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金毛狗脊化学成分与药理活性研究进展



全 文 :[收稿日期] 20100801(001)
[基金项目] 中国博士后科学基金项目(20090461042)
[第一作者] 杨慧洁,工程师,从事中药资源与中药生物技术研
究,Tel:0431-84533217,E-mail:yhuijie66 @ yahoo.
com. cn
[通讯作者] * 杨世海,博士,教授,博士生导师,从事中药资
源与中药生物技术研究,Tel:0431-84533087,E-
mial:jlyangs@ yahoo. com. cn
金毛狗脊化学成分与药理活性研究进展
杨慧洁1,吴琦2,3,杨世海3*
(1.吉林农业大学教育技术中心,长春 130118;2.北京大学药学院,北京 100083;
3.吉林农业大学中药材学院,长春 130118)
[摘要] 综述了金毛狗脊中挥发油、蕨素类、芳香族化合物、水溶性酚酸类化合物、黄酮类化合物、氨基酸、无机元素等化
学成分的研究结果,并介绍了金毛狗脊防治骨质疏松、止血、镇痛、抑菌、抗炎、抗风湿等药理活性,为我国金毛狗脊资源的开发
利用提供理论依据。
[关键词] 金毛狗脊;化学成分;药理活性
[中图分类号] R284. 1;R285. 5 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2010)15-0230-05
Advances in Research of Chemical Constituents and Pharmacological Activities
of Cibotium baromatz
YANG Hui-jie1,WU Qi2,3,YANG Shi-hai3*
(1. Center of Education Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;
2. School of Pharmaceutical Sciences,Peking University,Beijing 100083,China;
3. College of Chinese Medicinal Material,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China)
[Abstract] The research information on volatileoils,pterosins ,aromatic compounds,water-soluble phenolic
compounds,flavonoids,amino acids,inorganic elements in Cibotium barometz was summarized,and pharmacological
effects of osteoporosis treatment,stanch bleeding,easing pain,bacteriostasis,anti-inflammation,anti-rheumatism of
C. barometz was discribed. The information summarized here is intended to provide a rational foundation for the
futher development and utilization of C. barometz in China.
[Key words] Cibotium barometz;chemical constituents;pharmacological activities
