全 文 ：建立了四个群体繁殖中心 。 利用信息激素来
监视虎天牛的工作已列入害虫防治制度 。 初
步结果表明 , 信息激素对雄虫是有 引诱作用
的 , 从而说明用信息激素来控制虎天牛可获
成功 。
研究部有一个组织严密的推广队 , 它在
研究所 、 地区研究站 、 示范农场等组织户外
科学活动 日 , 有效地推广技术成果 , 还给生
产者作示范 , 以促进科学家 、 生产者和推广
人员之间的关系 , 并从生产者获得有关技术
使用情况的反馈信息 。
( 陈泽坦译自nI 币叨 c袱 f e。 英文
52 卷 2 期 飞马3 8年 郁如校 )
中粒种咖啡原生质体培养体细胞胚和再生小植株
C九: 艺s t乞a 咋 S e儿o p瓦。等
摘要 培养咖啡原生质体获得 了体细胞胚 。 由细胞悬浮液衍生 的中粒种咖啡体
细胞胚分离出原生质体 。 用添加激动素 、 2 , 4 一D和茶 乙酸各 O。 5毫克 / 升的 培 养基
进行 多次继 代培养 , 发育成 小愈伤组 织 。 小愈伤组织 在不含生 长调 节剂 的培养基的
继代 J吝养中产生 了球 形胚 、 鱼雷形胚和子叶胚 , 其 中有些胚最终发育成小植株 。
本文报道了由中粒种咖啡体细胞胚分离
出的原生质休培养体细胞胚和再生小植株的
试验结果 。
材朴与方法
植物材料 与试材料是由哥斯达黎加热
带农业研究和培训 中心引进的中粒 种 咖 啡
3 4 8 t号 。
培养基 用以产生原生质体分离的体细
胞胚的培 养墓含有M s 培养基的盐类 。 其 他
培养基 ( 女口B S一 1 、 B 6 一 2 及它们 组 分
变化 ) 都以 B S培养基的盐类为基本组 分 。
加 ] 0 0微克分子乙二胺四乙酸铁 钠 盐 ( F e
N a E D T A ) 作培养基的铁元素 , 将 p H 值 调
到 5 . 5 。 用于胚的质壁分离 、 原生质体分离 、
提 纯以及用于原生质体初期培养的培养基都
经过滤消毒 , 其余的培养基都在 1 21 ℃和 1。 1
公斤 / 厘米 “ 的高压下消毒 15分钟 。
用以分离原生质体的体细胞胚的培养
关于在不同条件下用咖啡细胞悬浮液诱导产
生体细胞胚已有报道 。 在本试验中观察到由
叶愈伤组织衍生的细胞悬浮液可形成胚 。 我
们采用了与 D 。 P e加所用的相似的方法 , 但
有两点重要的差异 : 一是悬浮液是在 15 0 0勒
克司光强度下照光 16小时而不是在黑暗下培
养 ; 二是生长调节剂以 2 . 15 毫克 / 升的激动
素和 1 . 1毫克 /升的 2 , 4一 D 代替。 . 8 毫克 / 升
的蔡乙 酸 。 悬浮液在生长调节剂浓 度 降 低
( 激动素 1 。 1毫克 / 升和 2 , 魂一 D O . 03 毫 克 /
升 ) 的培养基 中进行继代培养后 , 出现了球
形胚和鱼雷形胚 。 在含有激动素。 。 2毫克 /升
和 2 , 4 一 D o . 1毫克 / 升的琼脂培养基 成 在 不
含 2 , 4 一 D 而含激动素 0 . 1毫克 / 升或 0 . 2 毫克
/ 升的培养基中继续培养 , 可诱导长出一些
具有明显子叶的胚 , 用这些胚来分离原生质
体。
原生质体的分禽与提纯 将约 0 . 5 克 体
细胞胚置于 10 厘米培养皿中以备质壁分离 ,
皿内盛有切毫升不含生长调节剂的 培 养 基
( B S 一 l ) , 这种培养基内含 有 F i , t e r 和
K ir k o ir 。 n所制备的培养基的那些维 生 素 、
有机酸和糖类 , 但调整了浓度 (毫克 / 升 ) ,
计内消旋肌醇 1 0 0 , 维生素 B ; 10 , 烟酸 ’ , 氯
化胆碱 0 . 5 , 泛酸钙 .0 5 , 叶酸。 . 2 , 核 黄 素
.0 1
, 对氨基苯甲酸O。 01 , 柠檬酸 10 , 果 糖
1 2 5
, 核糖 12 5 , 木糖 1 2 5 , 甘露糖 1 2 5 , 纤维
二糖 12 5 , 蔗糖 2 0 , 0 0。 , L一盐酸半胧氨酸 ,
聚乙烯砒咯烷酮一 ; 。 ( P v P一 10 ) 2 0 0 , 酪
