全 文 ：第 21卷　第 3期 文山师范高等专科学校学报 Vol.21　No.3
2008年 9月 JOURNALOFWENSHANTEACHERS COLLEGE Sep.2008
迎春花多糖提取工艺研究
赵保发
(文山师范高等专科学校 , 云南 文山 663000)
[收稿日期 ] 2008-05-15
[基金项目 ] 云南省教育厅科学研究基金资助项目(5Z0505C)
[作者简介 ] 赵保发(1957-), 男 ,河南南阳人 , 讲师 ,副校长 , 主要从事分析化学 、植物化学研究 .
[摘要 ] 采用正交试验法研究迎春花多糖的提取工艺 , 考察了浸提温度 、 浸提时间 、浸提次数 、 液料比
4个因素对迎春花多糖提取率的影响 .确立了迎春花多糖最佳提取条件为:液料比 40∶1, 浸提温度为 70 ℃,
回流提取 3次 , 提取时间为每次 40min.
[关键词 ] 迎春花;多糖;正交试验;提取工艺
[中图分类号 ] 　Q539　[文献标识码 ] 　A　[文章编号 ] 　1671-3303(2008)03-0106-04
　　迎春花 (JasminenudiflorumLinde)别名金腰
带 , 是木樨科素馨属植物 , 广泛分布于我国的北部
及中部地区 , 每年 2 ～ 3月开花 , 花期 2 ～ 4月 , 一
般不结果 .迎春花的花 、 叶为民间常用草药 , 含丁
香甙 、 迎春花苷和迎春花苦味质 , 有清热解毒之功
效 .据报道 , 迎春花茎叶及其花中均含有黄酮类物
质 [ 1-2] , 茎叶提取液具有耐缺氧作用 [ 3] .目前 , 迎
春花中的水溶性多糖的研究未见报道 , 以迎春花水
溶性多糖含量为指标 , 采用正交试验法对提取过程
中水的用量 、 提取的时间 、提取次数作为考察 、以
确定最佳的提取工艺 , 为迎春花多糖的研究和开发
利用提供依据 .
1　仪器和试剂
1.1　仪　器
KQ2200型超声波仪 (昆山市超声仪器有限公
司);UV-2501紫外分光光度计 (日本岛津);AEL
-40SM十万分之一天平 (日本岛津);干燥箱 CS-
101-2CS(重庆实验仪器厂).
1.2　试　剂
葡萄糖对照品购于生物制品检定所;苯酚为重
蒸试剂;其余试剂均为国产分析纯 .
1.3　实验材料
迎春花于 2007年 3月采于文山师专 , 经生化系
沐建华老师鉴定为木樨科素馨属植物迎春花 (Jas-
minenudiflorumLinde)的花瓣 .花样于 105 ℃烘至
恒重 , 粉碎 , 过 60目筛备用 .
2　方　法
2.1　迎春花多糖的提取流程
称取迎春花材料 1g, 用滤纸包好置于脂肪抽提
器中 , 用甲醇 200mL作溶剂进行脱脂 , 回流提取到
提取液接近无色 , 把滤渣转到锥形瓶中 , 进行超声
提取多糖 , 得到提取液 , 用蒸馏水定容至 1 000 mL
进行含量测定 .
2.2　多糖含量的测定方法[ 4]
2.2.1　标准曲线的制作
精密称取 105℃干燥至恒重的无水葡萄糖标准
品 25mg, 置于 250mL容量瓶中 , 加蒸馏水至刻度 ,
配成 0.1mg/mL的标准溶液 .分别移取上述标准溶
液 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5 , 0.6, 0.7 , 0.8,
0.9, 1.0 mL, 依次加水使最终体积为 1.0 mL, 另
取 1.0 mL蒸馏水作为空白 .每一试管中加入 1.0 mL
5%苯酚溶液 , 混匀 , 迅速加入 5.0 mL浓硫酸 , 振
摇 5 min后放置 35 min, 在最大吸收波长 490 nm处
测定吸光度 , 得回归方程:A=5.882 4C-0.000 3,
r=0.995 4.其中 A为吸光度 , C为葡萄糖浓度
(mg/mL).
2.2.2　多糖含量计算方法
精密吸取 1.0mL多糖提取液 , 按 2.2.1进行测
定 , 根据下列公式计算 .
样品中的多糖含量 (以葡萄糖计):
多糖含量 (mg/gDW) =1 000CW ,
式中 C为 1 mL样品液含多糖量 (mg);W为迎
春花样品质量 (g).
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2.3　葡萄糖回收率的测定
经过 2.1处理后的滤渣用水作溶剂进行多糖提
取 , 得到的提取液取 20 mL, 分别加入一定量的葡
萄糖对照品 , 按 2.2进行操作 .用紫外分光光度计
测定吸光度 , 得出多糖含量 , 根据下列公式计算出
回收率 , 平行操作 3次 .