金毛狗脊 Cibotium barometz(L.)J. Sm. 为蚌壳蕨科金毛
狗属植物。蚌壳蕨科植物共 5 属,近 40 种,分布于热带及亚
热带,其中金毛狗属约 20 种,分布于东南亚至大洋洲、夏威
夷及中美洲。中国仅产 1 属,1 种,即金毛狗脊 C. barometz,
为国家Ⅱ级保护植物[1]。
金毛狗脊英文名 lamb tratary,傣族名锅姑(guogu),别名
有:百枝、狗青、扶盖、扶筋、苟脊、金丝毛、金毛猴、金毛狗等。
西双版纳地区的傣族以金毛狗脊嫩叶作野菜食用,把根茎代
茶饮用。
金毛狗脊生于山脚阴湿缓坡或沟谷密林下阴湿的酸性
土上。分布于浙江、江西、福建、台湾、湖南、广西、四川、重
庆、贵州、云南等省区。云南主要在思茅、景洪、勐海、镇康、
屏边、金平、河口等地分布。
中药狗脊始载于《神农本草经》,列为中品,为蚌壳蕨科
植物金毛狗脊 C. barometz 的干燥根茎,历版《中国药典》均收
载其为常用中药狗脊,其味苦、甘,性温。具有补肝肾、强筋
骨、舒经络、除湿痛及利尿的功能,用于腰腿酸痛、手足麻木、
半身不遂、白带遗精、血崩等症,以及治疗骨瘤、骨肉瘤、颅内
肿瘤、骨髓瘤等多种肿瘤等[2]。狗脊毛茸外用治疗外伤出
血,为历代较常用中药,也是我国重要出口药材之一[3]。
作者对金毛狗脊的化学成分及药理活性的研究进行了
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综述,为深一步研究和开发利用金毛狗脊资源提供理论
参考。
1 化学成分
金毛狗脊的地上和根茎等部位的化学成分进行了研究,
发现金毛狗脊含有淀粉,鞣质,挥发油,蕨素类物质,水溶性
酚酸类化合物,糖及糖苷类化合物,还含有氨基酸,无机元素
等化学成分[4]。另外,通过理化性质测定,金毛狗脊含有强
心苷、蒽醌、三萜、内酯等类成分。研究证明,这些化合物也
有极强的药理活性。
1. 1 挥发油 贾天柱[5]等首次对中药狗脊进行挥发油的研
究,从狗脊中提取出了挥发油成分,质量分数为 83. 3 μg·
g - 1,同时用 GC-MS 法分析鉴定了挥发油中的 12 个组分。研
究证明狗脊挥发油的主要成分是高级脂肪酸,其中含量最高
的是棕榈酸和亚油酸。该研究同时比较了各种炮制品中挥
发油的含量和种类的变化,发现挥发油的含量在炮制后明显
降低。但其中含量最高的十六酸和十八碳二烯酸在炮制后
却明显增加,尤其是单蒸和酒蒸品。炮制后 1,3-苯间二氧杂
环戊烯和十五碳酸均未检出,异十六酸在单蒸和酒蒸品中亦
未能检出,在酒蒸品中却增加了异十八碳二烯酸和十八碳
酸。推测炮制后刺激性缓和可能与杂环等化合物的未检出
有关。
许重远[6]等采用超临界 CO2 流体萃取技术从中药狗脊
中提取其精油部分,经二级解析分离出精油Ⅰ和Ⅱ,并用
GC-MS 联用技术进行分离和鉴定。其中相对含量≥10% 的
化合物按由大到小排列,分别为油酸、亚油酸、棕榈酸、十五
碳酸、十六碳三烯酸甲酯、亚油酸甲酯。相对含量≥0. 1%计
数,从精油Ⅰ和Ⅱ中分离出 43 个化合物,鉴定了其中 25 个
化合物。其中 γ-松油烯、桧烯、胡椒酮、杜松二烯、十六碳烯
酸及其酯、十六碳三烯酸甲酯、4-松油醇、2-异丙基-5-甲基-3-
环己烯酮、杜松萜烯、邻苯二甲酸及其酯、二十四碳烯酸甲
酯、十八碳三烯醇共 12 个化合物为首次从该植物中分到。
1. 2 蕨素类 Takao M[7],Saito K[8],Logan K J[9]等学者从
狗脊地上部分分离得到多种蕨素类(pterosins)物质,金粉蕨
素(onitin)、金粉蕨素-2′-O-β-D-葡萄糖苷(onitin-2′-O-β-D-
