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芒萁、玉米对酸铝胁迫生理响应的比较



全 文 :书刘 强,柳正葳,龙婉婉,等.芒萁、玉米对酸铝胁迫生理响应的比较[J].江苏农业科学,2017,45(2):65-69.
doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2017.02.017
芒萁、玉米对酸铝胁迫生理响应的比较
刘 强,柳正葳,龙婉婉,胡 萃
(井冈山大学生命科学学院,江西吉安343009)
  摘要:采用水培法研究低pH值(3.5、4.5、5.5)、铝胁迫(0、50、100、400μmol/L)及其交互作用对芒萁和玉米幼苗
生长、叶片抗逆生理、根系果胶含量的影响。结果表明,当pH值由5.5下降到3.5时,芒萁各项生长、生理指标均无明
显变化,而玉米则表现为生物量明显,部分达到显著水平,叶片丙二醛(MDA)含量、脯氨酸(Pro)含量、过氧化物酶
(POD)活性显著升高。随着铝浓度由0升高到400μmol/L,芒萁、玉米生物量逐渐下降,而叶片MDA含量逐渐升高,
但在幅度上芒萁明显小于玉米,且pH值5.5的小于pH值3.5的;芒萁、玉米叶片POD、过氧化氢酶(CAT)活性,Pro、
可溶性糖(SS)含量随铝处理浓度的升高均表现为先升高后下降,但在最大升高幅度方面,芒萁明显大于玉米。在无
铝条件下,芒萁根系平均果胶含量比玉米低20.5%,且铝胁迫提高芒萁根系果胶含量明显小于玉米。综上所述,芒萁
耐酸和耐铝性强于玉米,铝对植物的毒害大于pH值,但是低pH值会加剧铝毒害效应。芒萁可通过内部解铝毒(提高
叶片POD、CAT活性,Pro、SS含量)和外部排斥(根系细胞壁果胶含量低且铝胁迫下提高幅度小)等多种途径来增强其
对酸铝胁迫的耐性。
  关键词:低pH值;铝胁迫;芒萁;玉米;抗逆生理;果胶
  中图分类号:Q945.78;S513.01  文献标志码:A  文章编号:1002-1302(2017)02-0065-04
收稿日期:2016-05-05
基金项目:国家自然科学基金(编号:31260498);江西省自然科学基
金(编号:2010GQN0122);江西省教育厅科技项目 (编号:
GJJ12466)。
作者简介:刘 强(1980—),男,江西抚州人,博士,副教授,主要从事
植物逆境生理与分子生物学研究。E-mail:qliu2006@163.com。
  目前,酸性土壤约占世界可耕土壤的50%,遍及我国南
方15个省(区)[1]。当pH值<5.5时,原固定于晶格中的铝
可逐渐解离,以 Al3+等形态释放到溶液中,危害植物生长。
铝毒已成为公认的影响酸性土壤中作物生长的主要限制因素
之一[2]。由于土壤pH值的变化会显著影响铝的存在形态[3]
及铝浓度[4],因此关于 pH值与铝毒交互作用对作物生产的
影响正日益受到关注。
关于酸铝胁迫对植物毒害及耐性机制的研究主要集中在
玉米[5]、荞麦[6-7]等农作物中开展,而对野生植物的研究较
少。野生植物与农作物相比,没有经过栽培驯化,可能保留了
更多耐性基因,这为更好地阐明植物多重耐铝机制提供了良
好的研究材料。
芒萁(DicranopterisdichotomaBernh.)为野生草本蕨类植
物,常大片生长于强酸性红壤丘陵或马尾松林下,被称为酸性
土壤指示植物。以往对芒萁的研究侧重于其生物量分布[8]、
叶斑病病原菌分离鉴定[9]、叶片光合荧光特性[10]等方面,而
对于芒萁能广泛分布生长于强酸性铝毒土壤上的耐性机制却
