃变性30s,复性1min,72℃延伸1min,循环结束后72℃延伸7min。...

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