蛋 白水解物 ( 酸解的 ) 2 5。; 葡萄糖 。 . 51 克
分子 , 2 一 ( N一吗琳 ) 一 乙基磺酸 ( M E s )
3 毫克分子 。 用 c a cl : x Z H : 0将钙浓 度 提
高到 6 毫克分子 。
` 唁
质壁分离 9D 分钟后 , 、 用解剖刀把材料分
割成薄片 。 用吸液管吸去培养液并用 10 毫升
新鲜 B S一 1 液将薄片清洗一次 , 然后放 在
1 0毫升酶溶液里培养 。 该溶液为含有 2 %纤
维素酶 、 1 % d r i s e l a s e和 1 %果胶酶 的 B S
一 l 培养液 。 把培养皿放在每分钟 30 转的旋
转振荡器上 , 并保持 27 土 l ℃和黑 暗 的 环
境 。 1 8小时后 , 悬浮液通过 15 0微米和 50 微
米的尼龙筛网连续过滤 。 在 1 0 0 x g 下 离 心
5 分钟以收集原生质体 , 将收集的原生质体
团粒悬浮在新鲜培养液和在拍 0 x g 下 离 心
5 分钟 , 清洗两次 。 将最后离心 出米的原生
质体团粒悬浮在B S 一 2 培养液 ( 即 每 升 B
5 一 1 培养液中添加激动素 2 , 4一D 和 蒙 乙
酸各 0 . 5毫克 ; 钙浓度降至 1 毫克分子 ) 。
原生质体的培养 将密度为 2 . 5 x 10 ” /
毫升的原生质体放在多孔格培养皿 ( c o vt ar ,
n 。 。 3 5 2 4 ) 中培养 , 每一孔格中有 .0 场毫 升
悬浮液 。 培养皿置于 27 土 1 ℃和黑 暗 环 境
下 。 把这些培养皿放入塑料盒子 , 以减少蒸
发 。 到第 6 天 , 将 4 个多孔格培养皿的再生
细胞及细胞团合在一起 , 用培养液清洗 , 在
盛有 l 。 5毫升 B S 一 2 培养液的 3 厘 米培 养
皿里继续培养 , 培养液的葡萄糖浓 度 降 至
O
。
4 6克分子 , 而含琼脂糖 ( S i g . a 4 型 )
0
.
4%
。 把培养皿置于 27 ℃ 士 l ℃下 , 用 25 。
勒克司的弱光照射 。
· 原生质体分离后 7 周进行第二次继代培
养 , 把含有愈伤组织的琼脂糖片放在含 0 。 31
克分子葡萄糖和 8 克 / 升琼脂的B S , , _2 培养基上 , 培养基盛于 一6 厘采培养皿丙属落
养皿置于 27 士 1 ℃ 和 1种 Q勒克司光履飞。 3
周后把愈伤组织移入不合葡萄糖而含=30 克 /
升蔗糖的 B S 一 2 培养浓内 。 ( 培养条什 同
前 ) 。
6 周后 , 将愈伤组织用相同的 培 毖 基
( 只不含生长调节剂 ) 继续培养 。 培养 8 周
后 , 将 含有球形胚的愈伤组织用添加蔗糖 3 0
克 / 升和聚乙烯毗咯烷酮 一 10 2 0 毫克 /升
但不加生长调节剂的众s 培养基进行 继 代靖
养 。
结 果和讨论
分离后 ; 立刻出现两种类型的 原 生 质
体 : 小的一类直径 加一 20 微米 , 细胞质多 ,
没有或只有很小的液泡 ; 大的一类直径 20 一
25 微米 , 与小 的相 比 , 细胞质少 , 有一大液
泡 。 培养一天后 , 80 %以上的活原生质体再 -
生细胞壁 。 培养第二天 , 可偶尔看到第一次
细胞分裂 。 第三天 , 悬浮液里就有直径为 25
一 40 微米的小细胞和直径为 40 一50 微米 、 长
达 150 微米的大细胞 ` 这种差异是上述 两 种 `
不同的类型原生质体所致 。 这时有 3 。 8%的活
细胞已进入二细胞期 。
第一次继代培养 ( 原生质体分离后第 5
天 ) 后 , 培养物形成疏松的愈伤组织。 这种 -
愈伤组织由连接松散的小细胞群和大而长的
海绵状细胞团组成。
以后用逐步’降低葡萄糖浓度的培养基进
行的几次继代培养导致愈伤组织的增殖并产
生如前所述的两种类型细胞 。 将愈伤组织移
入不含生长调节剂的培养基 ( 即原生质体分
离后第四次继代培养 ) 后 , 愈伤组织发育了
球形胚 , 大部分胚由不分化的愈伤 组 织 包 .