未见报道。为此,本试验以酸性土壤指示植物芒萁和农作物
玉米(ZeamaysL.)为材料,比较它们在不同pH值、不同铝浓
度胁迫下叶片抗逆生理指标及根系果胶含量的变化,旨在通
过将植物内部解铝毒、外部排斥机制结合起来,为揭示芒萁的
强耐酸铝机制提供一定的科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
试验材料为芒萁、玉米,其中芒萁采自井冈山大学校园酸
性红壤,玉米品种为金甜 3号。供试铝试剂为氯化铝
(AlCl3·6H2O),分析纯。
1.2 试验方法
将野外采摘的大小较一致的芒萁幼苗和发芽4d的玉米
幼苗移栽到装有1L通气的1/5Hoagland(pH值4.5)营养液
的塑料盆钵中恢复生长1周后,进行不同pH值、不同铝浓度
处理试验。铝处理浓度分别为0、50、100、400μmol/L,每个浓
度设定3个pH值,分别为3.5、4.5、5.5,共12个处理,每个
处理3次重复;植物营养用1/5Hoagland营养液供应,所有处
理液pH值均用1mol/LHCl或 NaOH调节。试验在井冈山
大学生命科学学院实验园内进行,营养液和所有处理液每3d
更换1次,早晚各通气2h。不同pH值、铝浓度处理15d后,
从上往下取植株第 2、3张完全展开叶,测定叶片丙二醛
(MDA)、脯氨酸(Pro)、可溶性糖(SS)含量,以及过氧化物酶
(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性,取根系测定果胶含量,并测
定植株鲜质量。
1.3 测定方法
采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量,酸性茚三酮法测
定脯氨酸含量,蒽酮比色法测定可溶性糖含量[11]。采用愈创
木酚法测定过氧化物酶活性,紫外吸收法测定过氧化氢酶活
性[12]。根系细胞壁的提取和果胶组分的分离按照 Zhong等
的方法[13]进行,果胶糖醛酸含量按照 Taylor等的方法[14]
测定。
1.4 数据分析
数据采用SPSS软件利用最小显著差数法(LSD法)进行
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网络出版时间:2017-02-16 16:13:22
网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/32.1214.S.20170216.1613.206.html
差异显著性(α=0.05)分析,采用SigmaPlot软件绘图。
2 结果与分析
2.1 低pH值和铝胁迫对芒萁、玉米生物量的影响
从图1可以看出,未加铝处理时,随着 pH值由5.5下降
到3.5,芒萁生物量逐渐升高但差异不显著,而玉米则表现为
pH值3.5处理显著低于pH值4.5、5.5处理,表明芒萁耐酸
性强于玉米。芒萁生物量在pH值4.5、5.5条件下随铝浓度
升高表现为先升高后下降,在 pH值为3.5时则表现为逐渐
下降,而玉米生物量在所有 pH值条件下均表现为随铝浓度
升高而明显下降。当铝处理浓度为400μmol/L时,与无铝对
照相比,芒萁生物量在 pH值为 5.5、4.5、3.5时分别下降
174%、26.1%、32.1%,而玉米生物量分别下降 21.7%、
317%、52.2%(图1)。这些结果表明,铝对植物毒害的影响
明显大于低pH值的影响,低 pH值、铝2个因素间存在较明
显的交互作用。
2.2 低pH值和铝胁迫对芒萁、玉米叶片丙二醛含量的影响
丙二醛含量通常可用来表征植物细胞膜过氧化程度,由
