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SPE-GC/MS法分析鸡矢藤注射液的化学成分
曲银锋1 ,李松武2 ,刘乃强3 ,张翠英3 ,张振凌＊1(1.河南中医学院 , 河南 郑州 450008;2.河南省食品药品监督管理局 ,
河南 郑州 450053;3.河南省食品药品检验所 ,河南 郑州 450003)
摘要:目的 分析鸡矢藤注射液的化学成分。方法 采用固相萃取法制备样品溶液 ,并利用毛细管气相色谱-质谱联用技术进行
分析。结果 共鉴定了31 个化合物 ,已鉴定化合物占总峰面积的85%以上 , 主要是不饱和醇 、不饱和醛 、不饱和酮 、羧酸 、杂环化
合物等。3 批注射液的化学成分有差别 , 个别成分含量相差很大。结论 该方法稳定可靠 , 重现性好 , 适用于挥发油类中药注射
剂的化学成分分析。
关键词:鸡矢藤注射液;化学成分;SPE-GC/MS
中图分类号:R927 文献标识码:A 文章编号:1004-2407(2009)01-0003-02
Analysis of the chemical compositions in Jishiteng Injection by SPE-GC/MS
QU Yinfeng1 , LI Songw u2 , L IU Naiqiang 3 , ZH ANG Cuiying3 , ZHANG Zhenling1(1.Henan College of T raditional Chinese Med-
icine , Zhengz hou 450008;2.Henan Food and Drug Administration , Zhengzhou 450053;3.Henan Prov ince Institute of Food and
D rug Control , Zhengzhou 450003)
Abstract:Objective To analy ze the chemical compositions in Jishiteng Injection.Methods The sam ples w ere pr epar ed by so lid
phase ext raction(SPE), and analy zed by GC-MS.Results 31 compounds in Jishiteng Injection have been identified , which was
more than 85 per cent of the to tal in the peak area.Most of the identified compounds we re unsaturated alcohols , unsaturated alde-
hydes , unsatura ted ke tone s , ca rboxy lic acid and he te rocyclic compounds.The chemical compositions of three batches Jishiteng In-
jection we re diffe-rent , and the content of some chemical compositions varied g reatly.Conclusion The method is reliable , stable
and reproducible , and can be applied to ana lyze the essential oil components in tr aditional Chinese medicine injections.
Key words:Jishiteng Injection;chemical compositions;SPE-GC/MS
作者简介:曲银锋 ,男 ,医学硕士
＊通讯作者:张振凌 ,女 , 教授
鸡矢藤注射液是以鸡矢藤一味药材 ,经水蒸汽二
次蒸馏 ,再加入适量的吐温 80及氯化钠 ,精制而成的
纯中药注射液。鸡矢藤注射液具有祛风止痛的功效 ,
用于风湿痹阻及瘀血阻滞所致的筋骨痛 、外伤和手术
后疼痛 、腹痛等[ 1] 。现代药理学研究表明 ,鸡矢藤注
射液有镇痛 、抗炎 、兴奋子宫 、抗惊厥等作用[ 2] 。马养
民 、余爱农等[ 3 , 4]先后对干品与鲜品鸡矢藤药材的挥
发油化学成分进行了分析。笔者采用固相萃取法制
备样品溶液 ,并利用毛细管气相色谱-质谱联用技术
对鸡矢藤注射液的化学成分进行分析。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Thermo Trace DSQ气相色谱质谱联用仪
(美国 Thermo Fisher 公司);Waters Oasis HLB(3 cc/
60 mg)SPE 小柱(美国 Waters 公司);质谱库(NIST
MS Search2.0)。
1.2 试药 鸡矢藤注射液(辅仁药业集团(信阳)有
限公司 ,批号 20061101 , 20070818 , 20080101);吐温
80(天津市凯通化学试剂有限公司 , AR , 批号
