全 文 :第 29 卷 第 4 期
2 0 1 1 年 4 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 4
Apr. 2 0 1 1
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白花丹参水提物对衰老小鼠学习记忆障碍的影响
李聚仓1,郑辉2,王德才1,王浩1
( 1.泰山医学院药学院,山东 泰安 271016; 2.枣庄科技职业技术学院技术系,山东 滕州 277500)
摘 要:目的:研究白花丹参水提物对衰老小鼠学习、记忆障碍作用的影响。方法:小鼠灌胃给予白花丹参水
提物,连续 6 周,利用 Y型迷宫、跳台法和自主活动仪,观察白花丹参水提物对 D -半乳糖所致学习记忆障碍的影
响。结果:结果表明白花丹参水提物能明显改善 D -半乳糖所致的学习记忆障碍的能力( P < 0. 05 或 P < 0. 01) 。
结论:白花丹参水提物对于衰老小鼠的学习、记忆障碍有明显的改善作用。
关键词:白花丹参;水提物; D -半乳糖;学习记忆
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2011) 04 - 0884 - 02
Effect of Aqueous Extract of Salvia Miltiorrhiza Bge. F. alba on the
Improvement of Learning and Memory Disturbance in Senile Mice
LI Ju-cang1,ZHENG Hui2,WANG De-cai1,WANG Hao1
( 1. School of Pharmacy,Taishan Medical College,Taian 271016,Shandong,China,
2. School of Science,Zaozhuang Vocational College Science and technology,Tengzhou 277500,Shandong,China)
Abstract: Objective: To study the effects of aqueous extract of Salvia miltiorrhiza Bge. F. alba on the improvement of
learning and memory disturbance in senile mice. Methods: The mice were ig aqueous extract of Salvia miltiorrhiza Bge. F.
alba for six weeks continuously. The learning and memory ability of senile mice which was caused by D - galactose were
determined with Y - maze test and step - down test,and autonomic activities test. Result: The aqueous extract of Salvia
miltiorrhiza Bge. F. alba improved the learning and memory function of dysmnesia mice caused by D - galactose( P <
0. 05 或 P < 0. 01) . Conclusion: The aqueous extract of Salvia miltiorrhiza Bge. F. alba could improve learning and mem-
ory disturbance in senile mice.
Key words: salvia miltiorrhiza bge. F. alba; Aqueous extract; D - galactose; learning and memory
收稿日期: 2010 - 11 - 22
作者简介:李聚仓( 1984 - ) ,男,山东菏泽人,硕士研究生,研究方
向: 中药药理学。
通讯作者:王德才( 1962 - ) ,男,教授,研究方向: 中药药理学。
白花丹参 ( salvia miltiorrhiza bge. F. alba. C. Y. wu. et
H·W·Li) 是唇形科植物丹参( Salvia miltiorrhiza Bge) 的变
