全 文 ：[科研报道 ]
水团花含量测定方法的研究
朱华旭 1 , 　闵知大 2
(1.南京中医药大学植物药中心 ,江苏 南京 210029;2. 中国药科大学天然药物化学教研室 ,江苏 南京
210038)
收稿日期:2004-07-30
基金项目:“九五 ”国家科技攻关重中之重项目—淫羊藿等 10种中药标准品研究
作者简介:朱华旭(1972～ ),女 ,博士 ,助理研究员,从事天然药物化学和新药开发研究。电话:025-86798399。
关键词:水团花;含量测定;反相高效液相色谱法;去甲丁子香宁
摘要:目的:建立中药水团花的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱:ZORBAX Ex tend C18(250 mm ×
4. 6 mm , 10 μm);流动相:甲醇-水(40∶60);流量:1. 0 m L m in- 1;检测波长:255 nm;柱温:25 °C;检测灵敏度:0. 005
AUFS。结果:对照品去甲丁子香宁(Noreugen in)在3. 8 ～ 122. 0 μg mL - 1之间呈良好的线性关系(r=0. 999 9), 平均加
样回收率为 99. 58 , RSD =0. 23 。结论:该方法简便准确 ,重现性好 , 可用于控制水团花的质量。
中图分类号:R284. 1　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2005)11-1332-02
　　水团花(Adina pilulifera (Lam. ) F ranch. ex D rake)为茜
草科水团花属 (Adina Sa lisb. )植物 , 异名水黄凿 (《陆川本
草》),溪棉条(《福建中草药》), 水杨梅 , 水蓼花 (广东), 假
马烟树(海南)。水团花属有 3种 , 国外分布于日本和越南;
我国有 2种 , 分布于广东 、海南 、广西 、福建 、江西 、浙江和贵
州 , 分别为水团花和细叶水团花(Adina rubella H ance);水团
花生于海拔 200-350米山谷疏林下或旷野路旁 、溪边水
畔 [ 1] 。全株可治家畜瘢痧热症。根系发达 , 是很好的固堤植
物。水团花具有清利湿热 , 消瘀定痛 ,止血生肌的功效 , 主治
痢疾 , 肠炎 ,湿热浮肿 , 痈肿疮毒 ,湿疹 , 烂脚 ,溃疡不敛 , 创伤
出血 [ 2] 。
水团花的根含乌檀苷 (Naucleoside)、β-谷甾醇 、去甲丁
子香宁(Noreugenin)及棕榈酸。此外还含生物碱 、黄酮苷 、
挥发油 、鞣质 、氨基酸 、还原糖。 叶含皂苷 、β-谷甾醇 、豆甾
醇。茎含奎诺酸(Quinov ic ac id)、莫洛酸 (M orolic ac id)、桦
皮酸(Be tu lin ic acid)、辛可利酸(C incho licacid)[ 3] 。
根据国家九五攻关项目课题的总体要求 ,建立了水团花
(Adina pilu lifera (Lam. ) F ranch. ex D rake)的含量测定方
法。
1　仪器与对照品
1. 1　仪器
W aters 515泵 , W ate rs 2487检测器:W ate rs 600泵 , W a-
ters 996检测器。 Rheodyne进样器 , W aters工作站及WDL-95
工作站 , 色谱柱:ZORBAX Ex tend C18柱 (Ag ilent, 250 mm ×
4. 6 mm , 10 μm)。
1. 2　对照品
去甲丁子香宁 (Noreugenin)对照品为自制 , 经 IR、
M S、1H-NMR、13C-NMR谱鉴定为 noreugenin。经对照品纯度
检查 , 表明其纯度 >98 。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件
流动相:甲醇-水(40∶60),测定波长:255 nm。
在上述条件下 ,样品的 H PLC色谱图见图 1, 以 Noreuge-
nin计算柱效 , 理论塔板数大于 5000。为确保定量分析的准
确 ,在系统试验中 Noreugenin的理论塔板数均不低于 5000。
图 1　药材的含量测定 HPLC图谱
Peak 1为去甲丁子香宁
2. 2　对照品溶液的制备
精密称取已干燥的对照品 Noreugenin(纯度大于 98 )
1. 22 m g,置 10 mL量瓶中 , 加入甲醇溶解并稀释至刻度 , 制
成对照品贮备液(122. 0μg m l- 1)。
2. 3　供试品溶液的制备
取药材粉末(过 40目筛)1 g, 精密称定 , 置具塞锥形瓶
中 ,精密加入醋酸乙酯 20 mL, 精密称定 , 回流提取 60 m in,
补重。回流液滤过 ,精密吸取滤液 10 mL,水浴挥干溶剂 ,残
渣加甲醇溶解 ,溶液置于 10 m L量瓶中 , 加甲醇多次洗涤并
稀释至刻度 ,摇匀。取上述溶液 1 mL, 精密加入甲醇 1 m L,
离心 ,即得。
2. 4　线性关系考察
1332
2005年 11月
第 27卷　第 11期
中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
Novem be r 2005
Vo.l 27　No. 11
将对照品 Noreugen in贮备液(122. 0 μg mL - 1)加甲醇
分别配成 61. 0, 30. 5, 15. 2, 、 7. 6, 3. 8 μg mL - 1的系列对照