glucoside)、金粉蕨素-2′-O-β-D-阿罗糖苷 (onitin-2′-O-β-D-
alloside)、蕨素 R(Pterosin R)、蕨素 Y(Pterosin Y)、异组织蕨
素 A (Isohistopterosin A)。张春玲[10]等在金毛狗脊根茎的氯
仿萃取物中分离得到金粉蕨素。吴琦等[11]从根茎乙醇提取
物中分离得到金粉蕨素和金粉蕨素-2′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷
(Onitin-2′-O-β-D-glucopyranoside)。吴琦等[12 ]从根茎乙醇
提取物中分 离 得 到 金 粉 蕨 素-15′-O-β-D-吡 喃 葡 萄 糖 苷
(Onitin-15-O-β-D-glucopyranoside)。
1. 3 芳香族化合物 Takao M[7],Saito K[8],Logan K J[9]等
从狗脊地上部分中分离到了绵马酚 (aspidinol)、香草醛
(vanillin)、丁香醛(syringetin)、对羟基苯甲酸(para hydroxy
benzoic acid)和香荚兰乙酮(apocynin);程启厚[13]等从金毛
狗脊根茎中分离得到了原儿茶酸(protocatechuic acid)、原儿
茶醛(protocatechuic aldehyde);吴琦等[11]从根茎乙醇提取物
的乙酸乙酯萃取物中分离得到(3R)-去-O-甲基茂狄波老素
(des-O-methyllasiodiplodin)、金毛狗脊苷(cibotibaromeside)
和原儿茶醛。
1. 4 水溶性酚酸类化合物 有学者从金毛狗脊根茎中分离
得到 了 原 儿 茶 酸 (protocatechuic acid)[10,13-14]、咖 啡 酸
(caffeine)[13-14]。
原忠等[15]采用双波长薄层扫描法,同时测定了狗脊和
黑狗脊中原儿茶酸和咖啡酸的含量。结果表明,狗脊和黑狗
脊中原儿茶酸的含量均高于 0. 020%,而且狗脊中咖啡酸的
含量略高于原儿茶酸的含量,但黑狗脊中咖啡酸含量较低。
此外,经炮制后的熟狗脊中酚酸类成分的含量高于生品。
1. 5 黄酮类化合物 许重远[16]等首次从金毛狗脊根茎中
分离得到了黄酮类成分山柰素(kaempferol)。
1. 6 皂苷类 吴琦等[12]从根茎乙醇提取物中分离得到金
毛狗脊皂苷(cibotinoside)。
1. 7 糖及糖苷类化合物 程启厚[12]等从金毛狗脊根茎中
分 离 得 到 正 丁 基-β-D-吡 喃 果 糖 苷 (n-butyl-β-D-
fructopyranoside)和葡萄糖、蔗糖。吴琦[11]除分离到以上 3
种糖和糖苷类化合物外,还分离得到麦芽糖。张春玲等[10]
在金毛狗脊根茎的氯仿萃取物中分离得到 5-羟甲基糠醛。
贾天柱等[17]用硫酸苯酚法测定了中药狗脊及其炮制品
中的糖的种类和含量,测得生品含量最高,盐炙含量最低,通
过加热处理,可使糖的结构改变,最终生成 5-羟甲基糠醛。
推论炮制后糖含量降低是合乎道理的,长时间加热蒸制可使
有些饮片变黑也与 5-羟甲基糠醛有关。
许重远等[18]采用苯酚-硫酸比色法测定不同产地狗脊及
狗脊炮炙品中多糖的含量,并对多糖进行高效毛细管电泳指
纹图谱分析,测得不同产地狗脊所含多糖的 HPLC 图谱基本
一致,从图谱中可看出,狗脊主要含两种多糖,其迁移时间分
别在 10. 45 min 和 10. 95 min 左右,平均相对含量分别为
32. 58%和 48. 08%。但经炮炙后的药材多糖成分和相对含
量有明显改变,以上 2 种多糖仍存在,但平均质量分数分别
为 23. 98%和 31. 25%。另外还有一些肩峰和小峰出现,其
