全 文 ：乌蕨对小鼠四氯化碳肝损伤保护作用机制的研究
赵海燕 ,王　玲 ,熊小琴
(赣南医学院 , 江西　赣州　341000)
摘　要:目的:探讨乌蕨对小鼠四氯化碳(CCl4)肝损伤的保护机制。方法:采用一次性腹腔注射 CCl4致小鼠急性
肝损伤。分别测定血清 、肝组织中丙二醛(MDA)含量 、一氧化氮(NO)水平 、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:
乌蕨显著降低 CCl4中毒小鼠血清 、肝组织中 MDA含量 , 升高 NO、SOD活性。结论:乌蕨的保肝作用与抗脂质过
氧化作用有关。
关键词:乌蕨;肝损伤;脂质过氧化
中国分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1001-5779(2007)03-0325-02
　　乌蕨为鳞始蕨科植物乌蕨 [ Stenolomachusana
(L.)ching]的全草 ,又称金花草 ,土黄莲 ,广泛分布
于我国长江以南地区 。全草味苦 ,性微寒 ,民间主要
用于治疗急性黄疸和非黄疸型肝炎 [ 1] 。陆定奕报
道乌蕨对小鼠 CCl4肝损伤防治作用 [ 2] ,有关其作用
机制的研究未见报道 ,本研究通过观察乌蕨对小鼠
在 CCl4诱导下脂质过氧化的抑制作用 ,并探讨其机
制 ,为其在医药中的应用提供科学依据。
1　材料与方法
1.1　药材与试剂　乌蕨采自赣州 ,夏天采集 ,晒干
后碾成粗粉 , 取适量蒸馏水加热提取 2次 , 每次
30min,过滤 ,合并 2次滤液并浓缩至适量 , 95%乙
醇沉淀 ,放置冰箱 48h后减压过滤 ,滤液回收乙醇至
无醇味 。丙二醛 、一氧化氮 、超氧化物歧化酶试剂
盒 ,南京建成生物工程研究所提供。 MDA含量用硫
代巴比妥酸比色法测定 , SOD活性用黄嘌呤氧化酶
法测定 , NO含量用硝酸还原酶法测定 。
1.2　动物　昆明种小鼠 ,体重 20±2g,雌雄兼用 ,
赣南医学院实验动物中心提供 。
1.3　仪器　722N可见光分光光度计 ,上海精密科
学仪器有限公司 , KDC-2046低速冷冻离心机 ,合
肥科大创新股份有限公司中佳分公司 。
1.4　CCl4造模与检测　小鼠 50只 ,随机分为对照
组 、模型组 、治疗 1组 、治疗 2组和治疗 3组 。治疗 1
组灌胃乌蕨提取液 10g/kg,治疗 2组灌胃乌蕨提取
液 5g/kg,治疗 3组灌胃乌蕨提取液 2.5g/kg,对照
组和模型组均灌胃等体积生理盐水 ,各组均每天给
药一次 ,连续 15d。各组小鼠处死前禁食 ,自由饮
水。除对照组外 ,其余各组分别于第 14d给药后
2h,腹腔注射 0.1%CCl4食用油溶液 10ml/kg一次。
16h后断头取血 ,以 16 000r/min离心 5min,分离血
清;取出肝脏组织用生理盐水制成 10%肝匀浆 ,分
别测定 SOD活性和 MDA、NO含量。具体步骤均按
各试剂盒说明操作 。
1.5　统计方法　使用 SPSS11.0统计软件包 , 所有
数据用 χ±S表示 ,采用方差分析的 PostHoc检验 ,
P<0.05为差异有显著性 。
2　结　果
与对照组比较 , 模型组小鼠血清 、肝组织中
MDA含量显著升高 , SOD、NO水平显著降低 (P<
0.05);治疗 1、2、3组小鼠血清 、肝组织中 MDA含
量均明显低于模型组(P<0.05), SOD、NO水平明
显高于模型组(P<0.05)。详见表 1、表 2。
表 1　乌蕨对 CCl4肝损伤小鼠血清 MDA、NO、SOD的影响
组别 小鼠数(只)
剂量
(g/kg) MDA(nmol/ml) SOD(nU/ml) NO(μmol/l)
对照组 10 - 3.9120±0.7469 402.8100±46.377 39.0800±21.3567
模型组 10 - 7.9980±1.8099a 337.1090±80.4879 13.3600±10.7036a
治疗 1组 10 10 4.8720±1.8869b 467.1060±65.5253b 36.6000±17.7651b
治疗 2组 10 5 5.2740±2.7688b 453.8870±77.1700b 26.6800±12.3419
治疗 3组 10 2.5 5.9100±2.3159ab 441.7680±89.4173b 23.4000±8.2176a
　　　　　　　注:a与对照组比较(P<0.05), b与模型组比较(P<0.05)
—325—
第 27卷第 3期　　　　　　　　　　　赣　南　医　学　院　学　报　　　　　　　　　　Vol.27NO.3
2007年 6月　　　　　　　　JOURNALOFGANNANMEDICALUNIVERSITY　　　　　　　JUN.2007　
表 2　乌蕨对 CCl4肝损伤小鼠肝组织 MDA、NO、SOD的影响
组别 小鼠数(只)
剂量
(g/kg) MDA(nmol/g) SOD(nU/g) NO(μmol/g)
对照组 10 - 389.6460±86.7363 134.0960±16.2769 2.0340±0.5956
模型组 10 - 656.0460±126.1884a 99.2330±36.1502a 0.5102±0.2765a
治疗 1组 10 10 482.4070±94.1741b 166.0940±21.0533abcd 1.7870±0.6615bd
治疗 2组 10 5 497.9570±97.4941ab 143.0710±18.6611bc 1.4420±0.6912ab