20060408);氯化钠(天津市化学试剂六厂 , AR ,批号
061226);甲醇(美国 Merck 公司 ,色谱纯);其它试剂
为分析纯;水为乐百氏纯净水 。
2 方法与结果
2.1 比较不同的洗脱溶剂 比较乙醚 、二氯甲烷 、甲
醇不同洗脱量(5 ,10和 20 mL)对不同的固相萃取小
柱 Waters Oasis HLB(3 cc/60 mg)、Phenomenex
S trata-X(3 mL/60 mg)、DIKMA C18(3 mL/200 mg)
的洗脱效果 ,结果用Waters Oasis HLB(3 cc/60 mg)固
相萃取小柱 ,样品液10 mL ,1 mL甲醇洗脱效果最好 。
2.2 空白对照溶液制备 取 500 mL 蒸馏水 ,置于三
角瓶中 ,加吐温 80 500 μL及氯化钠 4.5 g ,使之溶解 ,
并搅拌均匀 ,即可 。
2.3 供试品溶液制备 取 3批鸡矢藤注射液和空白
对照溶液各 10 mL ,恒速过已经活化平衡的 Waters
Oasis H LB SPE 小柱 ,用 2 mL 5%甲醇冲洗 ,弃去 ,
再用 1 mL 甲醇洗脱 ,收集洗脱液 ,作为供试品溶液 。
2.4 测试分析条件
2.4.1 气相色谱条件 AgiLent DB-624石英弹性
毛细管柱(30 mm×0.320 mm×1.80 μm);进样口温
度 270 ℃;载气:高纯氦气(纯度 99.999%),流速:1.0
mL·min-1 ;进样量 5 μL ,分流比 10∶1;程序升温:
起始温度 60 ℃,以每分钟4 ℃升至 130 ℃,再以每分
钟 10 ℃升至 210 ℃,保持 3.5 min ,然后以每分钟 10
℃升至 230 ℃,维持 10 min 。
2.4.2 质谱条件 电离方式 EI ,电子能量 70 eV ,离
子流 100 μA ,离子源温度 250 ℃;质谱传输线温度
250 ℃;倍增管电压 1.00×105(1 150 V);扫描质量
3西北药学杂志 2009 年 2 月 第 24 卷 第 1 期
范围(m/z)44 ～ 450 amu ,扫描速率 1 300.0 amu/ s ,
质量分辨率 0.01 amu 。
2.5 结果 采用 XcaLibur质谱工作站 ,对鸡矢藤注
射液总离子流程图中的各峰经质谱扫描后得到质谱
图 ,经过 NIST 2.0质谱库检索 ,结合人工谱图解析 ,
进行各个组分结构确定 ,并用峰面积归一法对各组分
进行定量 ,计算出各组分的相对百分含量 。3批鸡矢
藤注射液的化学成分分析结果见表 1 。
表 1 鸡矢藤注射液的化学成分分析结果
保留时间
/min 化合物名称
3批相对含量/ %
080101 070818 061101
3.85 2-甲基-3-丁烯-2-醇 3-buten-2-o l , 2-methyl- 1.06 2.28 2.36
4.41 异戊醛 butanal , 3-me thyl- 1.69 3.05 2.01
4.97 丁醇 1-butanol 0.83 2.92 1.11
5.35 3-环氧丙烷-2-羧酸 3-me thy lo xi rane-2-carboxylic acid 0.81 3.55 1.08
6.81 α-反-2-环己烯-1 , 4二醇 α-t rans-2-cyc lohexene-1 , 4-dio l - - 1.80
7.72 α, γ-二甲基-当归内酯 2(3H)-furan one , dihydro-3 ,
5-dimethyl-
- 2.40 0.87
8.08 3-甲基-2-丁烯醇 2-buten-1-o l , 3-methy l- 0.63 2.35 1.64
8.39 己醛 hexanal 0.55 3.52 1.13
10.57 糠醛 furfural 32.34 10.91 4.29
11.23 四氢-3 , 6 -二甲基-2H-吡喃 2H-py ran-2-one , te t ra-
hydro-3 , 6-dimethyl
0.52 1.47 0.88
12.09 庚醛 heptanal 0.60 3.22 0.82
13.38 1-(2-呋喃基)-肟 ethanone , 1-(2-furany l)- 2.75 3.11 1.00
14.10 4-羟基吡啶-1-氧化氮4-hydro xypyridine-1-ox ide 0.90 5.14 1.62
15.07 癸醇 1-decanol- - 1.40 0.95
15.23 苯甲醛 benza ldehyde 1.44 4.09 1.83
15.69 5-甲基糠醛2-furancarboxaldehyde , 5-methyl- 5.38 6.08 0.98
16.67 2-甲基-3-(甲硫)-丁烷 butane , 2-me thyl-3-(methyl-
thio)-
0.69 0.48 1.02
17.30 4-甲基-5-戊基-1 ,3-环戊二酮 1 , 3-cyclopentanedione ,
4-me thyl-5-penty l-
0.53 0.60 0.88
18.57 苯乙醛 benzeneacetaldehyde 0.96 2.68 1.40
