全 文 ：收稿日期:2007-03-29;　修订日期:2007-07-28
基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目子课题(No.
[ 2003] 07号)
作者简介:都姣娇(1975-),女(汉族),河北定州人 ,现为贵阳中医学院在
读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事天然产物化学研究工作.
＊通讯作者简介:杨　娟(1971-), 女(汉族),重庆人 ,现任贵州省中国科
学院天然产物化学重点实验室副研究员,博士学位 ,主要从事天然产物化
学研究工作.
白马骨中三萜类成分研究
都姣娇1, 2 , 武冰峰1 , 杨　娟 1＊ , 杨小生1
(1.贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 ,贵州 贵阳　550002;
2.贵阳中医学院 ,贵州 贵阳　550002)
摘要:目的 研究白马骨化学成分。方法 采用硅胶柱色谱 、SephadexLH-20柱色谱对化学成分进行分离纯化 , 波谱分析
鉴定其结构。结果 从白马骨中分离并鉴定出 6个三萜类化合物 ,分别为 3-乙酰基齐墩果酸①,熊果酸 ②, 3-羰基熊果
酸③, 齐墩果酮酸④, 齐墩果酸⑤, β -谷甾醇⑥。结论 化合物 1 ～ 4为首次从该植物中分离得到。
关键词:白马骨;　三萜类
中图分类号:R284.1;R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)02-0341-01
TriterpenesConstitutesinSerissaserissoides
DUJiao-jiao1, 2 , WUBing-feng1 ,YANGJuan1＊ , YANGXiao-sheng1
(1.TheKeyLaboratoryofChemistryforNaturalProductsofGuizhouProvinceandChineseAcademyofSci-
ences, Guiyang550002, China;2.GuiyangTraditionalChineseMedicalAcademy, Guiyang550002, China)
Abstract:ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofSerissaserissoides.MethodsTheconstituentswereisolatedandpuri-
fiedbysilicagelandSephadexLH-20 columnchromatography.Theirstructureswereelucidatedbymeansofspectralanalysis.
ResultsSixtriterpenescompoundswereobtainedandidentifiedas3-acetoxy-oleanolicacid(1), ursolicacid(2), 3-one-
ursolicacid(3), oleanonicacid(4), oleanolicacid(5), β -sitosterol(6).Conclusion Compounds1 ～ 4wereisolatedfrom
S.Serissoidesforthefirsttime.
Keywords:Serissaserissoides;　Triterpenes
　　白马骨系茜草科植物白马骨 Serissaserissoides(DC.)Druce
的干燥全草。全国各地均产 , 资源丰富 , 为常用民间草药。具有
活血 、凉血 、疏肝利湿 、消肿止痛的功效。主要用于急慢性肝炎 、
黄疸 、流行性腮腺炎 、肾性水肿 、血尿及高血压病等 [ 1] 。目前文
献仅报道从该植物中分得 2种三萜类化合物 [ 2] 。作者对其化学
成分进行了研究 , 分离并鉴定了 6个三萜类化合物 , 分别为 3 -
乙酰基齐墩果酸①, 熊果酸②, 3-羰基熊果酸③,齐墩果酮酸④,
齐墩果酸⑤, β -谷甾醇⑥。化合物 1 ～ 4为首次从该植物中分
离得到。
1　仪器与材料
VarianINOVA-400型核磁共振仪(TMS为内标);美国 HP
公司 GC-MS5973型气相色谱 -质谱联用仪;SephadexLH-20
为 pharmacia产品;薄层色谱用硅胶 、柱色谱用硅胶均为青岛海洋
化工集团生产。
药材购自贵阳药材市场 ,经贵州省贵阳中医学院陈德媛教授
鉴定为白马骨 Serissaserissoides(DC.)Druce。
2　提取与分离
白马骨全草 20kg粉碎后用 70%的乙醇回流提取 3次(3, 2,
2 h),合并提取液 , 浓缩至无醇味 , 得浸膏 857.9 g。总浸膏混悬
于适量水中 , 依次用石油醚 、醋酸乙酯 、正丁醇萃取 , 分别得萃取
物 11, 170, 350g。醋酸乙酯萃取物 (170g)经硅胶柱色谱 , 以石
油醚 -醋酸乙酯(20∶1 ～ 5∶1)梯度洗脱 ,得到 10个部分。 Fr.
2经硅胶柱色谱 , 用石油醚 -醋酸乙酯洗脱 , 通过重结晶得到化
合物 1(20 mg)。 Fr.3经反复硅胶柱色谱 , SephadexLH-20纯
化 , 得化合物 2(20mg), 5(20 000 mg)。 Fr.4经反复硅胶柱色
谱 , 用石油醚 -醋酸乙酯 10∶1洗脱 , 得化合物 6(510 mg)。 Fr.