种,主要分布于山东境内泰山山脉及其周边地区,已被列为
“泰山珍稀濒危物种”[1]。白花丹参味苦,微寒,归心、肝经,
有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功能[2]。研究表明,丹参
及复方丹参注射液能明显提高实验动物的学习记忆能力,而
丹参酮能改善阿尔茨海默病样大鼠学习记忆障碍[3 -4]。
白花丹参具有丹参的作用和用途,故白花丹参也应该
有提高实验动物的学习记忆能力。通过本实验中观察白花
丹参水提物对正常及半乳糖导致学习记忆障碍模型小鼠学
习记忆能力的影响,并对其机制进行初步探讨,以期为白花
丹参的应用提供科学依据。
1 材 料
1. 1 实验动物 昆明种小鼠,体质量 28 ~ 33g,全雄性,购
于山东中医药大学,生产许可证号: scxk( 鲁) 20050015。
1. 2 仪器与试药 Y 迷宫刺激器( 安徽省淮北正华生物
仪器设备有限公司产品) ; ZIL - 2 小鼠自主活动实验自动
控制仪( 由中国医学科学院药物研究所研制) ;白花丹参水
提物( 白花丹参于秋季采自泰山东麓,经泰山医学院苏延
友教授鉴定。将白花丹参根清洗干净晾干,用粉碎机粉碎,
取适量粉末置于煎煮容器内,加入 10 倍药材量的冷纯化水
浸泡 24h,强火煮沸,再以文火煎煮 30min,过滤; 虑渣加 5
倍量纯化水继续煎煮,强火煮沸后改文火再煎煮 20min,过
滤。合并两次滤液,经旋转蒸发仪旋转蒸发浓缩而成。临
用时以纯化水配成所需浓度) ; D -半乳糖( 上海试剂二厂
生产,批号: 20080927) ;
2 方 法
2. 1 实验动物分组与给药 将 50 只昆明种小鼠随机分为
空白对照组、模型组及高、中、低剂量治疗组,每组各 10 只。
除空白对照组外,其余各组均皮下注射 D -半乳糖 0. 12g /
( kg·d) 。同时高、中、低剂量组分别予白花丹参水提液
40、20、10g / ( kg·d) 灌胃,模型组和空白对照组给予 0. 1L /
( kg·d) 蒸馏水灌胃,连续 42d。
2. 2 Y型迷宫测试[5] 实验在 3 等分的 Y型迷宫进行,迷
宫 3 个末端小区可分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ。当Ⅰ作为起步区时Ⅲ作
为安全区,当Ⅱ作为起步区时Ⅰ作为安全区,当Ⅲ作为起步
区时Ⅱ作为安全区依次轮换。小鼠受到电击后,直接由起
步区逃至安全区为正确反应,否则均属错误反应。以 1 个
实验日内完成 10 次反应中错误次数作为学习成绩,24 h后
重复测验,记录错误次数为记忆成绩。
2. 3 跳台测试[6] 将小鼠放入跳台箱内安全台上,先适
应环境 3min,然后通电,小鼠受到电击后会自动跳上安全
台,逃避电击。以小鼠跳下安全台为错误反应,受到电击后
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DOI:10.13193/j.archtcm.2011.04.214.lijc.072
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小鼠会跳回安全台。以小鼠第 1 次跳下时间作为反应期,
并记录 5min错误次数,此成绩作为学习成绩。24h 后直接
将小鼠置于平台上,记录小鼠潜伏期及每只小鼠 5min的错
误次数,此成绩作为小鼠记忆成绩。
2. 4 自动活动测试[7] 将小鼠放入自主活动程序测定仪
活动箱中,每个活动箱中 1 只,放入后先适应 2min,自动记
录小鼠 3min内的活动次数。
2. 5 统计学方法 采用 SPSS 11. 0 统计软件处理。数据
均以 珋x ± s表示,分别进行单因素方差分析。
3 结 果
3. 1 Y型迷宫测试结果 与生理盐水对照组相比,模型组
的学习和记忆出现的错误明显增加,差异具有统计学意义。
说明模型成功。与模型组相比较,白花丹参高、中剂量组均
能明显减少学习时的错误次数,有统计学意义; 3 个剂量组
均能明显减少小鼠记忆时的错误次数,有统计学意义。提
示白花丹参具有改善 D -半乳糖衰老小鼠所致的学习和记
忆障碍的作用。详见表 1。
表 1 Y型迷宫测试结果( n = 10,珋x ± s)
分组
剂量
( g·kg -1 )
错误次数 /次
学习 记忆
生理盐水 — 2. 90 ± 1. 10 2. 30 ± 1. 25
模型组 — 6. 00 ± 1. 70* 6. 50 ± 1. 96*
白花丹参 10 4. 60 ± 1. 90 4. 10 ± 1. 85#