品 , 分别吸取上述溶液 5 μL, 注入 5 μL定量管的液相色谱
仪进样器 , 测定 , 以峰面积为纵坐标(Y), 对照品浓度(mg /
mL)为横坐标(X),绘制标准曲线 , 得回归方程:Y =2. 599×
107X -3. 171×104　 r=0. 9999。
Noreugenin浓度在 0. 019 ～ 0. 61 μg之间呈良好的线性
关系。
2. 5　精密度试验
精密吸取同一对照品溶液 , 重复进样 6次 , 每次 5 μL,
以 Noreugenin的峰面积计 , RSD为 0. 41 。
2. 6　重复性试验
同一批药材(福建中特制药有限公司提供), 取 6份 , 按
药材提取方法制备成样品液 , 依法测定 , 重复性结果 Noreu-
genin的 RSD 为2. 11 。
2. 7　稳定性试验
同一批药材(福建中特制药有限公司提供), 按药材提
取方法制备成样品液 ,每隔 2 h测一次 , 共测 6次 , 测定结果
见下表。结果表明 , 样品中化合物 11在 10 h内稳定。 其稳
定性 RSD 为0. 58 。
2. 8　加样回收率试验
取含量已测定的药材 , 进行加样回收率试验。 取样 6
份 , 精密称定 ,置锥形瓶中 , 样 1 ～样 2加入 2. 2 m L 0. 133 m g
mL - 1的标准品溶液 , 样 3 ～样 4加入 2. 0 mL 0. 133 mg
mL - 1的标准品溶液 , 样 5 ～ 样 6加入 2. 6 mL 0. 133 m g
mL - 1的标准品溶液 ,按药材提取方法制备样品 , 结果见表 1。
表 1　 药材中化合物 11的加样回收率试验结果
序号 重量(g)
样品含量
(m g /g)
加标量
(mg)
检出量
(mg)
回收率
( )
RSD
( )
1 0. 970 0. 815 1. 463 2. 271 99. 52
2 0. 965 0. 811 1. 463 2. 271 99. 79
3 1. 005 0. 844 1. 330 2. 166 99. 40 0. 23
4 0. 998 0. 838 1. 330 2. 165 99. 77
5 0. 995 0. 836 1. 729 2. 561 99. 77
6 1. 015 0. 853 1. 729 2. 569 99. 25
2. 9　最低检测线的测定
照高效液相色谱法(中国药典 2000版一部附录 VID)测
定。对照品的最低检测限量为 0. 45 ng。
2. 10　样品测定
在上述色谱条件下进行 6批药材的测定含量 , 结果见表
2(n=3)。
表 2　 药材水团花的含量测定结果
批号 1 2 3 4 5 6
含量( ) 0. 079 0. 082 0. 078 0. 074 0. 074 0. 091
　　根据测定结果 ,药材的平均含量为 0. 080 ,将含量限度
暂定为:本品按干品 计 , Noreugen in 的含量 不得少于
0. 064 。
3　讨论
流动相的选择:以甲醇-水系统为流动相进行色谱分析 ,
经试验研究表明 ,甲醇-水比例为 40∶60时 ,样品峰不拖尾 ,
分离较好;样品中 Noreugenin 分离度为 41. 0, 塔板数为
10460。故选用甲醇-水(40∶60)。
测定波长的选择:根据紫外吸收光谱 , Noreugen in甲醇
液的最大吸收波长为 293 nm、 255 nm、248 nm和 227 nm, 且
255 nm吸收值最大 , 灵敏度较高 ,故选用 255 nm。
目前尚未有对水团花质量标准的研究报道 , 本题首次运
用高效液相色谱法对对照品 Noreugenin进行了含量检测 ,制
定了药材的含量测定方法。根据对主产地 6批药材含量测
定的平均值 , 以 - 20 为下限 , 将药材的含量限度定为
0. 064 。
采用 RP-HPLC测定药材含量 , 方法简便准确 , 重现性
好 ,可以很好地控制水团花的质量。
参考文献:
[ 1] 　中国科学院中国植物志编委会. 中国植物志(71卷第一分册 )
[M ] . 北京:科学出版社 , 1999:274-276.
[ 2] 　黄泰康 ,丁志遵 ,赵守训 ,等主编. 现代本草纲目(上卷)[M ] .
北京:中国医药科技出版社 , 2001:473-474.
[ 3] 　何直曰升 ,樊高骏. 水杨梅化学成分的研究(Ⅳ). 中草药 [ J] .
1998, 29(3):151.
不同采收期鱼腥草中挥发油的提取及成分测定
陈胜璜 1 , 　汤艳红 2 , 　周日宝1 , 　贺又舜 1 , 　陈春飞 1
(1.湖南中医学院 药学院 ,湖南 长沙 410004;2.湖南九芝堂药业有限公司 ,湖南 长沙 410008)
收稿日期:2004-07-12
基金项目:国家科技部 2001BA701A24-08
作者简介:陈胜璜(1964-),男,湖南益阳人 ,副教授 ,主要从事中药有效成分及质量标准研究 ,电话:0731-5580214。
关键词:鱼腥草;挥发油;GC-M S
中图分类号:R284. 1　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2005)11-1333-02
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2005年 11月
第 27卷　第 11期
中 成 药
Chine se T raditiona l PatentM ed icine
Novem be r 2005
Vo.l 27　No. 11