全 文 ：基金项目:国家自然科学基金资助项目(39870900);香港创新科技署
粤港合作项目(GHP/022 /06)。
半边旗提取物 5F对不同类型 NSCLC细胞的
增殖抑制作用
吴科锋 1 ,刘　义 1 ,吕应年1 , GeorgeG.Chen2 ,梁念慈 3
(1广东天然药物研究与开发实验室 ,广东湛江 524023;2香港中文大学;3广东医学院)
　　摘要:目的　观察半边旗提取物 5F(Psl5F)对不同类型非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株的增殖抑制作用 ,并找出
对其敏感的细胞株类型 。方法　采用 MTT法观察不同浓度 Psl5F分别在作用 24、48、72 h时对不同类型的 NSCLC
细胞株(A549、SPCA-I、NCI-H460、PGCL3)生长增殖的影响。结果　不同浓度的 Psl5F对 4种肺癌细胞作用 24、48、
72 h后 ,所有 NSCLC细胞株生长增殖均受到不同程度的抑制 ,其中以对 NCI-H460肺癌细胞的杀伤作用最强(P<
0.01), 对 A549、SPCA-I、NCI-H460、PGCL3作用 72 h后的半数致死量(IC
50
)分别是 12.12、 10.74、3.91、 4.94 mg/L。
结论　Psl5F能有效抑制 NSCLC细胞株的体外增殖 ,且对大细胞肺癌 NCI-H460最为敏感。
关键词:半边旗提取物 5F;癌 , 非小细胞肺;半数致死量
中图分类号:R282.7;R734.2　　文献标志码:A　　文章编号:1002-266X(2009)52-0006-03
Inhibitionofproliferationby5FfromPterissemipinnataLindiferent
kindsofnon-smalcellungcancerlines
WUKe-feng1 , LIUYi, LVYing-nian, GeorgeG.CHEN, LIANGNian-ci
(1GuangdongKeyLabforResearchandDevelopmentofNaturalDrugs,
Zhanjiang524023, P.R.China)
Abstract:Objective　ToobservetheinhibitoryefectofPterissemipinnataL5F(Psl5F)onproliferationoffour
kindsofnonsmallcellungcancer(NSCLC)celllinesinvitro.Methods　AftertreatmentofNSCLCcellinesA549, SP-
CA-I, NCI-H460, PGCL3 withvariousconcentrationofPsl5Ffor24, 48, and72hours, theproliferationcapacityofcels
wasobservedbyusingMTTassay.Results　AftertreatedwithPsl5F, theproliferationoftheseNSCLCcellineswasin-
hibiteddiferently.TheIC50 for72 hourstreatmentofA549, SPCA-I, NCI-H460, PGCL3 was12.12, 10.74, 3.91, 4.94
mg/Lrespectively.Conclusion　Psl5FcaninhibittheproliferationofNSCLCcelseffectivelyanditshowsmostsensitive
tothelargecellungcancercellineNCI-H460.
Keywords:PterissemipinnataL5F;carcinoma, non-smal-celllung;lethaldose50
　　半边旗(Psl)属凤尾蕨科植物 ,广泛分布于南方
各省 ,民间常用于治疗蛇伤 、外伤出血 、菌痢 、肠炎 、
肝炎等 。本课题组在筛选抗肿瘤植物药时发现 , Psl
的乙醇及水提取物显示出良好的体内外抗肿瘤活
性 [ 1, 2] ,通过进一步分离纯化出的二萜类化合物 5F
(11α-羟基-15-氧-16-烯-对映贝壳杉烷 -19-酸 , Psl5F)
对多种癌细胞均有不同程度的杀伤作用 [ 3] ,其中包
括肺癌细胞 。 2007年 3月 ～ 2008年 1月我们观察
了 Psl5F对非小细胞肺癌(NSCLC)不同类型细胞
株的增殖抑制作用 , 旨在找出对其最为敏感的
NSCLC细胞株类型 ,为进一步临床开发提供实验
依据。
1　材料与方法
1.1　材料　A549、NCI-H460、SPCA-I、PGCL3细胞