图2可见,未加铝处理时,芒萁叶片丙二醛含量随 pH值下降
无显著变化,而玉米则表现为pH值3.5处理显著高于pH值
4.5、5.5处理。加入铝后,芒萁、玉米叶片 MDA含量均随着
铝处理浓度的升高而升高,当铝处理浓度为400μmol/L时,
与无铝对照相比,芒萁MDA含量在pH值为5.5、4.5、3.5时
分别提高18.2%、24.4%、34.3%,玉米则分别提高33.0%、
46.2%、71.1%(图 2)。结果表明,高浓度铝处理已导致芒
萁、玉米细胞发生膜脂过氧化作用,且低 pH值加剧了铝毒效
应,但芒萁细胞膜伤害程度明显低于玉米。
2.3 低pH值和铝胁迫对芒萁和玉米叶片过氧化物酶、过氧
化氢酶活性的影响
过氧化物酶和过氧化氢酶是植物细胞内非常重要的2种
抗氧化酶,它们可通过协同作用有效清除O-2·、H2O2等活性
氧,从而维持细胞内正常代谢活动[15]。从表1可见,未加铝
处理时,随着pH值由5.5下降到3.5,芒萁叶片POD、CAT活
性变化较小,而低 pH值(3.5)显著提高了玉米叶片 POD活
性,但对 CAT活性影响较小。加入铝后,芒萁、玉米叶片
POD、CAT活性随着铝处理浓度的升高均表现为先升高后下
降,其中芒萁的酶活性在50或100μmol/L铝处理浓度时达
到最大值,而玉米的酶活性在50μmol/L铝浓度时达到最大
值。当铝处理浓度进一步提高到400μmol/L时,芒萁、玉米
叶片POD、CAT活性与无铝对照相比均显著下降,尤以玉米
下降幅度更为明显(表1)。
2.4 低pH值和铝胁迫对芒萁、玉米叶片脯氨酸、可溶性糖
含量的影响
脯氨酸、可溶性糖等渗透性调节物质含量的增加,是植物
对逆境胁迫的一种适应性反应。由表2可见,未加铝处理时,
—66— 江苏农业科学 2017年第45卷第2期
表1 pH值和AlCl3浓度对芒萁、玉米叶片过氧化物酶、过氧化氢酶活性的影响
pH值
AlCl3浓度
(μmol/L)
过氧化物酶[U/(min·mg)] 过氧化氢酶[U/(min·mg)]
芒萁 玉米 芒萁 玉米
3.5 0 74.5±8.13c 70.5±6.33b 15.7±1.82bc 15.8±1.08bc
50 91.7±7.54a 83.7±7.24a 18.2±1.53a 18.2±1.22a
100 69.9±6.12c 53.9±3.19d 14.4±0.92c 11.4±0.51d
400 55.4±4.38e 39.6±3.32f 11.4±1.21e 8.13±0.37e
4.5 0 71.2±5.77c 62.3±5.91c 15.3±1.19bc 16.4±1.34b
50 85.0±6.36b 77.3±6.82ab 17.5±1.75ab 19.4±1.78a
100 89.3±7.13ab 70.9±6.35b 18.4±1.61a 18.3±1.16a
400 59.3±4.95de 44.5±3.42ef 12.4±0.88d 11.4±1.27d
5.5 0 73.6±6.46c 63.9±4.49c 14.8±1.21c 15.9±0.94bc
50 85.2±5.53b 78.1±6.27ab 16.7±1.45b 18.6±1.58a
100 96.7±9.27a 72.5±4.59b 19.0±1.76a 14.5±1.15c
400 64.5±3.78d 48.4±2.91e 12.7±0.72d 11.3±0.82d
  注:同列数据后不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。表2同。