回收率 =(混合后测得多糖含量 -样品中多糖含量)葡萄糖对照品加入量 ×100%
2.4　多糖测定精密度试验
经过 2.1处理后的滤渣 , 用水作为溶剂提取多
糖 , 提取液定容至 1 000 mL, 精密吸取 1 mL, 按
2.2进行测定 , 平行操作 6次 .
2.5　迎春花多糖提取工艺条件的优化
2.5.1　影响提取效果主要因素的选择
选液料比 、 提取温度 、 提取时间 、 提取次数作
为考察因素 , 各因素水平设定见表 6.
2.5.2　正交试验设计
采取用 L9 (34)进行正交试验 , 取迎春花 9份 ,
每份 1 g正交设计方法进行试验 , 重复 3次 , 并按
2.2方法测定迎春花多糖含量 .
3　结果与讨论
3.1　超声作用时间对多糖提取率的影响
为了探讨超声作用时间对迎春花多糖提取效果
的影响 , 分别称取三份迎春花样品每份 1 g, 加入 40
mL蒸馏水 , 水浴温度 70 ℃, 采用不同超声时间提
取 3次 , 按 2.2测定多糖含量 , 实验结果见表 1.
表 1　超声作用时间对多糖提取率的影响
超声作用时间 (min) 20 30 40 50 60
多糖提取率 (mg/gDW) 64.24 72.36 76.78 71.45 62.48
　　由表 1可以看出 , 随着超声时间的增加 , 提取
率不断提高 , 当超声 40min时 , 迎春花多糖的提取
率最高 , 继续提取则多糖的提取率呈现下降趋势 ,
这可能是由于超声时间过长 , 导致多糖分解而造成
的 , 因此选择超声提取时间为 40min.
3.2　提取温度对多糖提取率的影响
为了探讨温度对迎春花多糖提取效果的影响 ,
在其它条件相同的情况下 , 仅改变超声提取水浴温
度 , 按 2.2测定多糖含量 , 实验结果见表 2.
表 2　提取温度对多糖提取率的影响
超声提取温度 (℃) 30 50 70 90 沸腾
多糖提取率 (mg/gDW) 64.24 67.64 76.78 70.56 65.48
　　由表 2可以看出 , 随着超声提取水浴温度的上
升 , 迎春花多糖的提取率呈现上升趋势 , 但当超声
提取水浴温度超过 70 ℃, 多糖分解急剧加快 , 导致
提取率下降 , 因此确定超声提取水浴温度为70℃.
3.3　液料比对多糖提取率的影响
为了探讨液料比对迎春花多糖提取效果的影响 ,
在其它条件相同的情况下 , 仅改变水和迎春花的体
积质量比 , 进行多糖提取 , 按 2.2测定多糖含量 ,
实验结果见表 3.
表 3　液料比对多糖提取率的影响
液料比 (mL:g) 20∶1 30∶1 40∶1 50∶1 60∶1
多糖提取率 (mg/gDW) 46.86 61.64 76.78 73.42 69.87
　　液料比太小 , 溶剂不足以溶解足够多的多糖;
而液料比太大 , 会增加超声波破碎细胞的阻力 , 使
细胞破碎程度下降 , 从而降低多糖的提取率 .由表 3
可以看出 , 当液料比为 40∶1时 , 多糖的提取率最
高 , 因此液料比选择 40∶1.
3.4　超声提取次数对多糖提取率的影响
为了探讨超声作用次数对迎春花多糖提取效果
的影响 , 取 1 g迎春花样品 , 加入 40 mL蒸馏水 , 水
浴温度 70 ℃, 每次超声时间 40 min, 分别提取 1、
2、 3次 , 按 2.2测定多糖含量 , 实验结果见表 4.
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赵保发:迎春花多糖提取工艺研究
表 4　超声提取次数对多糖提取率的影响
超声提取次数 1 2 3 4
多糖提取率 (mg/gDW) 35.84 66.54 76.78 78.56
　　从表 4可以看出 , 随着提取次数的增加 , 多糖
的提取率呈现增加趋势 , 对样品提取 3次 , 迎春花
中的多糖基本提取完全 , 因此本实验选择超声提取
3次 .
3.5　葡萄糖回收率试验
样品回收率试验结果见表 5.
表 5　葡萄糖回收率试验结果
提取液多糖含量
(mg/mL)
加入葡萄糖量
(mg/mL)
混合后多糖含量
(mg/mL) 回收率 (%) RSD(%)
0.096 0.120 0.219 102.50
0.096 0.240 0.340 101.67 0.5668
0.096 0.360 0.461 101.39
　　由表 5 可以看出本试验的平均回收率为
101.8533%, 相对标准偏差 (RSD)为 0.5668%.