中迁移时间在 13. 49 min 的 峰 较 大,平 均 相 对 含 量 为
6. 96%。不同产地的狗脊多糖含量高低相差较大,其中云南
狗脊多糖含量较高,而炮炙药材多糖含量较低,相差约 3 倍。
1. 8 氨基酸 贾天柱等[17]用氨基酸自动分析仪测定了中
药狗脊及其炮制品中得氨基酸的种类和含量,发现生品狗脊
中氨基酸含量最高,游离氨基酸的含量生品高于炮制品,而
水解氨基酸则是炮制品高于生品。
许重远等[19]采用氨基酸自动分析仪测定云南、广西、福
建 3 个产地的金毛狗脊和炮制药材中的氨基酸的种类、含量
及其组成,测得 3 个产地的金毛狗脊中均含 16 种氨基酸,其
中有 7 种人体必需氨基酸,9 种药用氨基酸和 6 种增香剂氨
基酸,分别占总氨基酸含量的 31. 20% ~ 32. 21%,53. 99% ~
59. 30%和 25. 19% ~ 33. 33%。金毛狗脊氨基酸组成相似,
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其中天冬氨酸、谷氨酸和脯氨酸含量较高(≥0. 24%),组氨
酸、赖氨酸和甲硫氨酸含量较低(≤0. 10%)。但 3 个产地氨
基酸总含量稍有差异,炮制药材氨基酸含量最高,为 2. 66%,
福建产金毛狗脊氨基酸含量最低,为 2. 08%。不同产地金毛
狗脊的必需、药用和增香氨基酸含量占总氨基酸含量的比例
基本相似,其中药用氨基酸含量最高,均在 50%以上。
1. 9 无机元素 许重远等[20]采用原子吸收分光光度计测
定了 K,Na 等 15 种无机元素含量。发现其中含有的 15 种无
机元素中 K 的含量最高,其次是 Mn。但要引起注意的是
As,Hg 含量虽然仍低于国家限定范围但均较高。炮制后药
材的 Cu 含量较高,而 As,Hg 的含量则有所下降。
图 1 金毛狗脊部分化合物结构
1. 10 其他化学成分 此外,从金毛狗脊中还分离得到 β-谷
甾醇、β-谷甾醇-3-O-(6′-正十六酰氧基)-3-β-D-葡萄糖苷、β-
谷甾醇-3-O-(6′-正 n 酰氧基)-β-D-葡萄糖苷、β-谷甾醇-β-D-
葡萄糖苷即胡萝卜苷、硬脂酸[14,16],鞣质、对羟基乙酰苯胺、
磷脂酰胆碱(PC)[15]等化合物。另外,通过理化性质测定,金
毛狗脊可能含有强心甙,蒽醌,淀粉,色素,三萜,内酯等类成
分[21]。吴琦[11]分 离得到 24-亚甲基环木菠萝烷醇 (24-
methylenecycloartanol)、(24R)-豆甾-4-烯-3-酮(stigmast-4-ene-
3-one)、β-谷甾醇、胡萝卜苷。Kim ST 等[22]从金毛狗脊中分
离到具有生物活性的 shinbarometin。白桐菲[23]等从金毛狗
脊炮制品中分离得到 β-谷甾醇、胡萝卜苷和 β-谷甾醇- 3-
O-(6′-正十六酰氧基)- β- D 葡萄糖苷,经比较甾体类化合
物在炮制前后含量几乎没有变化,表明炮制对其影响较小。
金毛狗脊部分化合物结构见图 1。
2 药理活性
2. 1 防治骨质疏松作用 马中书等[24]人的实验表明,狗脊
对去卵巢大鼠骨量丢失的防治作用似乎不甚明显,但也显示
出骨量增加的趋势,与去卵巢组相比,其四环素标记和 TOS
(骨小梁类骨质表面占骨小梁表面的百分比)均有增加的趋
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势,提示它可能有增加骨激活频率和刺激骨形成的作用。
2. 2 抑制血小板聚集作用 粉蕨素对血小板凝聚具有较强
的抑制作用,并对豚鼠回肠收缩有非常强的抑制作用,呈非
竞争性抑制 5-羟色胺的 D 受体和 M 受体[25]。比较研究狗