pH值对芒萁Pro、SS含量影响均较小,而低 pH值(3.5)显著
提高了玉米 Pro含量,但对 SS含量影响较小。加入铝后,芒
萁和玉米Pro、SS含量随着铝处理浓度的升高均表现为先升
高后下降,且都在 100μmol/L铝处理浓度时达到最大值。
100μmol/L铝处理浓度时,与无铝对照相比,芒萁Pro含量在
pH值为5.5、4.5、3.5时分别提高63.8%、54.3%、45.2%,玉
米分别提高37.6%、31.0%、25.9%,而芒萁 SS含量分别提
高74.9%、56.0%、42.1%,玉米分别提高 40.6%、33.4%、
31.2%(表2)。
表2 pH值和AlCl3对芒萁、玉米叶片脯氨酸、可溶性糖含量的影响
pH值
AlCl3浓度
(μmol/L)
脯氨酸含量(μg/g) 可溶性糖含量(μg/g)
芒萁 玉米 芒萁 玉米
3.5 0 93.1±8.24d 131.2±12.2b 694.2±50.1e 879.5±66.2c
50 111.3±9.65c 154.5±13.7a 899.4±76.5c 1085.3±87.5ab
100 135.2±12.3a 165.2±19.6a 986.6±86.2b 1153.6±96.7a
400 119.5±9.69bc 105.1±11.7d 806.1±49.4d 748.2±49.4d
4.5 0 91.8±7.56d 113.2±9.33c 689.4±55.3e 876.7±64.3c
50 117.1±12.1bc 129.5±10.2b 887.8±71.3c 1034.3±83.9b
100 141.7±14.3a 148.3±13.3ab 1075.2±97.9b 1169.4±104.2a
400 123.1±9.95b 100.6±8.41d 849.5±64.6cd 786.5±65.4d
5.5 0 89.2±6.64d 117.1±9.92c 672.6±56.8e 865.2±54.8c
50 115.3±12.8bc 139.2±12.2b 878.4±51.4c 1008.5±105.9b
100 146.1±11.6a 161.1±14.1a 1176.3±97.3a 1216.1±126.4a
400 125.6±9.58b 102.3±10.7d 855.7±65.4cd 1015.9±97.7b
2.5 低pH值和铝胁迫对芒萁、玉米根系果胶含量的影响
细胞壁果胶组分是铝积累的主要部位,结合在细胞壁上
的铝不仅会影响细胞壁的化学组分,而且对细胞壁的结构、功
能会产生显著影响,从而导致根细胞伸长的抑制[16]。由图3
可以看出,未加铝处理时,3种 pH值(3.5、4.5、5.5)条件下
芒萁 根 系 平 均 果 胶 含 量 为 12.4μg/mg,而 玉 米 为
15.6μg/mg,且pH值对芒萁、玉米根系果胶含量影响均较
小。加入铝后,芒萁、玉米根系果胶含量均随着铝处理浓度的
升高而升高,当铝处理浓度为400μmol/L时,与无铝对照相
比,芒萁根系果胶含量在 pH值5.5、4.5、3.5处理下分别提
高11.5%、12.1%、12.6%,玉米则分别提高15.8%、20.3%、
27.6%(图3)。
3 结论与讨论
虽然铝对植物是一种毒性元素,但通常只有超过一定浓
度才会产生毒害,且其毒害程度与溶液 pH值相关[4]。本研
究发现,低pH值(3.5)在一定程度上促进了芒萁生长,但明
显抑制了玉米生长,而单一铝浓度处理对芒萁生物量的不利
影响远小于玉米,表明芒萁的耐酸性、耐铝性均高于玉米。就
pH值和铝毒害的交互作用而言,低 pH值 (3.5)和
