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通讯作者:张帆 Tel:13871210003 E-mail:drzhangFan@ 126． com
溪黄草浸膏对动物胆汁分泌及免疫功能的影响
张帆1 庞雪冰2 (武汉市第六医院妇产科 武汉 430015;华中科技大学同济医学院计划生育研究所)
摘 要 目的:利用药效学实验方法，验证溪黄草浸膏利胆、增强免疫功能的作用功效。方法:对大鼠行胆总管插管术，在十
二指肠注射给药，观察溪黄草浸膏对麻醉大鼠胆汁分泌量的影响。应用非特异型免疫功能 －碳廓清实验方法和体液免疫功
能 －血清溶血素实验方法，观察溪黄草浸膏在连续给药后，动物碳廓清率和溶血素的改变。结果:溪黄草浸膏在 8 和 16 g·
kg －1剂量下，给药 30 min即可将大鼠的胆汁流量分别提高为57． 14%和64． 28%。碳廓清率和溶血素实验结果表明:溪黄草浸
膏剂量 9 和 27 g·kg －1能极明显提高 NIH 小鼠单核细胞吞噬功能，对小鼠血清的溶血素亦有明显的增加作用(P ＜ 0． 05或
0． 01)。结论:溪黄草浸膏可提高动物免疫功能，促进胆汁分泌。
关键词 溪黄草浸膏;免疫功能;胆汁分泌
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-049X(2012)04-0575-02
溪黄草为香茶菜属植物(Rabdosia (Bl．)Hassk)。主要
含有萜类、黄酮类、挥发油、甾醇类、酚类、微量元素等多种化
学成分。国内开展溪黄草化学成分药效学研究主要在抗癌、
抗炎、清除自由基等功效上。其活性成分黄酮类物质，对肝
炎病毒有显著抑制复制作用。其多糖及黄酮提取物对羟自
由基有较好的清除作用，并在体外对金黄色葡萄球菌和枯草
芽孢杆菌有一定的抑菌效果［1，2］。依据中医临床利胆用药
剂量，在动物实验中对溪黄草浸膏利胆、增强机体免疫的功
效进行实验验证。
1 材料与方法
1． 1 药品
溪黄草浸膏由广东翁源县青云山中药厂提供，批号:
20000909 ，每克浸膏含生药4． 12 g。利胆醇由广州星群(药
业)有限公司生产，批号:0003002。联苯双酯由上海天平制
药厂生产，批号:0005004。环磷酰胺为江苏恒瑞医药股份有
限公司生产，批号:000723。
1． 2 动物
清洁级 Wsitar 大鼠，体质量 180 ～ 200 g，雌、雄各半，健
康状况良好，为湖北省卫生防疫站动物中心提供，动物生产
许可证号:SCXK2003-0005;NIH 小鼠，体重 18 ～ 22 g，雌雄
各半，武汉生物制品研究所提供，动物生产许可证号:
SCXK2003-0003。
1． 3 仪器
721 分光光度计，上海第三分析仪器厂。
1． 4 对大鼠胆汁分泌的实验［3］
取大鼠 50只，随机分为 5 组。即生理盐水-阴性对照组;
溪黄草浸膏低、中、高剂量组(2，8，16 g·kg －1) ;阳性对照-利
胆醇组(0． 1 g·kg －1)。用乌拉坦腹腔注射麻醉(0． 01 g·
kg －1) ，仰位固定于手术板上，腹腔剪毛后沿腹白线打开腹腔
2 ～3 cm，沿十二指肠降部肠系膜找到白色透明具有韧性的胆
总管，在接近十二指肠开口处向肝脏方向剪一“v”字形小口，
将胆汁引流管插入胆总管，引出腹壁，结扎固定。术后 30 min
为恢复期，恢复期的胆汁流量为胆汁分泌的基础量。30 min
后从胃与十二指肠的接合处用注射给药，给药后每 30 min收
集胆汁 1次，连续 3次。3次收集的胆汁分别与给药前 30 min
收集的胆汁量进行比较，计算增加流量的百分率。
1． 5 碳廓清率实验［4］
取 NIH小鼠 50只，随机分为 5 组，每组 10 只，分别为溪
黄草浸膏低、中、高剂量组(3，9，27 g·kg －1) ;阳性对照药-联苯
双酯组(0． 2 g·kg －1)和正常对照组。灌胃给药，qd，连续 10