系(实验室保存), Psl5F(纯度 95%)(实验室保存),
RPMI1640培养基(Gibco),小牛血清(杭州四季青
工程有限公司),酶标仪(Bio-rad), MTT(Sigma)。
1.2　MTT方法 　分别选取对数生长期的 A549、
NCI-H460、SPCA-I、PGCL3细胞 ,经胰酶消化 、台盼
蓝染色后在血细胞计数板上计数 , 确保活细胞在
97%以上 。调整细胞浓度以 3 000个 /孔 (90 μl/
孔)加到 96孔培养板中 ,将培养板放入 37 ℃、5%
CO2孵箱中培养。待细胞贴壁后取出培养板 ,加入
6
　山东医药 2009年第 49卷第 52期　
测试的药物 Psl5F。用药组加入 10 μl不同浓度
Psl5F,使其药物终浓度分别为 5、10、20、40、80 mg/
L,每个浓度设 4个平行孔 ,同时设空白对照组 、溶剂
对照组和调零孔 。培养板放回培养箱中分别继续培
养 24、48、72h后取出培养板 ,每孔加入 20 mlMTT
(5g/L)孵育 4h后吸出上清液 ,加入 150μlDMSO,
在平板摇床振摇 10 min使甲臜完全溶解。于酶标
仪上以测定波长为 570 nm、参考波长为 490 nm测
定其吸光度 A值 。实验重复 3次。计算细胞增殖
抑制率 ,细胞增殖抑制率(%)=(对照组 A值 -处
理组 A值)/对照组 A值 ×100%。
1.3　统计学方法 　实验数据以 x±s表示 , 采用
SPSS13.0统计软件包进行 OneWayAnova统计分
析。以 P≤0.05为有统计学差异 。
2　结果
2.1　Psl5F对 A549、NCI-H460、SPCA-I、PGCL3细
胞系增殖抑制的影响　不同浓度 Psl5F(5 ～ 80 mg/
L)分别作用于 A549、NCI-H460、SPCA-I、PGCL3细
胞后 24、48、72h,对细胞的抑制率均呈时间 —剂量
依赖性(P均 <0.05)。见图 1。
图 1　Psl5F对 A549、NCI-H460、SPCA-1、PGCL3细胞系增殖抑制的影响
2.2　Psl5F对 A549、NCI-H460、SPCA-I、PGCL3细
胞株半数致死量(IC50)的影响　作用 72h后 A549、
SPCA-I、NCI-H460、PGCL3的 IC50分别为 12.12、10.
74、3.91、4.94 mg/L。比较 4种细胞株的 IC50值发
现 , Psl5F对 NCI-H460的 3个时间点的 IC50值均小
于其他 3种细胞株 ,而对肺腺癌细胞株 A549的 IC50
值均高于其他 3种细胞株 ,可知 Psl5F对 NSCLC中
的大细胞肺癌 NCI-H460最为敏感 , 而对腺癌类型
的 A549敏感性较低 。见图 2。
图 2　Psl5F在不同时间点对 4种肺癌
　 细胞株 IC50值的影响
3　讨论
NSCLC的发病率在中国居高不下 ,尽管在治疗
方面已有许多有效的方法并取得了显著的效果 ,但
NSCLC仍然是高死亡率疾病 ,患者的 5 a生存率低
于 15%[ 4] 。因此 , 寻找能有效治疗 NSCLC、延长
NSCLC患者生存时间的药物十分必要。
目前已发现 Psl5F能有效杀伤多种癌细胞 ,其
抗肿瘤机制与抑制转录因子 NF-κB活性 、抑制 Bcl-
2和 Bcl-xL表达 、促进 iNOS表达有关。同时还发现
Psl5F下调 NF-κB及血管内皮生长因子(VEGF)表
达 , 从而抑制高转移卵巢癌细胞的侵袭转移能
力[ 5, 6] 。这与已知的 VEGF、NF-κB、Bcl-2、Bcl-xL和
Bax是 NSCLC治疗靶点等理论相吻合 [ 7, 8] 。本实验
用 Psl5F干预 NSCLC中最常见的两种肺腺癌类型
A549、SPCA-I及大细胞肺癌 NCI-H460、PGCL3, 结
果发现 Psl5F对这两种类型的肺癌细胞株都有抑制
其增殖的作用 ,但对于大细胞肺癌细胞株的杀伤作
用要大于对肺腺癌的杀伤作用 ,而对于转移型的大
细胞肺癌细胞株杀伤作用不及非转移型的大细胞肺
癌细胞株 。这提示 Psl5F可能对非转移型的大细胞
肺癌最为敏感 ,因此将 Psl5F开发成大细胞肺癌的
治疗用药有着广阔的前景 。但由于本实验的
NSCLC细胞株类型仍不够丰富 ,故需进一步实验以
对该结果进行验证 。
参考文献:
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7
　山东医药 2009年第 49卷第 52期　
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(收稿日期:2009-10-17)
·护理园地·
围生期健康教育路径对产妇分娩影响
的研究