3.6　影响提取效果主要因素的选择
根据单因素实验结果 , 对影响迎春花多糖提取
率的因素及水平选择见表 6.
表 6　正交试验因素和水平
水平 提取温度 (℃ ) 提取时间 (min) 提取次数 液料比
A B C D
1 60 20 1 30∶1
2 70 40 2 40∶1
3 80 60 3 50∶1
3.7　迎春花多糖提取正交试验及方差分析
表 7　 L9 (34)正交试验结果
因 素 指 标
A B C D 多糖提取率 (mg/gDW)
试验号
1 1 1 1 1 24.56
2 1 2 2 2 61.47
3 1 3 3 3 68.26
4 2 1 2 3 56.42
5 2 2 3 1 61.64
6 2 3 1 2 35.84
7 3 1 3 2 59.24
8 3 2 1 3 32.98
9 3 3 2 1 48.56
多糖提取率
K1 154.29 140.22 93.38 134.76
K2 153.90 156.09 166.45 156.55
K3 140.78 152.66 189.14 157.66
K1 51.43 46.74 31.13 44.92
K2 51.30 52.03 55.48 52.18
K3 46.93 50.89 63.05 52.55
R 4.50 5.99 31.92 7.63
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表 8　迎春花多糖提取率方差分析
误差来源 偏差平方和 (ss) 自由度 (f) 方差 (s) 方差比 (F) 显著性 (P＊)
A 39.42 2 19.71 1
B 46.49 2 23.25 1.18
C 1669.33 2 834.67 42.34 ＊＊
D 111.16 2 55.58 2.84
误差 39.42 2 19.71
　　注:F1-0.1 (2, 2)=9　F1-0.05 (2, 2)=19　F1-0.01 (2, 2)= 99.
　　由表 7可以看出 , 对试验结果影响显著的有 B,
C, D;表 8的方差分析表明因素对指标的影响的大
小顺序为:C※D※B※A, 即提取次数对实验结果影
响最大 , 液料比次之 , 提取温度影响最小 .从极差
和方差分析的结果可以看出 , 提取工艺条件为
A2B2C3D2 , 此条件正交表中没有出现 .
3.8　迎春花多糖提取精密度试验
采用提取工艺条件 A2B2C3D2对最佳提取条件进
行验正 , 平行操作 6次 , 试验结果见表 9.
表 9　多糖测定精密度试验结果 (n= 6)
样品号 1 2 3 4 5 6 RSD
多糖含量 (mg/gDW) 76.46 75.98 76.78 77.12 77.22 76.57 0.5962
　　从表 9可以看出 , 相对标准偏差 (RSD)为
0.596 2%, 结果显示重现性较好 , 精密度较高 .
4　结　论
迎春花多糖的最佳提取条件为 A2B2C3D2 , 即提
取温度 70℃, 超声提取提取 3次 , 每次 40 min, 液
料比为 40∶1提取率较高 , 达到 77 (mg/gDW).该
工艺稳定 , 精密度高 , 有较好的重现性 .
[参 考 文 献 ]
[ 1] 　张志信 ,张仕秀 , 宋关斌 ,等 .迎春花植物茎叶中黄酮类
物质初步研究 [ J] .生物技术 , 2004, (4):30-31.
[ 2] 　张志信 .不同季节迎春花茎叶中总黄酮含量的测定 [ J]
.文山师范高等专科学校学报 , 2006, (4):97-99.
[ 3] 　王中平,黄贤华,熊小琴.迎春花茎叶提取液耐缺氧作用的
实验研究 [ J] .赣南医学院学报 , 2005, (5):587-588.
[ 4] 　刘晔玮 ,邸多隆 , 葛斌 ,等 .锁阳多糖提取工艺研究 [ J] .
天然产物研究与开发 , 2006, (6):1007-1009.
ExtractionofPolysaccharidefromJasmineNudiflorumLinde
ZHAOBao-fa
(WenshanTeachersColege, WenshanYunnan663000, China)
Abstract:AnexperimentwasconductedtostudytheextractionofpolysaccharidefromJasminenudiflorumLinde.
Theresearchexploredtheefectsoffourfactors, extractiontemperature, extractiontime, extractiontimesandratioof
sampleweighttosolventvolumeontheextractionratioofpolysaccharidefromJasminenudiflorumLinde.Optimumex-
tractionconditionsweredeterminedasfolows:ratioofliquidtomaterial40∶1, threetimesofrefluxextractionat70℃,
eachfor40minutes.
Keywords:JasminenudiflorumLinde;polysaccharide;orthogonalexperiment;extractiontechnology
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