d。正常对照组给予等容量蒸馏水，其它组给予等容量不同浓
度的药液。于末次给药 30 min 后，尾静脉注射中华墨汁(用
生理盐水配制 1∶ 6) ，0． 1 ml /10 g，注射后 2 min和 8 min从眼
眶后静脉丛取血 40 μl，置 4 ml 0． 1% Na2CO3溶液中，在波长
580 nm下比色，测定吸光度(A)。根据吸光度计算吞噬指数。
1． 6 血清溶血素测定［4］
取 NIH小鼠 60只，随机分为 6组，每组 10只，分别为:为
正常对照组，阳性对照组-联苯双酯(0． 2 g·kg －1)、免疫组功
能损伤模型组-环磷酰胺(0． 02 g·kg －1)组，溪黄草浸膏低、
中、高剂量组(3，9，27 g·kg －1)。灌胃给药，qd，连续 10 d。空
白对照组给予等容量蒸馏水，其它组给等容量不同浓度的药
液。于给药第 5 天，小鼠腹腔注射稀释的羊红血细胞悬液(3
∶ 5 V /V SRBC)0． 2 ml进行免疫，免疫 5 d 后，小鼠眼眶取血
0． 5 ml，分离血清，血清用生理盐水稀释 600 倍。取稀释血清
3 ml，加入 2% SRBC 0． 5 ml，冰浴 2 min，再加入 1 ml 的补体
(生理盐水 1∶ 10 稀释的豚鼠血清) ，37℃水浴中反应 30 min，
冰浴 2 min终止反应，2 000 r·min －1离心 10 min 后取上清，
540 nm波长下测定吸光度(A)值。另取 2% SRBC 0． 25 ml，
加蒸馏水4． 25 ml，同法测 A值，作为 SRBC半数溶血管。计算
样品的半数溶血值(HC50)=样品 A值 /半数溶血时 A值 ×血
清稀释倍数。
1． 7 统计分析
采用美国 Origin软件包对动物实验数据统计分析，并以
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中国药师 2012 年第 15 卷第 4 期 China Pharmacist 2012，Vol． 15 No． 4
表 1 溪黄草浸膏对大鼠胆汁流量的影响(n =10)
组别
剂量
(g·kg －1)
胆汁基础
流量(ml)
30min 60min 90min
流量(ml) 增加率(%) 流量(ml) 增加率(%) 流量(ml) 增加率(%)
阴性对照组 － 0． 29 ±0． 12 0． 32 ±0． 12 10． 34 0． 30 ±0． 17 3． 84 0． 29 ±0． 13 0
利胆醇组 0． 1 0． 32 ±0． 13 0． 53 ±0． 22 65． 63 0． 53 ±0． 21 65． 63 0． 41 ±0． 21 28． 13
溪黄草组 2． 0 0． 32 ±0． 13 0． 39 ±0． 15 21． 88 0． 31 ±0． 08 0 0． 29 ±0． 09 0
8． 0 0． 28 ±0． 08 0． 44 ±0． 16 57． 14 0． 34 ±0． 09 21． 34 0． 28 ±0． 08 0
16． 0 0． 28 ±0． 10 0． 46 ±0． 10 64． 28 0． 39 ±0． 10 39． 28 0． 38 ±0． 28 35． 70
统计分析结果评价药物效果。
2 结果
2． 1 对大鼠胆汁分泌的影响
与正常对照组比较，溪黄草中、高剂量可明显增加胆汁流
量，以给药 30 min最为明显。
2． 2 对吞噬指数的影响
与对照组比较，溪黄草浸膏 3 个剂量对正常小鼠的吞噬
指数均有明显提高(P ＜0． 05或0． 01)。
表 2 溪黄草浸膏对小鼠吞噬指数的影响(n =10)
组别 剂量(g·kg －1) 吞噬指数(K ×10 －3)
正常对照组 － 4． 58 ±2． 50
联苯双酯组 0． 2 9． 67 ±4． 43b
溪黄草浸膏组 3． 0 9． 17 ±5． 57a