围 。 这时 , 大多数球形胚没有进一步生长 ,
然面置于不加生长调节剂 的培养基上进行继
代培养时 , 终子分化成鱼雷形胚和分化出子
叶的胚 。
到 目俞为止 , 一有些胚已能育成小植株 ,
将这些小植株移植于盆中 , 放入温室 。
一产试验草终表明 : 用 中粒种卿哟原生
气 一 , ` · 一 , , , 卜 . 卜 几 :
( 陈传琴摘译自lP an t 众” , iT s毛。 e a “
o r g a n C u l t u r e 英文 a 期 1 9. 了年
质体能培育出再生小植株 。
蜀来 、 :魏英庆校 )
椰 子 亦 是 一 种 糖 料 作 物
P
。
L e , a n g
摘要 本文报道 了印尼 利用椰子花序汁液制糖的方法及其经济效益 。
用椰子花序的汁液制糖在东南亚许多国
家是一种沿用已久的方法。 所产的椰糖文献
上称 “ 红糖 ” , 常用来制作糖果和糕饼 。 椰
糖味美 , 很像软焦糖而不像普通食糖 。 收获
娜子汁液要爬树 , 对爪哇多数农民来说不太
感兴趣 。 在印尼楠榜省的某些地方 , 70 年代
末期严重的病毒病为害丁香树 , 村民的主要
收入来源受损 , 为了补偿这一重大损失 , 一
些农民用椰子与丁香间种 , 以期发展椰糖生
产 , 并取得了成功 , 于是很快就推 广 开 来
了 。 1 98 7年椰糖收入成了40 %以上农户收入
的主要来源 。 - . . 一
合原糖 2 0 克 , 每次从花序上切 去 2 一 5 毫
米的薄片后 , 新切 口用石灰涂刷以防汁液发
酵并变酸 , 容器亦要更换 。一株椰子树只能同时采割 2 个花序 、 最多 3 个。
二 、 制糖
一 、 采制方法
将采集的汁液制糖 的操作也很简单 , 用
明火煮之 , 使其浓缩即可 。 为防汁液酵变 ,
傍晚采集的汁液应该用铜锅或铁锅 煮 半 小
时 , 翌 日再将早 上采集的汁液和头一天晚上
煮过的汁液混和 , 煮 4 小时左右 。 30 0 升 汁
液约可制得原糖 20 公斤 。 1 熬煮汁液 时 加 入
1 / 4只椰子磨碎 的椰蓉以防溢 出 , 边煮边搅
采割椰子花序的方法颇易掌握 。 7 年生
以上的椰子树一年中任何时候都可以采割 。
当花序长到 5 0一 75 厘米时 , 用椰子树上幼嫩
的小叶将花苞绑住 , 在采割过程中 , 要逐渐
重绑 以防花苞 开放 , 其后可将包被花序的鞘
撕裂以简化绑扎操作 。 几天之后 , 直立的花
序就向下弯 , 至其尖端低于基部为止 。 操作
要仔细 , 以免花序断裂 , 尤其是幼嫩花序 。
用一把小钩刀从花苞顶部割 10 厘米长 , 切去
2一 5 毫米深的薄片 , 每 日两次 。 开割后 3
一 4 天 、 汁液就开始流入安置在花序末端的
容量为 6 升的塑料瓶内。 采割持续一个月左
右 , 每天两次 , 平均每天可得汁液 5 升 , 即
, 直至粘稠 , 然后倒入圆筒形 的竹制小模
。 冷却半小时之后 , 就可将糖从竹模中取
。 椰糖的贮藏期视质量而定 , 为 l一 6个
拌具月出
三 、 产量和收益
在印尼楠榜省的某些地方 , 人口 密度较
大 , 每平方公里达 3 16 人 ; 农户拥有的 土地
有限 , 平均每户 1 . 5公顷 。 因此 , 多行 农 园
式栽培 , 即椰子树 、 丁香树 、 果树和粮食作
物间种在同一地块上 。 当地属潮湿 热 带 气
候 , 终年温度在 27 ℃左右 , 年雨量约 2。。。毫
米 , 8 月份前后有两三个月旱季 , 土 壤 深
厚 、 肥沃 。 很适宜于椰子生长 。 采割期间每