全 文 ：收稿日期:2005-12-20基金项目:“九五”国家科技攻关课题(99-929-01-31)
作者简介:朱华旭(1972), 女 ,博士 , 副研究员 , 从事天然药物化学和新药开发研究。 E-mail:Huaxu72 @
yahoo.com.cn。
水团花药材对照品的研究
朱华旭1 ,史海明2 ,闵知大2
(1.南京中医药大学植物药中心 ,江苏 南京 210029;2.中国药科大学天然药物化学教研室 , 江苏 南京 210038)
摘　要　采用柱色谱分离法对水团花的根进行了单体化合物的分离 , 并对所分得的 Quinovic acid-3β -O-β-D
-glucopyranosyl-(28※1)-β-D-glucopyranosyl ester和 Noreugenin进行了结构确证;结合该药材的药理活性研究 ,
以此两种成分分析为指标 ,确立了药材的对照品 。
关键词　水团花;对照品;纯度测定
中图分类号:S567　　　文献标识码:A　　　文章编号:1006-9690(2006)05-0036-03
Study of Standard Samples on Adina pilulifera (Lam.)Franch.ex Drake
Zhu Huaxu1 , Shi Haiming2 , Min Zhida2
(1.The Center for Botanical Studies , Nanjing University of Traditional Chinses Medicine ,Nanjing 210029 ,
China 2.Department of Natural Medicinal Chemistry , China Pharmaceutical University , Nanjing 210038 ,China)
Abstract　The constituents which were screened out with reference to the pharmacological properties and con-
stituent analysis , were isolated by column chromatography and the structures were elucidated by spectroscopic
means.Quinovic acid-3β -O-β -D -glucopyranosyl-(28※1)-β -D -glucopyranosyl ester and
Noreugenin were selected as the standard samples of this medicinal material.These standard samples can be
used as check constituents in the quality control of Adina pilulifera (Lam.)Franch.ex Drake.
Key words　Adina pilulifera (Lam.)Franch.ex Drake;standard samples;mensuration of purification
　　水团花 [ Adina pilulifera (Lam.)Franch. ex
Drake]为茜草科水团花属植物 ,异名水黄凿《陆川本
草》 、青龙珠《广西中兽医药用植物》 、穿鱼柳 、假杨梅
(广州部队《常用中草药手册》)、水加憎 、溪棉条《福
建中草药》 、满山乡 、球花水杨梅(江西《草药手册》)、
水里斜 、水晶树《浙江药用植物志》 。水团花在我国
主要分布于长江以南海拔 200 ～ 350 m的山谷疏林下
或旷野路旁 、溪涧水畔。水团花具有清热驱湿 、散瘀
止痛 、止血敛疮的功效 ,主治痢疾 、肠炎 、浮肿 、痈肿
疮毒 、湿疹 、溃疡不敛和创伤出血[ 1] 。
水团花的茎 、叶含 β -sitosterol 、Stigmasterol 、
Quinoric acid 、Morolic acid 、Betulinic acid 、Cincholic acid
等[ 1] 。根含 Naucleoside 、β -sitosterol 、Noreugenin 、棕
榈酸 、生物碱 、黄酮苷 、挥发油 、鞣质 、氨基酸 、还原糖
等[ 2] 。
作者对水团花根进行了系统的提取分离 ,自根
中分得 20个化合物 ,通过化学和波谱学方法鉴定了
它们的结构[ 3] ;并将其中 2 个化合物:Quinovic acid
-3β-O-β -D-glucopyranosyl-(28※1)-β -D
-glucopyranosyl ester和 Noreugenin定为对照品;确定
了对照品的制备工艺;运用高效液相色谱法对对照
品进行了纯度检查 ,检查结果符合规定(>98%);采
用薄层色谱法对对照品进行了定性检查 ,制定了药
材的定性鉴别方法 。
1　仪器与试药
X4型显微熔点测定仪(温度未校正);Perkin-
Elmer Lambda 2型紫外-可见分光光度仪;Impact-
