全 文 ：第 9 2卷 第 1 2期
20 07 年 1 2月
中 国 预 防 兽 医 学 报
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a lo f P re ve n ti ve Ve tei ra ny rM e i dei ne
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9 2
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12
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2 00 7
云南贯众驱猪蛔虫活性成分的鉴定及其体外杀虫试验研究
肖 啸 ’ , 李志敏 ’ ` , 王兆炜 ’ , 李红卫 4 , 李春艳 ’
l(
. 云南农业大学 动物科学技术学院 , 云南 昆明 6 5 0 2 01 ; 2 , 大理州兽医站 , 云南 大理 67 10 0 ; 3 . 大理州农业局 ,
云南 大理 67 10 0 ; 4 . 大理州人民政府 , 云南 大理 6 71 0 小 5 . 大理州质量技术监督局 , 云南大理 6 7l 0 0() )
摘 要 : 通过研究云南贯众 (C yrt o m in m yu n an en s e) 的化学成分 , 用硅胶和凝胶柱色谱进行分离 , 根据理
化性质 、 波谱特征鉴定结构 。 结果从其甲醉提取物 中分 离并鉴定 了 4 个化合物 : 山奈酚 一 3 , 7一 a 一 L 一 二鼠李糖苍
( K a e m p化 r o l 3 , 7 一a 一 L一D i由 a m n o p” n o s id e ) ( l ) , 山 奈酚 一 3一a 一 L一 ( 4一。 一 乙 酞 基 ) 鼠 李糖 基 一 7一 a 一卜 鼠李糖 替
[K a e m p fe r o l 3
一a 一 L
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o p帅 n o s i de 一 7一 a 一 L一 ht a nm o p” n o s i de ]( 2 ) , 山奈酚 一 3一a 一 L一 (2 , 4一 二 乙跳基 ) 鼠
李糖替 一 7一 a 一 L一 鼠李糖普 [K a e m p fe or l3一 a 一 L一 ( 2 , 4一 0 1一。 一 a c e ty 一) r h a m n o p” n o s i d e 一 7一a 一 L 一巾amn o p” n o s i de ]( 3 ) , p 一 谷苗醉 ( p 一 is tos et or l) (4) 。 利用猪蛔 虫 24 孔 N U N C 细胞培养板 , 对云南贯众 中提取分 离的四种化合物的抗蠕 虫活
性进行检测 , 并作离体毒理试验 , 利 用纤毛 虫检测器来计数 死活 虫卵 。 结果 4 个化合物中 , 化合物 2 效果最佳 ,
其次是化合物 4 、 化合物 1 , 化合物 3 最差 〕 4 个化合物均 为首次从云南贯众 中分 离得到的单体 , 化合物 2 有望
开发成为一种新的驱蛔虫药
关健词 : 云南贯众 ; 化学成分 ; 分离提取及鉴定 ; 猪蛔 虫 ; 离体毒理作 用
中图分类号 : 5 85 4 . 5 文献标识码 : B 文章编号 : 100 8 一 05 89 ( 20 0 7) 12一 09 7 2一0 5
E f e e fS o f c h e m ie a l e o n s t it u e n t s o f C y rt o m iu m
y u n n a n e n s e o n A s ca irS s u u m in v it ro
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A b s t r a ot : C h e m ie a l e o m Po n e n ts o f C yrt
o m iu m yU n n an e n s e w e re e x tI’a e t e d b y e o lu mn e h r o m a ot gr a Phy o f s ili e a 一g e l a n d
s e Ph a d e x n n d a n a l y s e d b y IR
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Fo u r e o m Po u n d s w e re o b at i n e d an d i d
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一卜ht a mn o P丫ar n o s id e (2 ) 15 m o s t e fe e t iv e , fo ll o w e d by
e o m Po u n d 4
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K e y wo
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n n a n e n s e : e h e m i e a l e o n s t itu e n ts ; is o l a t e e x tI’a e t an d id e n t iif e at i o n : A scan s s u u m : t o x ie o l o gy
fu n e t io n in v itr o
* C o re
s P o n d i n g a u th o r
收稿 日期 : 20 07 一0 3 一 15
墓金项 目 : 云南省 自然科学基金资助项 目 (2 004 C 0040 M )
作者简介 : 肖 啸 ( 19 6 一 ) , 男 , 云南昆明人 , 硕士 . 主要从事动物寄生虫病学研究 .