治疗 3组 10 2.5 518.9850±136.4001ab 127.3580±19.4133bd 1.0750±0.4411abd
　　　　　　注:a与对照组比较(P<0.05), b与模型组比较(P<0.05), c治疗 1组与治疗 2组比较(P<0.05),
d治疗 1组与治疗 3组比较(P<0.05)
3　讨　论
自由基学说认为:体内自由基的生成和清除处
于相对平衡 ,若此平衡被破坏 ,体内过剩自由基的
产生及引发的脂质过氧化反应 ,将促进细胞损伤和
机体衰老 ,并引发多种疾病 [ 3] , CCl4在体内经肝活
化生成多种自由基(如 · CCl3和· OOCCl3等),后
者直接作用于质膜上的多元不饱和脂肪酸 ,发生脂
质过氧化反应 , 生成大量的脂质过氧化产物
(MDA),可严重损伤细胞并加速细胞和机体衰老。
体内自由基来源分内源性和外源性 ,肝脏是外源性
过氧化物在体内转化和排泄的主要场所。因此 ,
MDA在血清 、肝组织中的含量间接反应了脂质过氧
化损伤的程度 。 SOD是动物机体内重要的抗氧化
酶类 ,其作用是清除自由基和过氧化物 ,从而降低
脂质过氧化物的生成并加速其清除 ,减少其对细胞
和组织的损伤。体内 SOD活性越高 ,自由基清除速
度越快 [ 4] 。NO在不同原因所致的肝损伤中所起的
作用是不同的。在 CCl4诱导小鼠急性肝损伤中 ,
CCl4抑制 NO的产生可明显地增加肝内的脂质过
氧化 ,而 NO对急性肝损伤则可改善微循环 ,维持肝
脏血液灌流 ,防止血栓形成 ,灭活氧自由基[ 5] ,可防
止肝细胞凋亡[ 6] ,从而减轻肝脏损伤 ,起保护作用。
本实验研究显示 ,小鼠经 CCl4致毒后 ,其血清 、
肝组织 MDA含量较对照组显著增加 ,表明 CCl4诱
发脂质过氧化反应模型复制成功 。而预先采用乌
蕨提取液治疗的小鼠 ,其血清 、肝组织 MDA含量较
模型组显著降低 , SOD活性 、NO水平明显升高。表
明乌蕨对肝损伤的保护作用与抗脂质过氧化作用
有关 ,其机制可能发生在多个环节:①减少自由基 、
活性氧的生成;②改善微循环;③增加 SOD活性。
参考文献:
[ 1] 　丁恒山.中国药用孢子植物 [ M] .上海:上海科学技术
出版社 , 1982.68.
[ 2] 　陆定奕 ,张汉明 , 罗勤誉.乌蕨对小鼠 CCl4肝损伤防
治作用的研究 [ J] .上海预防医学杂志 , 1997, 9(4):
190 ～ 191.
[ 3] 　KnightJA.Theprocessandtheoriesofaging[ J] .Ann
ClinLabSci, 1995, 25(1):1 ～ 12.
[ 4] 　李龙 , 雷泽林 ,赵晋 ,等.结核性胸膜炎患者 DNA氧化
损伤和脂质过氧化的研究 [ J] .中华结核和呼吸杂
志 , 2003, 26(12):781 ～ 785.
[ 5] 　MarceloNM, JohnLW.NitricoxideVTherapeuticpoten-
tialofnitricoxidedonorsandinhibitors[ J] .AmJPhysi-
ol, 1999, 276(39):G1313 ～ G1316.
[ 6] 　JianrongL, TimothyRB.NitricoxideIVDeterminantsof
nitricoxideprotectionandtoxicityinliver[ J] .Am J
Physiol, 1999, 276(39):G1069 ～ G1073.
(收稿日期:2007-01-20)
TheExperimentalStudyofStenolomaChusanaChingonHepathicInjuryInducedbyCCl4 inMice
ZHAOHai-yan, WANGLing, XIONGXiao-qing
(GannanMedicalUniversity, GanzhouJiangxi341000)
Abstract:Objective:Tostudytheanti-lipidperoxidationefectsofstenolomachusanachingagainstCCl4 -inducingacutehep-
athicinjuryinmice.Methods:AllmiceweretreatedwithintraperitonealinjectionofCCl4 once, resultinginacutehepatotoxicity.The
contentofmalondialdehyde(MDA)andthelevelofNO, activityofsuperoxidedismutase(SOD)weremeasuredrespectivelyinserum
andliverofmice.Result:StnolomachusanachingcouldbemarkablydecreasedMDAcontents(P<0.05), increasedSODactivity、
levelsofNO(P<0.05)respectivelyinserumandliverrespectivelyinCCl
4
toxico-mice.Conclusion:Stenolomachusanachinghas
theefectsofanti-lipidperoxidation.
Keywords:stenolomachusanaching;hepathicinjury;lipidperoxidation
—326—
　　　　　　　　　　　　　　　　　　赣 南 医 学 院 学 报　　　　　　　　　　　　　　2007年