410(nicolet)型红外光谱仪;PE-Mariner和 HP5989A
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第 25 卷第 5期
2006 年 10月 　　　　　　　　　　　　　中 国 野 生 植 物 资 源Chinese Wild Plant Resources　　　　　　　　　　 　Vol.25 No.5Oct.2006
型质谱仪;Bruker ACF -300 , 400型核磁共振仪;高
效液相色谱仪 ,包括 515泵 , 2487 检测器 , Rheodyne
进样器 ,Waters工作站及WDL-95工作站(Waters公
司)。
薄层色谱用和柱层析硅胶(300 ～ 400目 ,青岛海
洋化工厂);高效预制板(烟台市化学工业部研究所
烟台化工科技开发实验厂)。
水团花药材由福建中特制药有限公司采购自浙
江并鉴定 。
2　方　法
本题选择 Quinovic acid-3β -O-β -D -glu-
copyranosyl-(28※1)-β -D-glucopyrano-syl ester
(化合物 1)和 Noreugenin(化合物 2)作为对照品 ,两
者具有如下特点:
(1)含量高 ,化合物 1约含0.002%,化合物 2约
含0.07%。
(2)在中国生长的植物中 ,化合物 1仅自同属植
物细叶水团花(A.rubella)中分离得到[ 4] 。化合物 2
仅自同属植物 A.racemosa 、A.rubella 和Amoora ro-
hituka中分离得到[ 5] 。
(3)两者均可经柱层析精制 、纯化 ,便于大量制
备和广泛应用。
(4)两者的化学结构均较稳定 ,易于储存。
(5)文献[ 6]报道水团花的乙酸乙酯提取物对急
性心肌缺血有一定的保护作用 ,乙酸乙酯提取物和
醇提取物能延长小鼠常压耐缺氧的存活时间 ,提高
缺氧的耐受能力 。醇提取物还具有平喘 、止咳祛痰 、
抗菌作用[ 7] 。这些药理活性与水团花的清热祛湿 ,
散瘀止痛 ,止血敛疮功效基本吻合。化合物 1和化
合物 2均自醇提取物中分离而得 ,可作为其有效部
位的检测指标。
综上所述 ,本题选择化合物 1和化合物 2 作为
化学对照品。
3　结　果
3.1　对照品的制备
取水团花根10 kg ,加70%工业乙醇100 kg回流
提取3 h ,药渣再加70%工业乙醇80 kg回流提取2 h ,
合并提取液 ,减压浓缩至无醇味 ,浓缩液加水1 L稀
释后 , 分别以石油醚2 000 mL ×3 次 、乙酸乙酯
2 000 mL×5次 、饱和正丁醇2000 mL×5次萃取 ,萃
取液浓缩 ,得石油醚浸膏10 g 、乙酸乙酯浸膏200 g 、
正丁醇浸膏300 g 。
乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏分别以 300-400
目硅胶以 1∶1.5的质量比混匀 ,上硅胶柱(100-200
目)色谱分离 ,以氯仿-甲醇梯度洗脱 ,经溶剂重结
晶得化合物 1(约0.17 g)和化合物 2(约3.5 g)。
3.2　对照品的结构确证
化合物 1:Quinovic acid-3β -O -β -D -glu-
copyranosyl-(28※1)-β -D -Glucopyran-osyl es-
ter。白色粉末状晶 ,mp:190 ～ 192℃(甲醇)。[α] D22
=+27.7°(c ,0.044 ,甲醇)。溶于甲醇 、水等极性较
大的溶剂。
UVλmax:210nm。 IRν(KBr)cm-1:3423 , 2927 ,
1713 , 1692 , 1074。 ESI -MS (m/ z):833 [ M +
Na] +。1HNMR(C5D5N)δ:6.37(1H , d , J=8.1Hz , H-
1′),5.98(1H ,brs ,H-12), 4.77(1H , d , J=7.7Hz , H
-1′), 3.20(1H , d d , J=4.3 , 11.7Hz ,H -3), 2.68
(1H , d , J=11.5Hz ,H -18), 1.20(3H , s), 1.11(3H ,
s),0.93(3H , s),0.73(3H , s),1.16(3H ,d , J=6.1Hz),
0.73(3H , d , J =6.3Hz)。13C NMR(C5D5N)δ:39.1 ,
26.2 ,88.7 , 39.5 , 55.8 , 18.6 , 37.6 , 40.2 , 47.3 , 37.0 ,
23.4 , 129.6 , 133.3 , 56.8 , 26.7 , 25.5 , 49.0 , 54.7 ,
37.6 ,39.5 ,30.3 ,36.4 ,28.0 , 16.6 , 17.1 , 18.1 , 178.0 ,
176.5 , 19.2 , 21.2 , 106.9 , 75.8 , 79.3 , 71.9 , 78.8 ,
63.1 ,95.7 ,74.2 ,79.0 , 71.3 ,78.2 ,62.4。