* 通讯作者
第 2 1期 肖 啸 , 等 . 云南贯众驱猪蛔虫活性成分的鉴定及其体外杀虫试验研究
我们于 2 00 年一 2 004 年在全省 78 个县市开展
了猪寄生虫区系调查 。 通过调查 , 基本搞清了猪寄
生虫的种类 、 分布状况 、 流行规律和优势虫种 , 为
猪寄生虫病的防治提供了科学依据 。 从感染率 、 感
染强度 、 危害程度以及分布范围等情况分析 , 我省
猪较为严重的虫种即优势虫种为猪蛔虫川 。 感染寄
生虫的猪日增重率下降 2 % ~ 69 % , 饲料转化率下
降 1 % 一 3 % 2[] , 影响猪肉和猪皮的品质 , 引起发
病和死亡 , 给养猪业造成重大经济损失 。 其中危害
最严重 的人畜共患寄生虫可引起人的发病甚至死
亡 。 目前研究开发无毒副作用 、 无残留的中草药来
替代化学合成药已成为兽医界 的一个新的研究热
点 。 天然中草药无毒副作用和多能性是化学合成药
所无法比拟的 , 中草药在畜牧兽医上的应用上仍处
于研究阶段 , 其主要用在以下几个方面 : 促生长 `,杰
预防仔猪黄白痢 `5] ; 母猪催情 、 催奶及公猪壮阳的
治疗 .l6 ” ; 防治喘气病 、 肠胃炎 、 抗商品猪热应激 〔8 , ;
从植物中提取活性物质或抗菌成分替代抗生素 , 其
中尤以饲料添加剂居多 , 用中草药防治猪只的寄生
虫报道较少 , 其作用机 制尚属空 白 。 云南贯众
(C yrt
o m i u m yu
n n a n e n s e ) 是鳞毛蔗科贯众属植物 `9 , ,
该植物的植株高 40 c m ~ 60 c m , 主产于景冬 、 新
平 、 双柏 , 生于海拔 1 6 0 0 m 一 1 90 0 m 的常绿阔叶
林 。 鉴于 云南贯众在云南分布较广具有丰富的资
源 , 可利用 、 开发前景较大 , 因此选用云南贯众进
行化学成分的分离提取及活性的筛选 , 为云南贯众
的开发利用奠定了基础 。
1 材料和方法
1
.
1 试验地点 药物活性成分的分离鉴定在中国科
学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源利用
国家重点试验室进行 , 药物活性试验在云南农业大
学动物寄生虫试验室完成 。
1
.
2 试脸材料 中药采于云南省思茅地区景谷县中
山乡新民村马鞍山 。 猪蛔虫采集于昆明市兰龙潭 肉
联场肠道清洗车间 , 置于 0 . I M 硫酸中放置 1个 月
以上 , 以使幼虫达到生理上的成熟 。
1
.
3 化合物的提取与分 离
1
.
3
.
1 提取 : 云南贯众 I gk 粉碎 ( 20 目) , 甲醇振
荡提取 4 次 (3 5 0 m U 次 ) , 提取液减压浓缩至浸
膏 13 0 . 5 9 , 依次用石油醚 ( 60 ℃ ~ 90 ℃ ) 、 乙酸乙
醋 、 正丁醇萃取 , 分别减压回收溶剂 , 得到石油醚
提取物 12 5 9 , 乙酸乙醋提取物 16 9 , 其余部分为
正丁醇萃取物和水层剩余物 。
1
.
3
.
2 分离及鉴定 : 用硅胶和凝胶柱色谱进行分离 ,
根据理化性质 、 波谱特征鉴定结构 。 石油醚 ( 60 ℃
一 9 0 ℃ ) 部分经硅胶柱色谱 , 经过反复硅胶柱层
析 , 以氯仿一 甲醇系统梯度洗脱薄层检测 , 合并
相 同组份 , 薄层制备 , 最后得到 2 个单体化合物 1
( 80
.
5 m g ) 与化合物 4 ( 2 3 m g ) ; 乙酸乙醋部分经
反复硅胶柱色谱 , 以氯仿一 甲醇系统梯度洗脱薄层
检测 , 合并相同组份 , 薄层制备 , 最后得到 卫个单
体化合物 2 ( 8 8 . 5 m g ) , 后上 s e p h a d e x L H 2 2o 凝 胶
得到化合物 3 (6 6 m g ) 。
1
.
3
.