脊及其不同炮制品对凝血酶诱导的兔血小板聚集作用的影
响,表明狗脊及其炮制品抑制血小板聚集作用显著,抗血小
板聚集作用砂烫品 > 盐制品 > 酒蒸品 > 单蒸品 > 生品[26]。
抑制血小板聚集作用主要与水溶性成分有关,初步推断所含
原儿茶酸和 3,4-二羟基苯甲醛与此作用密切相关。
2. 3 止血作用 鞠成国等[27]的研究中狗脊和狗脊毛未见
有止血作用,相反,除低剂量生狗脊外,各样品液均显著延长
出血时间或凝血时间,说明狗脊、砂烫狗脊和狗脊毛内服具
有不同程度的活血作用,其中砂烫狗脊的活血作用最强,表
明狗脊具有活血作用。推测狗脊毛内服显示活血作用趋势,
可能是其成分中含有与狗脊相同或相似的活血成分。
经对犬、兔实验证明,毛茸对疤痕组织、肝脾损伤性出血
有止血作用,止血原理是物理作用,粉的止血效果更好[28]。
2. 4 镇痛作用 鞠成国等[24]用热板法和扭体法测定痛阈
值,结果表明,低剂量生狗脊、砂烫狗脊未表现显著镇痛作
用,高剂量生狗脊、砂烫狗脊具有显著镇痛作用,砂烫狗脊的
镇痛作用强于生狗脊。
2. 5 抑菌作用 体外实验证明,对流感病毒、肺炎双球菌有
抑制作用[29]。
2. 6 抗炎、抗风湿 有实验[30-32]证明,水溶性酚酸类成分原
儿茶酸和咖啡酸,具有抗炎、抗风湿的药理活性。
2. 7 保肝作用 金粉蕨素有保肝作用,治疗由他克林所致
人源性肝细胞 G2 期毒性的半数有效浓度为(85. 8 ± 9. 3)
μmol· L - 1[33]。
2. 8 抗氧化作用 金粉蕨素还具有清除过氧化物和自由基
的作用,其半数抑制浓度分别为(35. 3 ± 0. 2)和(35. 8 ±
0. 4)μmol·L - 1[33]。
2. 9 抗癌作用 国外报道[34]本属植物席氏狗脊 C. Schiedei
Cham. et Schl.叶的 70% 提取物,ip 接种艾氏腹水癌及肉瘤
S180腹水型的小鼠能延长其存活天数,ip 此提取物 8g·kg
- 1
小鼠能显著地抑制以3 H 标记的前体进入肉瘤 S180细胞;在体
外,加入相当于叶提取物 8 g·L - 1时,亦能抑制3 H 标记的去
氧胞核嘧啶进入癌细胞,抑制率达 98%。
研究证明,金粉蕨素、金粉蕨素-15-O-β-D-葡萄糖苷和金
毛狗脊苷是以金粉蕨素为同一母核的一系列化合物。应用
Caco-2 单层细胞模型研究了上述化合物的肠吸收特性。在
双向转运实验中,金粉蕨素双向 P app值在 10
- 5数量级。说明
该化合物属于吸收良好的化合物。结合时间-吸收和浓度-吸
收实验,推测它的吸收机制是以透细胞被动转运途径为主。
金粉蕨素-15-O-β-D-葡萄糖苷和金毛狗脊苷 2 个化合物的双
向 P app值在 10
- 7数量级,属于吸收不良的化合物,其吸收机
制可能为穿细胞间连接的被动转运途径[12]。
3 结语
中药狗脊始载于《神农本草经》,列为中品。具有补肝
肾、强筋骨、舒经络、除湿痛及利尿的功能,用于腰腿酸痛、手
足麻木、半身不遂、白带遗精、血崩等症,以及治疗骨瘤、骨肉
瘤、颅内肿瘤、骨髓瘤等多种肿瘤等。西双版纳地区的傣族
以金毛狗脊嫩叶作野菜食用,把根茎代茶饮用。迄今为止,
关于其含化学所成分及药理活性的研究报道不够深入,而其
又具有良好的药用和食用两方面的价值,因此,有必要对金
毛狗脊的化学成分进行较系统的研究,以便阐明其所含的主
要化学成分及药理活性的化学物质基础,为把金毛狗脊开发
成药食两用的中药资源提供科学依据。
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[责任编辑 邹晓翠]
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