5经硅胶柱色谱 , 用石油醚 -丙酮 (5∶ 1)洗脱 , 再用 Sephadex
LH-20纯化得化合物 3 (15 mg), 4 (20mg)。
3　结构鉴定
化合物 1:白色结晶 。EI-MSm/z:498 [ M] +, 248 (100),
203, 189, 129, 69, 43。1HNMR(400MHz, CDCl3)δ:5.27 (1H, s, H-12), 4.50 (1H, t, J= 8.4 Hz, H-3), 2.82 (1H, d, J=10.4
Hz, H-18), 2.05 (3H, s, CH
3
CO), 1.13 (3H, s, H-27), 0.94
(3H, s, H-25), 0.93 (3H, s, H-30), 0.90 (3H, s, H-29), 0.86
(3H, s, H-24), 0.85 (3H, s, H-23), 0.75 (3H, s, H-26)。
13CNMR(100 MHz, CDCl3)δ:15.4 (C-25), 16.6 (C-23), 17.1(C-26), 18.2(C-6), 21.3 (C-31), 22.9 (C-16), 23.4 (C
-30), 23.5 (C-2), 25.9 (C-27), 27.7 (C-24), 28.0 (C-
15), 30.6(C-20), 32.4 (C-11), 33.0(C-7), 33.8(C-29),
37.0 (C-22), 37.7 (C-21), 38.1(C-10), 39.3(C-4), 39.3
(C-8), 40.9 (C-1), 41.6 (C-18), 45.8 (C-19), 46.6 (C-
17), 47.6 (C-9), 55.3 (C-5), 80.9 (C-3), 122.5 (C-12),
143.6(C-13), 171.0(C-32), 184.3 (C-28)。以上数据与文
献 [ 3]基本一致 , 确定此化合物为 3-乙酰基齐墩果酸(3 -acetoxy
-oleanolicacid)。
化合物 2:白色粉末。 ESI-MSm/z479 [ M+Na] +, 457 [ M
+H] +。1HNMR和 13C-NMR数据与文献 [ 3]报道基本一致 ,故确
定化合物 2为熊果酸 (ursolicacid)。
化合物 3:白色晶体 。EI-MSm/z:454 [ M] +, 248 (100),
203。1H-NMR(400Hz, CDCl3)δ:5.28(1H, 12-H), 2.58 (1H,
18 -H), 0.82, 0.86, 0.98, 1.03, 1.05, 1.09, 1.09 CH3 ×7)。
13CNMR(100Hz, CDCl3)δ:15.2(C-25), 17.0(C-26), 17.0(C-29), 19.5 (C-6), 21.1 (C-30), 21.4 (C-24), 23.4 (C-
11), 23.4 (C-27), 24.0 (C-16), 26.5 (C-23), 27.9 (C-
15), 30.6 (C-21), 32.4 (C-7), 34.1 (C-2), 36.7 (C-22),
36.8 (C-10), 38.8 (C-19), 39.0(C-20), 39.1(C-8), 39.4
(C-1), 42.0 (C-14), 46.7 (C-9), 47.4 (C-4), 48.0 (C-
17), 52.5 (C-18), 55.2 (C-5), 125.5 (C-12), 138.0 (C-
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.2 时珍国医国药 2008年第 19卷第 2期
13), 180.9 (C-28), 217.8 (C-3),结合文献 [ 3 , 4]波谱数据 , 鉴
定为 3-羰基熊果酸(3-one-ursolicacid)。
化合物 4:白色晶体。 EI-MSm/z:454 [ M] +, 248 (100),
203, 133, 119, 105。1H-NMR(400Hz, CDCl3)δ:5.28 (1H, 12 -H), 2.83 (1H, dd, J=13.6, 4Hz, 18-H), 0.81, 0.90, 0.94,
1.03, 1.05, 1.09, 1.14 (CH3×7)。13C-NMR(100 MHz, CDCl3)δ:15.0 (C-25), 17.0 (C-26), 19.5 (C-6), 21.4 (C-24),
22.8 (C-11), 23.4 (C-30), 23.5 (C-16), 25.8 (C-27),
26.4 (C-23), 27.6(C-15), 30.5(C-20), 32.1 (C-7), 32.1
(C-22), 33.0(C-29), 33.8 (C-21), 34.1 (C-2), 36.8 (C
-10), 39.1(C-8), 39.2 (C-1), 40.9 (C-18), 41.7 (C-
14), 45.8(C-19), 46.6(C-17), 46.8 (C-9), 47.4 (C-4),
55.2 (C-5), 122.3 (C-12), 143.6 (C-13), 181.1(C-28),
217.8(C-3)。以上数据与文献 [ 5]基本一致 , 确定此化合物为
齐墩果酮酸 (oleanonicacid)。
化合物 5:白色粉末。EI-MSm/z:456 [ M] +, 1H-NMR
和 13C-NMR数据与文献 [ 6]基本符合 , 因此确定化合物 5为齐墩
果酸(oleanolicacid)。
化合物 6:白色针晶 , 溶于氯仿。与 β -谷甾醇标准品对照 ,
薄层色谱 Rf值一致 。鉴定为 β -谷甾醇(β -sitosterol)。
参考文献:
[ 1 ] 　江苏新医学院.中药大辞典 ,上册 ,第 2版 [ M] .上海:上海科学技
术出版社 , 1993:697.