3 猪蛔虫的培养 : 收集猪蛔虫洗干净 , 雄虫全
部弃去 , 雌虫放入冰箱中 (4 ℃ ) 过夜 , 摘除猪蛔
虫子宫用次氯酸钠 (N a 1C 0 ) 溶液除去虫卵蛋 白膜 。
虫卵调整好浓度后 , 室温下放至黑暗的环境中 , 任
其充分发育 。 每星期摇动 3 次 , 同时每次打开瓶盖
通气 。 每星期的同一天 , 对培养瓶中的虫卵进行检
查 , 取 0 . 1 m L 的虫卵液放到载玻片上 , 在 10 x lo 倍
显微镜下检查 。 共计 30 个虫卵左右 , 记录所得
结果 。
1
.
4 中药培养板的制作
1
.
4
.
1 取 l 块 24 孔 N U N C 细胞培养板 , l句 A I 、 B I 、
C l
、
D I 各孔内加入 2 4 60 林L o M EM 培养基 (加入
庆大霉素 50 林留m L , 两性霉素 B 10 卜留m )L , 向其
余各孔内加入 1 0 0 0 林L D M EM 培养基 (即每种药
物作 6 个稀释度 ) 。
1
.
4
.
2 向 A I 、 B I 、 C I 、 n l 各孔 中分别加 入 4 0 林L
不 同的药物混匀 , 从每种药物中取 出 1 00 卜L 溶
液 , 加入到随后第 2 孔中 , 混匀后再从第 2 孔内吸
取 1 0 0 林L 溶液加入第 3 孔中 , 如此重复 , 直到第
6 孔 , 然后从第 6 孔中吸出 1 0 0 林L 溶液弃去 。 并
从第 1孔内吸出 5 0 林L 溶液弃去 。
1
.
5 幼 虫计数方法
1
.
5
.
1 调整虫体浓度时 , 采用普通光学显微镜 , 在
10 x 10 倍下计数 。
1
.
5
.
2 利用纤毛 虫检测器 , 与 白细胞分类 计数相
似 , 记录结果 。
1
.
6 死活 虫卵的判断 活卵 : 虫卵大小正常 , 轮廓
结构清晰 , 卵内幼虫结构清晰 , 发育良好 , 可见卵内
幼虫蠕动 ; 死卵 : 内容物结构模糊 , 卵内出现空泡 ,
中 国 预 防 兽 医 学 .报 20 7年
幼虫裂解呈块状 , 有的卵壳出现裂痕或破裂等【’ 0】。
1
.
7 对猪烟虫成虫的作用 从刚屠宰的猪肠内取出
新鲜蛔虫 , 用 36 ℃ 一 38 ℃的肠虫营养液洗净及保
存 , 选活动度大 、 成熟的蛔虫作实验用 。 将 .0 2 %
和 0 . 5 %浓度的几种药液及肠虫营养液各 30 m L 分
别盛于 1 00 m L 烧杯内 , 然后放入蛔虫 , 并将烧杯
置于 37 ℃ 水浴箱中 , 定时观察并记录蛔虫反应情
况 。 以 自主活动 (浸泡的虫体能自由蠕动 ) 、 刺激
活动 (虫体不能自主活动 , 但用小镊子经刺激后 ,
虫体方能蠕动 ) 和停止活动 (经刺激虫体后仍无活
动 ) 作为判断效果的指标! { ’ l。
1
.
8 数据分析 采用 M i e r o s o ft E x e e l 9 7 软件对数据
进行初步处理 , 并结合 s A s ( fo r W i n d o w s V 6 、 12 )
进行统计学分析 , 计算出半数致死量 (L D动 。
2 结 果
2
.