18.74 α-甲基-α-[ 4-甲基-3-戊烯 ]环氧丙醇 α-methyl-α-[ 4-
methyl-3-pentenyl] oxi ranemethano l
1.30 4.49 2.26
19.53 芳樟醇 1 , 6-octadien-3-ol , 3 ,7-dime thy l- 2.00 6.59 7.64
19.73 苯甲醛二甲缩醛 benza ldehyde dime thy l ace tal - 4.15 2.21
20.88 β-苯乙醇 pheny lethyl a lcoho l 0.77 2.64 1.24
21.43 (反)-壬烯醛2-nonenal , (E)- 0.50 3.12 -
21.84 龙脑 bo rneo l 1.01 4.93 3.39
22.11 α, α, 4 -三甲基-3-环己烯-1-甲 醇 3-cyclohexene-1-
methano l , 4-t rimethyl-
0.91 4.77 3.18
23.24 (反)-3 ,7-二甲基-2 ,6-辛二烯-1-醇2 , 6-octadien-1-o l ,
3 , 7-dime thy l- , (E)-
1.24 0.46 1.72
24.69 正十二烷基-N-(2-乙酰基噻唑)-乙二酰胺 ethanedia-
mide , n-dodecy l-N-(2-thiaz oly l)-
10.92 3.87 4.83
25.17 3 , 7 ,12-三羟基-(3α, 5α, 7α, 12α)-胆甾烷-26-乌苏酸
cholestan-26-o ic a cid , 3 , 7 , 12-t rihydro xy- , (3α, 5α,
7α,12α)-
1.50 3.16 2.15
27.91 4 , 4-[ 1 , 4-亚苯基双(1-甲基亚乙基)]双[ 2 , 6-二甲基
苯酚] pheno l , 4 , 4-(1-methyle thy lidene)bis[ 2 , 6-dim-
ethy l]-
6.74 9.80 4.76
28.60 1 , 5 ,5 , 8-四甲基-12-氧杂环 [ 9.1.0] 十二环-3 , 7-二
烯 12-oxabicy clo[ 9.1.0] dodeca-3 , 7-diene , 1 , 5 , 5 , 8-
tet ramethy l-
0.91 - 10.92
28.93 3 , 7 ,11-三甲基-2 , 6 ,10-十二烷三烯-1-醇 2 , 6 , 10-do-
decat rien-1-ol , 3 , 7 ,11-trime thy l-
- - 12.25
注 :-表示该批注射液中未检测到该化学成分 。
3 讨论
①本次实验制备样品采用固相萃取法 ,可以富集
样品 ,改变鸡矢藤注射液的溶剂为有机溶剂 ,以便更
有利于气质检测分析 ,同时操作简单 、快捷。
②比较鸡矢藤注射液与空白对照溶液的色谱图 ,
辅料峰基本没有干扰(溶剂峰干扰除外)。本次试验
共鉴定出 31种化学成分 ,已经鉴定化合物占总峰面
积的 85%以上 ,主要是不饱和醇 、不饱和醛 、不饱和
酮 、羧酸和杂环化合物等。但是 3批次注射液化学成
分的种类有差异 ,个别成分含量相差较大 ,其中 3 批
共有的化学成分 24个 ,共有且含量比较大的成分有
糠醛 、芳樟醇 、苯甲醛和龙脑等 。另外 , 080101 批的
糠醛含量偏高 ,3批均有较高相对分子质量的成分出
现 ,061101批尤甚 。
③鸡矢藤注射液化学成分复杂 ,含有多种生理活
性成分 。其中检测到的芳樟醇具有抗菌 、抗病毒 、镇
痛等生理作用[ 5] , 存在于许多具有芳香气味的植物
中 ,如樟树叶 、芫荽子 、金银花 、茶叶等;也是合成柠檬
醛 、乙酸芳樟酯的重要单体香料 ,在工业上也有重要
作用;它可能与鸡矢藤注射液的镇痛抗炎作用相关 。
参考文献:
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醇含量[ J] .药物分析杂志 , 1996 , 16(6):404.
(收稿日期:2008-09-22)
RP-HPLC测定三越麻黄颗粒中橙
皮苷的含量
滕 亮 ,马桂芝 ,孙殿甲 ,木巴拉克(新疆医科大学药学
院药剂教研室 , 新疆 乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 建立三越麻黄颗粒中橙皮苷的反相高效液相色
谱(RP-HPLC)含量测定方法。方法 采用C18色谱柱(250 mm
×4.6 mm , 5 μm), 流动相为 2%甲醇乙腈-0.1%磷酸和 0.1%
三乙胺(25∶75), 检测波长为 288 nm ,柱温为 40 ℃,流速为1.0
mL·min-1 。结果 橙皮苷的线性范围为 2.30～ 200 mg · L-1
(r =0.999 8), 加样回收率 99.42%, RSD为 1.7%。结论 方
法简便 、准确 ,重复性好,可作为三越麻黄颗粒的质量控制方法。
关键词:高效液相色谱法;橙皮苷;三越麻黄颗粒
中图分类号:R927.2 文献标识码:A
文章编号:1004-2407(2009)01-0004-03
4 西北药学杂志 2009 年 2 月 第 24 卷 第 1 期