该化合物的光谱数据与文献[ 4]报道一致。分
子式为 C42H66O15;结构式如下:
　　化合物 2:Noreugenin。淡黄色片晶 , mp:275 ～
280℃(甲醇)。溶于甲醇 、水等极性较大的溶剂 。
UV λmax: 227 , 248 , 256 , 293 nm。
IRν(KBr)cm-1:2897 , 1651 , 1619 , 1505 , 1346 , 1163。
ESI-MS(m/ z):191[M -H] -。1H NMR(DMSO-d6)
δ:12.8(1H , s , 5-OH), 11.0(1H , s , 7 -OH), 6.31
(1H ,d , J=1.7Hz , H -6), 6.16(1H , d , J=1.8Hz ,H
-8),6.14(1H , s ,H-3), 2.32(3H , s ,CH3)。13C NMR
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　第 5期　　　　　　　　　　　　 　朱华旭 ,等:水团花药材对照品的研究　　　　　　　　　　　　　　　　　
(DMSO -d6)δ:182.1 , 168.1 , 164.4 , 161.8 , 158.1 ,
108.2 , 103.8 , 99.1 , 94.1 , 20.2。该化合物的光谱
数据与文献[ 5]报道一致。分子式为 C10H8O4;结构式
如下:
3.3　对照品的纯度检查
3.3.1　化合物 1的纯度检查
(1)面积归一法纯度检查照高效液相色谱法(中
国药典 2000 版一部附录 Ⅵ D)测定 。ZORBAX ODS
(5μm)250 mm×4.6 mm色谱柱(Agilent)。检测波长
为208 nm ,乙腈—1%醋酸水(体积比 29∶71)为流动
相检测 ,标准品浓度为1.14 mg/mL ,进样量为5 μL。
面积归一法计算标准品纯度为:98.07%,见图1。
(2)杂质检查照高效液相色谱法(中国药典
2000版一部附录 Ⅵ D)测定 。ZORBAX Extend C18
(5 μm)250 mm ×4.6 mm色谱柱(Agilent)。检测波
长为208 nm ,乙腈—1%醋酸水(10∶90)为流动相 ,保
留时间较乙腈—1%醋酸水(29∶71)延长一倍 ,未出
现异常峰 。
图 1　化合物 1的纯度检查
3.3.2　化合物 2的纯度检查
(1)面积归一法纯度检查
照高效液相色谱法(中国药典 2000版一部附录
ⅥD)测定 。ZORBAX Extend C18 (5μm)250 mm ×
4.6 mm色谱柱(Agilent)。检测波长为255 nm ,甲醇
—水(60∶40)为流动相检测 , 标准品浓 度为
0.34 mg/mL ,进样量为5 μL。面积归一法计算标准
品纯度为:99.92%,见图 2。
(2)杂质检查
照高效液相色谱法(中国药典 2000版一部附录
Ⅵ D)测定 。ZORBAX Extend C18 (5μm)250 mm ×
4.6 mm色谱柱(Agilent)。检测波长为255 nm ,甲醇
—水(体积比 45∶55)为流动相 ,保留时间较甲醇—
水(体积比 60∶40)延长 1倍 ,未出现异常峰。
图 2　化合物 2 的纯度检查
3.4　对照品的稳定性
对照品化合物 1 冰箱(4 ℃)放置 3 个月 ,其含
量未发生变化。对照品化合物 2及其甲醇液冰箱
(4 ℃)放置 3 个月 ,其含量未发生变化。进一步证
明其结构稳定。
4　讨　论
水团花的化学成分研究仅见于 1991年前 3篇
文献。本题运用天然药物化学的提取分离方法对水
团花根进行了系统的化学成分研究 ,通过文献调研
并综合研究结果 ,将其中 2 个含量较高的化合物:
Quinovic acid-3 β-O -β -D -glucopyranosyl-(28
※1)-β-D-glucopyranosyl ester和 Noreugenin 定为
对照品;确定了对照品的制备工艺;运用高效液相色
谱法对对照品进行了纯度检查 ,检查结果符合规定
(>98%)。
参考文献
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上海:上海科学技术出版社 , 1999.
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中国医药科技出版社 , 2001:473-474.
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学硕士学位论文 , 2001.
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草药.1996, 27(3):131-133.
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中草药.1995 , 26(6):285-287.
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