400μmol/L铝共同处理时,对芒萁、玉米植株生物量的影响
远大于单一pH值和铝处理,铝处理浓度越高,植株生物量尤
其是玉米受抑制越严重,可见低pH值加剧了铝毒害的发生,
这在玉米[5]、荞麦[6]等酸铝胁迫研究中也观察到类似的
结果。
丙二醛是活性氧自由基攻击膜脂过氧化作用的主要降解
产物,其含量的升高也在以往铝毒胁迫研究中被大量报
道[6,17]。在本试验中,未加铝时低pH值(3.5)显著提高了玉
米MDA含量但对芒萁无影响,同一铝处理浓度下玉米 MDA
含量的升幅远大于芒萁,表明酸铝胁迫对玉米的氧化损伤程
度明显大于芒萁,这可能与酸铝胁迫下玉米体内活性氧自由
基产生的速率高于芒萁有关。
—76—江苏农业科学 2017年第45卷第2期
  通常认为,植物体内保护酶系统(如超氧化物歧化酶、
POD、CAT)和非保护酶系统的同步调控是细胞内活性氧自由
基清除的重要机制,有利于维持细胞膜结构稳定性[18]。在本
研究中,芒萁、玉米叶片 POD、CAT活性在中低浓度铝(50~
100μmol/L)处理下升高且升幅芒萁大于玉米,而在高浓度铝
(400μmol/L)处理下显著下降,表明中低浓度铝胁迫条件下
芒萁清除活性氧自由基的能力强于玉米,而高浓度铝则造成
植物抗氧化酶系统破坏,导致细胞内 MDA大量积累,尤以玉
米所受影响更大,这种变化趋势与在荞麦[6]和蓼科植物[19]酸
铝胁迫研究中取得的结果一致。同时,在逆境胁迫下,植物细
胞能主动积累游离脯氨酸、可溶性糖等有机渗透物质来调节
细胞渗透势,保护植物组织内各种酶类及细胞膜结构的正常
功能[20]。本研究发现,芒萁、玉米脯氨酸和可溶性糖含量随
着铝处理浓度的升高表现为先升高后下降,至100μmol/L铝
浓度时升幅最大且芒萁高于玉米,而至400μmol/L铝浓度时
芒萁较无铝处理显著升高而玉米则显著下降,表明芒萁可通
过维持较高脯氨酸、可溶性糖含量来提高对中高铝浓度胁迫
的适应性,而玉米在高浓度铝胁迫下脯氨酸、可溶性糖合成受
到影响,保护机制不能正常启动。
根系伸长受抑是铝胁迫下最敏感的典型症状[1]。目前
研究认为,铝对细胞伸长的抑制是导致根伸长早期抑制的主
要原因,而细胞的伸长与细胞壁组分和伸展性密切相关[21]。
研究表明,果胶是细胞壁中铝积累的主要位点,其含量高低与
植物铝毒害显著相关。如采用 NaCl预处理增加玉米悬浮细
胞果胶含量后,也相应提高了细胞铝含量及对铝毒的敏感
性[22]。在本研究中发现,无铝处理时玉米根系果胶含量比芒
萁高25.8%,且铝胁迫提高玉米根系果胶含量的幅度大于芒
萁,导致玉米根系细胞壁铝吸附位点显著增加,从而表现为玉
米较芒萁对铝胁迫更为敏感。
综上,芒萁的耐酸性和耐铝性均明显强于玉米,铝对植物
的影响远大于pH值,但低pH值会加剧铝毒害效应。相对于
玉米而言,芒萁在中低浓度(50、100μmol/L)铝胁迫下可同
时通过内部解铝毒(提高叶片 POD、CAT活性,脯氨酸、可溶
性糖含量)和外部排斥(根系细胞壁果胶含量低且铝胁迫下
提高幅度小)2种机制来增强其对酸铝胁迫的耐性。
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拔节期夏玉米洪涝胁迫下叶绿素含量
和高光谱特征变化
陈 振1,2,隋学艳2,梁守真2,王 猛2,颜丙囤1,2
(1.中国矿业大学,江苏徐州221116;2.山东省农业可持续发展研究所,山东济南 250000)
  摘要:基于农作物遥感原理,通过模拟试验的方式,获取洪涝胁迫下夏玉米高光谱特征变化情况,结合玉米叶绿素