1 化合物 结构 鉴 定 化 合物 1 : 浅 黄 色 针 晶
(M e O H )
,
M P 18 7 ℃ ~ 18 9 oC , 结晶 (稀乙醇 ) , m p :
2 01 ℃ ~ 2 03 ℃ , 微溶于 沸水和 冷乙 醇 。 分 子式
C27H刃 ,4 , 分子量 5 7 8 . 5 1 , H C I一M g 反应阳性 , M o li sh
反应阳性 。 U V 入` ~ (n m ) : 2 6 7 , 34 5 ; 加 N a 0 M e :
2 4 6 ( sh )
,
2 6 7
,
3 84 : 加 A IC 13 : 2 7 4 , 3 0 0 ( s h ) ,
34 5
,
3 9 5 : 加 A IC I犷HC I : 2 74 , 30 0 ( sh ) , 3 4 0 , 3 9 5 :
加 N aO A C H/ B O 3 : 2 6 5 , 34 5 。 FA B一M S ( mj z ) : 57 8
[M
一
H r
,
43 1 [M
一
H
一助 a r , 28 4 【M 一H 一助 a 一肋 a r ; 化合
物 (l ) 与文献 [ 12] 报道的山奈酚 一 3 , 7一 a 一 L 一 二 鼠李
糖昔 M S 、 `H 一N M R 与 ” C 一N M R 数据基本一致 。 所以
确定化合物 ( l) 为山奈酚 一3 , 7一 a 一 L 一 二 鼠李糖昔
( aK
e m p fe or l 3
,
7
一a 一 L
一
D iht a in
o p” a n o s id e ) 。 化合物
2 : 浅黄色粉状 , M iol hs 反应阳性 。 分子式 C尹引 O , 5 ,
分子量 6 2 0 , [ a ]-0 17 0 0 (e = 0 . 1 , M e o H ) ; IR v 翩m 一 , :
3 4 6 0
,
16 5 4
,
16 0 8 ; U V 入~ 嫩、 m : 2 64 , 3 2 6 , 34 3 :
( M
e 0 H + A IC 1
3
) 2 7 3
,
34 8
,
39 5 ; (M
e O H + A IC 1+3 H C I)
2 74
,
3 4 0
,
3 9 2 ; ( M
e 0 H + N a O M
e ) 2 73
,
3 4 6
,
3 7 8
。
FA B
一
M S ( n公z ) : 6 19 【M一 H l一 , 4 7 3 【M 一H 一 孙 a ]一 , 4 3 1
[4 7 3
一
o A C r
,
2 8 5 [4 3 1
一
hR
a r ; 化合物 ( 2 ) 与文献
口3 』报道 s u t e h u e n o s i de ^ 结 构 的 M s , ’ H 一N M R 与
lsC
一
N M R 数据基本一致 , 所以确定化合物 (2 ) 为山
奈酚 一3一 a 一 L 一 (4 一O 一 乙酸基 ) 鼠李糖基 一7 一 a 一 L 一 鼠李糖
昔 ( K a e m p fe r o l 3一 a 一 L 一 ( 4一O 一 a e e yt l ) r h a m n o p班 a -
n o s id e
一
7
一 a 一 L
一 r h a m n o p娜 n o s id e ) 。 化合物 3 : 淡黄色
粉状 , 溶于丙酮和冷乙醇 ; 分子式 C l3 H刃 16 , 分子
量 6 62 。 M o li咖 反应阳 性 。 [ a ]-0 15 2 “ ( e = 0 . 1 ,
M e 0 H )
。
IR v 旧 c m 一` : 34 8 , 17 3 4 , 16 54 , 16 02 ;
U V 入~ 嫩场m : 2 64 , 3 2 6 , 3 3 8 ; ( M e O H+ A IC 13 )
2 7 4
,
3 4 6
,
3 9 4 : (M e O H+ A IC 1
3+ H C I) 2 7 3
,
3 3 8
,
3 8 9 ;
(M eO H + N
a 0 M
e ) 2 7 2
,
3 4 5
,
3 7 7
。
FA B
一
M S ( n口2 ) :
6 6 1 [M
一
H ]
一 ,
5 15 [M
一
H
一
hR
a ]
一 ,