[ 2 ] 　王少芳 , 李广义 , 杨国华 , 等.六月雪化学成分的研究 [ J] .中国中
药杂志 , 1989, 14(9):33.
[ 3 ] 　常军民 , 热娜·斯木, 诸年生.新疆鼠尾草的化学成分研究 [ J] .
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学工业出版社 , 2000:798.
[ 5 ] 　潘文斗 , 麦浪天 , 李毓敬 , 等.马缨丹叶的化学成分研究 [ J] .药学
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药杂志 , 2006, 31(5):400.
收稿日期:2007-04-20;　修订日期:2007-07-12
基金项目:新疆维吾尔自治区高校科研计划科学研究重点项目(No.
XJEDU2004128)
作者简介:乌莉娅·沙依提 (1955-),女(维吾尔族),新疆乌鲁木齐人 ,现
任新疆医科大学中医学院副教授 ,学士学位 ,主要从事中药维药资源及化
学成分教学研究工作.
伞形科 3种维药材蛋白电泳的鉴别
乌莉娅·沙依提 , 刘宏炳
(新疆医科大学中医学院 ,新疆 乌鲁木齐　830000)
摘要:目的 准确地鉴别伞形科果实类药材。方法 应用聚丙稀酰胺电泳技术 ,对 3种外形相似的果实类药材进行了可溶
性蛋白质的电泳分析。结果 电泳图谱清楚地显示出各样品的特征带 , 从而能准确区别各种药材。结论 该方法操作简
便 , 重复性好 ,各样品间可比性强 ,能起到准确鉴别药材的目的。
关键词:伞形科;　聚丙烯酰胺;　蛋白电泳
中图分类号:R282.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)02-0342-01
Gel-electrophoresisIdentificationforThreeUmbeeliferousHerbs
WULi-ya·SHAYi-ti,LIUHong-bing
(ChineseTraditionalMedicalShoolofXinjiangMedicalUniversity, Urumqi830000, China)
Abstract:ObjectiveToidentifyUmbelliferousfructificationherbs.MethodsTheGel-electrophoresistechnologywasusedto
analyzetheumbeeliferousherbs.ResultsTherearediferencesongrades, regionsandquantitiesamongpatternsofTrechysper-
mumammiL.CuminvmcyminvmL.andCvminvmvernumL..ConclusionThemethodofGel-electrophoresisiseasyandef-
fectiveforidentificationofumbeliferousfructificationherbs.
Keywords:TrachyspermumammiL.;　 CuminvmcyminvmL.;　Polypropyleneacylamic;　Albumenelectrophoresis.
　　伞形科药材的果实是双悬果 ,外形极相似且小 , 肉眼难以识
别 , 组织结构也极相似。 为了鉴别真伪 ,保证临床用药的安全有
效 , 本实验运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 , 对伞形科 3种果实类
药材进行可溶性蛋白质的电泳分析。现报道如下。
1　器材
阿育魏实及孜然与野孜然均由维吾尔医医院鉴定并提供
(见表 1)。
表 1　样品来源
编号 名称 植物学名 产地
1 阿育魏实 Trachyspermumammi 新疆
2 孜然 CuminvmcyminvmL. 新疆
3 野孜然 CvminvmvernumL. 印度
1.1　仪器 DYY-6B型稳压稳流电泳仪;真空干燥器;DYCz-
28A型电泳槽;800型离心沉淀器;SBZ200型超声洗脱仪;WD-
9405A型脱色摇床;微量进样器。
1.2　试剂 丙烯酰胺(Acr)、甲叉双丙烯酰胺(Bis)、三羧甲基氨
基甲烷(Tris)、四甲基乙二胺(TEMED)、盐酸 、过硫酸胺 、甘胺
酸 、溴酚蓝 、考马斯亮蓝 R250、甲醇 、醋酸。
1.3　试剂配制 [ 1] 分离胶缓冲液 、分离胶贮液 、过硫酸铵溶液 、
浓缩胶缓冲液 、四甲基乙二胺溶液 、电极缓冲液 、溴酚蓝指示液 、
染色液 、脱色液。
调整分离胶使 T=67.74%, C=2.875%。
2　方法
2.1　样品制备 [ 1 , 2] 称取阿育魏实及孜然与野孜然各 0.5g, 加入
稀释 4倍的浓缩胶缓冲液 , 充分研磨成匀浆 , 超声提取 10 min
(37℃,功率 100%);离心 20 min(3 500 r/min), 取上清液供点
样用。
2.2　电泳操作 安装好胶板 , 于上下电泳槽中注入电极缓冲液;
用微量进样器每孔进样 20 μl;再加 10 μl的溴酚蓝指示跟踪 , 电
泳开始时 ,维持电流 13mA,待样品进入分离胶后 , 电流加大到 25
mA,整个电泳过程维持电流强度不变 , 待指示剂行至末端 1 cm
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2008VOL.19NO.2