9． 0 14． 33 ±5． 10b
27． 0 13． 34 ±5． 72b
注:与对照组比较，aP ＜0． 05，bP ＜0． 01。
2． 3 半数溶血素测定结果
与对照组比较，溪黄草浸膏中、高剂量可明显提高半数溶
血素含量(P ＜0． 05或0． 01)。
表 3 溪黄草浸膏对小鼠半数溶血素值的影响(n =10)
组别 剂量(g·kg －1) 半数溶血素(HC50)
正常对照组 － 481． 98 ±219． 01
环磷酰胺组 0． 02 204． 40 ±42． 69b
联苯双酯组 0． 2 692． 80 ±186． 18a
溪黄草浸膏组 3． 0 552． 00 ±198． 92
9． 0 676． 00 ±180． 79a
27． 0 725． 20 ±110． 82b
注:与对照组比较，aP ＜0． 05，bP ＜0． 01。
3 讨论
溪黄草利胆，增强免疫的功效曾有文献报道:均为水提取
物，在剂量为10，20，40 g·kg －1时，能显著增加大鼠胆汁流量，
明显提高胆汁中胆固醇含量，对胆红素和胆汁酸含量无影
响［5］。剂量为 15，30，60 g·kg －1，连续给药 7 d，可激活小鼠
网状内皮系统，增加小鼠血清溶血素含量，提高淋巴细胞转化
程度［6］。本实验以水提取物浸膏，依据临床用药剂量，将实验
剂量做了降低调整，在剂量为 8、16 g·kg －1时，溪黄草对麻醉
大鼠的胆汁流量亦有明显增加，其增加率分别为57． 14%和
64． 28%。以 30 min促进胆汁分泌率功效最强。当剂量为 3，
9，27 g·kg －1，亦能极显著提高小鼠单核细胞吞噬功能，明显
增加血清溶血素含量。实验对溪黄草的有效剂量范围做了延
伸验证，同时为中成药中主要成分溪黄草的用药剂量提供实
验依据。
参 考 文 献
1 肖树雄，黄德嘉，林伟忠，等． 溪黄草研究进展［J］． 中草药，2000，
31(2) :951-952
2 谢兴亮，盛艳梅． 溪黄草的研究进展［J］． 医药导报，2011，3(4) :
494-496
3 卫生部药政管理局． 中药新药研究指南(药学、药理学、毒理学)
［S］． 1994． 140，151
4 陈奇． 中药药理研究方法学［M］． 北京:人民卫生出版社． 2006．
445-447，757-759，750-751
5 刘银华，梁利球，沈婕，等． 溪黄草与虎杖煎剂利胆作用的实验研究
［J］． 时珍国医国药，2009，20(7) :1626
6 谢春英． 溪黄草提取物对小鼠免疫功能的影响［J］． 中药材，
2008，3l(1) :116-117
(2011-09-01 收稿 2012-01-06修回)
通讯作者:孙振平 Tel:15953294180 E-mail:wangjyhs@163． com
注射用硫普罗宁钠细菌内毒素检查
孙振平 李昇刚 朱爱民 扆雪涛 (青岛市药品检验所 山东青岛 266071)
摘 要 目的:探讨细菌内毒素检查方法对注射用硫普罗宁钠进行检查的可行性。方法:根据《中国药典》2010 年版二部细菌
内毒素检查方法，采用凝胶法，通过灵敏度复核试验和干扰预试验，用标示灵敏度为0． 25 EU·ml －1的鲎试剂和浓度为0． 333 mg
·ml －1的注射用硫普罗宁钠进行干预试验和内毒素检查。结果:注射用硫普罗宁钠浓度为0． 333 mg·ml －1时对鲎试剂与细菌内
毒素的凝集反应无干扰作用。结论:注射用硫普罗宁钠可用细菌内毒素检查法进行检查。
关键词 注射用硫普罗宁钠;细菌内毒素检查法;干预试验;鲎试剂
中图分类号:R927． 12 文献标识码:B 文章编号:1008-049X(2012)04-0576-02
硫普罗宁钠与硫普罗宁相比，有更好的稳定性，而且使用 方便，逐渐得到推广;具有保护肝脏组织及细胞的作用，用于
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