4 3 1 [M
一
H
一
hR
a 一Z x 0 A C I
一 ,
2 5 5 [4 3 1
一助 a ]一 ; 化合物 ( 3 ) 与文献 [ 14 ]报道的 C ar s -
s iht 泣o m o s id e A 结构的 M S 、 ’ H . N M R 与 ’℃一M R 数
据基本一致 。 所以确定化合物 (3 ) 为山奈酚 一 3一a 一 L -
( 2
,
4
一 二 乙 酞 基 ) 鼠李糖 昔 一7一 a 一 L一 鼠李糖 昔
[众 e m p免or l 3一 a 一 L 一 ( 2 , 4 一n i一。 一 ac e yt l ) ht anm o p yr a n o
-
is de
一
7
一
a- L
. r h a m n叩班 a n os ide l 。 化 合物 4 : 分子式 :
C祖刃 , 分子量 41 .4 69 , 片状结晶 (乙醇 ) , m p :
14 0 ℃ , 易溶于苯和氯仿 , 难溶于水 、 甲醇和乙醚 。
化合物 (4 ) 与文献 【15 』报道的 p 一 谷 街醇 M S 、
,H
一
N M R 与 ’℃ 一N M R 数据基本一致 。 所以确定化合
物 (4 ) 为 p 一 谷 街醇 (日一 s i t o s et or l ) 。
.2 2 药物时离体猪姻 虫 (成虫 ) 的效果观察 本试
验选用左旋咪哇 、 阿苯达哇和伊力佳与从云南贯众
中分离提取的 4 个化合物作药物效果观察对比试
验 , 并且分别作了 2 个不同药物浓度 (剂量为 .0 2
和 0 . 5 ) 。 试验结果表明 : 左旋咪哇和阿苯达哇效果
最佳 , 其次是伊力佳 ; 4 个化合物中化合物 2 效果
最佳 , 其次是化合物 3 、 化合物 1 , 化合物 4 最差 。
药物剂量为 .0 2 的效果观察见图 l 所示 : 在 l h
内最先开始出现猪蛔虫死亡的是左旋咪哇 ( 50 % ) ,
其次是化合物 2 和阿苯达哇 ( 30 % ) 。 在 3 h 内左旋
咪哇 、 化合物 2 、 阿苯达哇和伊力佳的死亡率都为
10 0 %
。 直到 6 h 化合物 3 才出现死亡 , 12 h 化合物
1才出现死亡 , 24 h 化合物 4 才出现死亡 。
ǎ合一畏。芝à辞侧限
. 化合物 l
C o m OP un d l
. 左旋咪哇
I尤 v a m i so le
. 化合物 2
C o m po un dZ
. 阿苯达哇
A lbe n daoz
le
n 化合物 3
C o m po un d3
. 伊力佳
口化合物 4
C o m po
u n d 4
图 1 姻虫对药物反应情况 (药物剂 t 为 0 . 2)
F电 . I E肠比 t o玩曰M心 o n o f阮 m 。五` 证 on 内州州 .
, 。曰团 in vi 臼. (m . 五c ien d o se .0 2 )
药物 剂量为 .0 5 的效果观察见 图 2 所示 : 在
0
.
5 h 内最先开 始出现猪蛔 虫死 亡 的是阿 苯达哇
第 2 1期 肖 啸 , 等 . 云南贯众驱猪蛔虫活性成分的鉴定及其体外杀虫试验研究
( 10 % )
, 在 l h 内死亡的是化合物 2 ( 30 % ) 、 左旋
咪哇 ( 6 0 % ) 、 阿苯达哇 ( 50 % ) 和伊力佳 (3 0 % ) 。
在 Z h 内化合物 2 的死亡率为 10 % 。 直到 Z h 化合
物 3 和化合物 l 才出现死亡 , 3 h 化合物 4 才出现
死亡 。 随时间的变化死亡率与药物浓度呈明显变化 。
中化合物 2 效果最佳 , 其次是化合物 4 、 化合物 1 、
化合物 3 、 伊力佳效果最差 。 这与药物对离体猪蛔
虫 (成虫 ) 的效果观察基本一致 。
. 化合物 l
C o m P o u n d l
. 左旋咪哇
L e v a r n is o le
. 化合物 2
C o m P o un dZ
. 阿苯达哇
A lb e n d a z o le
a 化合物 3
C o m Po u n d 3
. 伊力佳
I v e n ” e c t in
a 化合物 4
C o m P o un d4
图 2 蛔虫对药物反应情况 (药物剂 t 为 0 . 5)
Fig
.