白花丹参 20 3. 60 ± 1. 90# 3. 72 ± 0. 82#
白花丹参 40 3. 50 ± 1. 35# 3. 30 ± 1. 95#
注: 与生理盐水组相比,*P < 0. 01; 与模型组相比较,#P <
0. 1。
3. 2 跳台测试结果 与生理盐水组相比,模型组学习的
反应期和记忆的潜伏期明显延长,学习和记忆测试时出现
的错误次数明显增多,差异均具有统计学意义。说明造模
成功。与模型组相比较,白花丹参在剂量为 10、20g·kg -1
时均可明显延长学习的反应期和记忆的潜伏期,学习和记
忆测试时出现的错误次数也明显增多,均具有统计学意义。
提示白花丹参具有改善 D -半乳糖所致衰老小鼠的学习和
记忆障碍的作用。相见表 2。
表 2 各组小鼠跳台测试成绩( n = 10,珋x ± s)
分组
剂量
( g·kg - 1)
学习
反应期 错误次数
记忆
潜伏期 错误次数
生理盐水 — 17. 76 ± 3. 21 2. 9 ± 1. 20 135. 4 ± 14. 7 4. 5 ± 0. 97
模型组 — 22. 86 ± 3. 64* 5. 0 ± 1. 16* 101. 8 ± 19. 8* 2. 8 ± 0. 92*
白花丹参 10 20. 14 ± 3. 15 4. 0 ± 1. 16 112. 1 ± 16. 5 3. 7 ± 1. 49
白花丹参 20 18. 50 ± 3. 12# 3. 4 ± 1. 35# 132. 8 ± 15. 6# 2. 9 ± 1. 37#
白花丹参 40 17. 41 ± 3. 09## 2. 9 ± 1. 29## 120. 8 ± 20. 3## 2. 6 ± 0. 97##
注: 与生理盐水组相比,*P < 0. 01; 与模型组相比,#P < 0. 05,##P < 0. 01。
表 3 小鼠自主活动测试结果( n = 10,珋x ± s)
分组 剂量( g·kg -1 ) 自主活动数
生理盐水 — 185. 3 ± 32. 1
模型组 — 142. 1 ± 25. 7*
白花丹参 10 171. 7 ± 21. 6#
白花丹参 20 173. 6 ± 30. 6#
白花丹参 40 186. 5 ± 17. 4##
注: 与生理盐水组相比,*P < 0. 01; 与模型组相比,#P < 0. 05,
##P < 0. 01。
3. 3 小鼠自主活动测试结果 与生理盐水组相比,模型
组小鼠自主活动数明显降低( P < 0. 01) ,具有统计学意义。
与模型组相比较,白花丹参 3 个剂量组均可明显增加小鼠
自主活动数( P < 0. 05 或 P < 0. 01 ) ,具有统计学意义。提
示白花丹参能剂量依赖性明显减轻 D -半乳糖所致小鼠衰
老程度。
4 讨 论
D -半乳糖所致学习、记忆障碍衰老模型是最常用的
模型之一。D -半乳糖是机体正常的营养成分,在一定时
间内,连续给动物注射大剂量的 D -半乳糖,机体细胞内的
半乳糖浓度就会过多,这些半乳糖可由半乳糖氧化酶催化
生成醛糖和过氧化氢,产生超氧阴离子。醛糖在醛糖还原
酶的催化下,还原成不能被细胞进一步代谢的半乳糖醇,从
而堆积在细胞内,影响正常渗透压,导致细胞肿胀重要器官
代谢障碍,最终出现衰老。另一方面过量的氧自由基使细
胞膜脂质受损,导致脑神经元退行性变,神经元数目减少、
脑组织中过氧化物歧化酶 ( SOD ) 活性下降及丙二醛
( MDA) 、脂褐素升高等,造成动物学习记忆能力下降及机
体衰老[8 - 9]。白花丹参具有祛瘀镇痛、活血通经、凉血消
肿、清心除烦等功能,是中医传统使用的活血化瘀药,被广
泛用于防治心脑血管病。有研究表明丹参酮能改善阿尔茨
海默病样大鼠学习记忆障碍[3 - 4]。
本实验通过 D -半乳糖所致学习、记忆障碍衰老模型,
观察白花丹参水提物对小鼠学习、记忆障碍的影响。本实
验通过 Y迷宫测试,白花丹参高、中剂量组均能明显减少
学习时的错误次数; 3 个剂量组均能明显减少小鼠记忆时
的错误次数。跳台实验发现白花丹参在剂量为 10、20g /
kg -1时均可明显延长学习的反应期和记忆的潜伏期,学习
和记忆测试时出现的错误次数也明显增多;自主活动显示
白花丹参三个剂量组均可明显增加小鼠自主活动数。三种
方法均表明白花丹参能明显改善记忆障碍的衰老小鼠的学
习和记忆能力。
综上所述,白花丹参水提物具有明显的保护 D -半乳
糖所致小鼠衰老的作用,具有提高衰老小鼠的学习记忆能
力,在抗衰老方面,有着可观的发展和开发前景。
参考文献
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