含量变化特征,为玉米洪涝灾害识别及区分洪涝胁迫程度的遥感监测提供先验知识。结果发现,洪涝胁迫下拔节期夏
玉米叶绿素含量呈下降趋势,淹水时间越长,下降幅度越大;光谱反射率在可见光部分随淹水时间增加而上升,在近红
外部分随淹水时间增加而下降。红边处一阶微分(Dre)、绿峰处反射率(ρg)、反射率面积SGρ(绿)等多种光谱参数可
以指示玉米洪涝灾害的发生程度,可以作为玉米洪涝灾害监测与评估的重要参数。
  关键词:洪涝胁迫;夏玉米;叶绿素;光谱特征;遥感监测
  中图分类号:P237;S513.01  文献标志码:A  文章编号:1002-1302(2017)02-0069-04
收稿日期:2015-11-26
基金项目:山东省农业重大应用技术创新课题;农业农村资源等监测
统计经费(农业遥感监测与评价)项目(编号:);山东省信息化(电
子政务)专项。
作者简介:陈 振(1988—),男,山东潍坊人,硕士研究生,主要从事
农业遥感及应用研究。E-mail:chenzhen0608@126.com。
通信作者:隋学艳,硕士,助理研究员,主要从事农业遥感研究。
E-mail:sdnkysxy@163.com。
  玉米是世界总产量最高的粮食作物,其产量与粮食安全
休戚相关。2013年我国玉米种植面积3631.8万 hm2,总产
2180亿kg,占粮食总产的36.3%[1]。近年来由于玉米用途
广、生产机械化程度高,其在粮食作物总种植面积和产量的占
比逐年增加,玉米对我国粮食产业影响较大[2]。农作物种
植,除了种子质量、栽培管理外,灾害是影响产量的重要决定
因素[3]。我国幅员辽阔,自然条件复杂,洪涝灾害发生频繁,
己成为我国社会经济持续发展中重要的制约因素之一。据不
完全统计,每年大约0.073亿hm2农田遭受洪涝灾害,每年经
济损失在100亿元左右,约占国民生产总值的1% ~2%[4]。
夏玉米生长雨热同季,近几年由于气候多变,以及农户耕地整
理时对排水系统的破坏,导致玉米涝灾的普遍发生。
玉米洪涝灾害发生后,需要农业生产管理部门作出及时
的响应,确定受灾位置、面积以及受灾程度,据此作出救灾减
灾方案,指导农户将损失降至最低。目前,多数地区还是依靠
传统的人工调查,由于灾害发生后田间无法进入,受时间和人
力的影响,只能筛选部分代表性的地块,并以此作出估算进行
受灾情况上报。传统方法费时费力效果较差。遥感技术作为
信息获取的重要方法,已经广泛地应用于农业生产中,例如农
业资源调查、农作物长势监测、品质预测、估产、灾害监测等
方面[5-6]。
目前,国内外未见利用遥感技术进行夏玉米洪涝灾害监
测与评估的研究报道。随着高光谱、高空间分辨率传感器的
应用,通过分析作物遭受洪涝灾害前后光谱反射率差异,可以
实现洪涝灾害的定量监测。本研究通过模拟试验实测夏玉米
在拔节期受洪涝灾害后高光谱曲线特征及叶绿素等生理生态
参数,为遥感监测洪涝灾害提供先验知识。
1 材料和方法
1.1 试验材料
试验于2015年夏玉米拔节期进行,试验地点位于山东省
济阳县太平镇姜家村(116°19′602″E、39°57′822″N),试验田
中等肥力,夏玉米南北向种植,长势良好,灌溉条件便利。
1.2 试验设计
洪涝处理设6个水平,分6个试验小区,对照组CK正常
生长(不处理)、洪涝处理组水淹1、3、5、7、9d,持续灌水,保
证水没过玉米根部。各处理水平依次标记为 CK、T1、T2、T3、
T4、T5,水淹程度依次加重。7月30日洪涝处理,7月31日、8
月2日、8月4日、8月6日、8月8日、8月10日和8月12日
测量光谱数据和叶绿素含量等参数。
—96—江苏农业科学 2017年第45卷第2期