盖筱莉 ,焦瑞霞 ,姚荣芬 ,康　琳 ,段红霞 ,
何秀影 ,田玉玲 ,尹　洁 ,王建敏
(河北医科大学第四医院 ,石家庄 050011)
　　为了提高产科护理质量 , 我院在临床护理实践中运用健
康教育理论制定了围生期健康教育路径 ,对孕产妇护理及产
妇分娩都产生了良好的效果。现报告如下。
临床资料:2008年 1～ 12月在我院住院分娩的产妇 200例 ,
随机分为对照组和实验组各 100例 ,年龄 23 ～ 32岁, 孕 37～ 41
周 ,均为单胎头位,无头盆不称 、妊娠合并症和并发症 ,均经医师
诊断可经阴道分娩。两组产妇年龄、孕周、孕产次、职业 、文化程
度 、骨盆外测量值等方面无统计学差异 ,具有可比性。
护理方法:对照组采取产科常规护理模式。实验组通过
对孕产妇观察 、会谈 、问卷等方式收集资料 ,了解孕妇的健康
状态 、对分娩的认识及医师对孕妇的健康建议等情况。 将得
到的资料进行分析 , 确定孕妇的健康教育需求 , 并应用健康
教育路径对孕产妇实施护理。健康教育路径的内容:入院
日:介绍环境 、病房内各种设施及疾病相关知识 ,发放健康教
育路径表 , 讲解路径表的有关内容和作用 , 进行心理疏导;产
前:讲解孕期保健知识 ,教会产妇自我护理及监测的方法 , 针
对产妇特定的生理及心理情况进行健康教育 、指导及情感支
持 , 使产妇了解分娩的全过程 , 增强自然分娩信心;产时:实
行 “一对一”的陪伴分娩制度 , 由助产士从规律宫缩开始陪
伴至产后 2 h送至爱婴区 ,运用分娩相关知识根据不同产程
提供针对性的指导 , 向产妇讲解分娩知识 、分娩过程的分期
及临床表现 、宫颈扩张及胎先露下降 、分娩过程中出现的不
适 、宫缩的产生及镇痛方法 ,示范应对不适的技巧 ,增强产妇
的自信心和自控感。让丈夫或家属陪伴分娩 ,鼓励丈夫参与
及配合 , 充分发挥支持系统的作用 , 以积极的心态迎接分娩。
同时密切观察产程进展情况并做好接产工作 ,若产程出现异
常或胎儿宫内窘迫需剖宫产 , 应向产妇讲解手术的必要性 ,
讲解麻醉和手术方式 、配合方法及术后注意事项等;产后:讲
解子宫收缩 、阴道出血情况及母乳喂养 、饮食 、活动 、心理护
理 ,指导产妇正确哺乳 ,教授婴儿含接姿势与技巧及乳房护
理 、保持泌乳 、手工挤奶 、新生儿沐浴及抚触的方法 , 让产妇
反复练习直至掌握;出院前 1 d:进行出院指导 ,介绍产褥期
护理及出院后饮食 、活动 、休息 , 介绍婴儿护理与预防接种 ,
进行产后随访 、健康检查和计划生育指导。健康教育路径的
实施:孕妇入院后由责任护士发放健康教育路径表 , 讲解路
径表的有关内容和作用。护理人员每日按照路径表内容进
行健康教育 ,及时对孕产妇进行评估 、教育 、评价 , 护士长随
时督促检查健康教育实施效果并给予指导。患者出院时将
健康教育路径表以健康教育处方的形式交给产妇 , 以保证健
康教育的连续性和完整性。
结果:实验组自然分娩 、阴道助产 、剖宫产各 93、 1、 6例 ,
对照组分别为 72、5、23例;实验组产后出血(167.9 ±56.7)
ml、总产程(8.98 ±3.25)h, 对照组分别为(289.4 ±127.6)
ml和(12.87±3.30)h;实验组 1 minApgar评分 8 ～ 10、4 ～
7、0 ～ 3分分别有 96、4、 0例 , 对照组分别为 80、16、 4例。上
述指标两组间比较差异均有统计学意义(P均 <0.01)。
讨论:分娩是一个正常 、自然 、健康的过程 , 产妇和胎儿
具有完成分娩的能力。分娩的进展和最终结局受 4种因素
的影响:产力 、产道 、胎儿及产妇的精神心理状态。顺利分娩
依赖这些因素之间的相互适应和协调 , 但由于分娩过程中存
在许多不测和不适 , 对产妇确实是一件持久而强烈的应激
源 ,使产妇产生一定的心理压力 , 影响其在分娩过程中的行
为 ,决定其对分娩方式的处理 , 从而对分娩结果产生影响。
分娩应激既可以是生理上的 , 也可以是精神心理上的。心理
应激可使机体产生一系列变化 , 焦虑使子宫收缩力减弱 、对
疼痛敏感性增加 ,强烈的宫缩痛又加重了产妇的不安 、焦虑 、
恐惧 ,从而造成恶性循环。导致产妇过度疲劳 、宫缩乏力 、产
程延长 ,造成难产及产后出血 ,同时产妇产生神经内分泌变
化 ,交感神经兴奋释放儿茶酚胺 ,导致血压升高 , 致使胎儿缺
氧 、窘迫。本研究显示 , 实施围生期健康教育路径 , 可以使产
妇的潜能得以超常发挥 , 对疼痛的耐受力提高 ,宫缩协调 ,从
而缩短产程 、减少出血 、降低新生儿窒息率和剖宫产率 , 确保
母婴健康 ,显著提高了产科护理质量。
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