Z E西改 t ob se 邝画on of hct m 。幻e in e on 再邵 . 公
BU帅 in vi tI D (m 。山d画. 面的 .0 5 )
.2 3 药物对猪烟虫卵的效果观察 药物对猪蛔虫卵
的效果观察见图 3 所示 : 在 6 h 内最先开始出现猪
蛔虫死亡的是阿苯达哇 ( 13 % ) 、 阿苯达哇 ( 13 % )
和化合物 2 ( 10 % ) 。 在 48 h 内死亡的是化合物 2
(3 8 % )
、 左旋咪哇 ( 4 0 % ) 、 阿苯达哇 ( 5 8 % ) 、 化
合物 3 (3 0 % ) 、 化合物 4 ( 30 % ) 、 粗提物 (4 0 % ) 。
直到 72 h 死亡率都没有达到 10 0 % , 说明蛔虫卵对
各药物有很强的抵抗力 。 试验结果表明 : 左旋咪哇
和阿苯达哇效果最佳 , 其次是粗提物 ; 4 个化合物
表 1 药物对猪蛔虫卵的
T ab l
e I E肠ce t o b翻教专 . 石朋 O f ht e m e id C in e
图 3 药物对猪姻虫卵的效果观察
曳 .3 E伍戏 。 b侧沈v 心on o f het m . 五创邑. On为“ 别血 别叨团 e留 in vi tZ劝
.2 4 药物组采用 宏软 sA S 软件 下进行统计学分析
的结果 通过方差分析得知化合物 2 差异不显著
(见表 l ) 。
.2 5 药物对猪烟 虫卵在体外的半数致死 1 ( L D动
药物与猪蛔虫卵作用时间在 72 h 之前平均相对死亡
率都低于 50 % , 72 h 之后对照组死亡 , 所以选用
7 2 h 来计算半数致死量 (L D , ) I’卜 ls] 。 试验结果表明 :
化合物 2 的 L D、 二 l . 4 80 m留m L , 是 4 个化合物中最
低的 , 其对蛔虫卵的毒力最强 。 伊力佳儿乎没有毒
杀作用 (见表 2) 。
计算公式为 : 10 9 L D 、 = X K 一 i (艺 p一0 . 5 )
( X K一最高剂量对数值 , i一相邻剂量组剂量
对数值之差值 , 艺P一死亡率总数 )
效果观察 s( A s 统计软件 )
on A ` C出勃
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e g in vi tZ℃ (sA S so 介w aj er )
M
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3 4
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14坡 2 5 . 5 7斌 2 1 . 8 68CD^ 1 9
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7N 7 7 7 7 7 7 7 7
o r o u p 阿苯达哇
A lb Cn ds z o le
左旋咪哇
eL
v a r n iso le
化合物 2
C o m P o n d
粗提物
C ur d e C x t r a e t
化合物 4
C o m Pon d 4
化合物 3 化合物 伊力佳 D M E M
C o m P o n d 3 I v e n l l e C t in
注 : F一 检验 , 具有相同字母的表示差异不显 著
N o t e : F
一 t e s t : Id e m le t t e rs are q
u iet d i fe re
n e e
表 2 药物对猪蛔虫卵在体外的半数致死 t (L D动
T ab le 2 L D
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药物组 化合物 1
C o m P o u n d l
化合物 2
C o m OP
u n
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化合物 3
7 2 h ( LD二 ) (m g/ m L ) 2
.
16 6 1
.
4 80
C o m P o u n d 3
2
.
2 60
化合物 4
C o m P o u n d 4
粗提物
C ur d e e x tar c t
左旋咪哇
以 v a们n is o le
伊力佳
v e r n l e c t i n
阿苯达哇
A】b e n d az o】e
15 0 1
.
6 6 7 5 0
.
8 5 6 6 0
.
9 0 0 5
3 讨 论
目前药材市场贯众品种繁多较为混乱 ! `9] , 本文
为云南贯众利用 、 开发打下了基础 。 贯众类药材的
驱虫成分 , 以前主要认为是间苯三酚类化合物 l~ , ,
本试验研究表明 , 4 个化合物 中 3 个是黄酮类 、 l
个是菌醇类 , 都具有驱虫活性 。 虽然 4 个化合物的
驱虫活性没有左旋咪哇 、 阿苯达哇 强 , 但在 实验
中驱虫效果仍然非常明显 。 特别化合物 2 对猪蛔虫
的作用十分明显 。 化合物 2 有望开发为一种新的驱
蛔虫药 。
本试验在琼脂胶移行法 .l2] 的基础上进一步改进 ,
不是通过观察有多少蛔虫从琼脂胶中移行出来 , 而
是通过观察虫卵的死活 。 突破了琼脂胶移行法对加
胶温度 、 浓度 、 时间的严格限制 , 克服了用倒置显
6 97中 国 预 防 兽 医 学 报2 0 7年
微镜观察结果时的不易操作性 。 同时利用纤毛虫检
测器作为计数板 , 与白细胞分类计数板相比 , 这种
方法即简便 、 直接 , 又客观 、 适用 。 上述研究为以
后研究猪蛔虫卵提供了有利的条件 。
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(本文编辑 : 彭永刚 )