全 文 ：收稿日期:2007-01-31;　修订日期:2007-04-20
基金项目:山东省中医管理局计划项目〔No.[ 2003] 29, No.132〕
作者简介:李大伟(1981-),男(汉族),山东泰安人 , 现为泰山医学院在读
硕士研究生 ,主要从事神经病学临床与基础研究 ,糖尿病治疗药物研究
工作.
＊通讯作者简介:夏作理(1944-),男(汉族),山东青岛人, 现任泰山医学院
教授 ,博士生导师 ,主要从事中国传统中草药的临床药理应用研究工作.
白花丹参叶水提物对糖尿病大鼠
脑组织损伤的影响
李大伟 1 , 张　玲1 , 赵晓民 1 , 王欣农1 , 夏　青 2 , 夏作理1＊
(1.泰山医学院生命科学研究所脑微循环重点实验室 ,山东 泰安　271000;
　2.北京大学药学部 ,北京　100083)
摘要:目的 研究白花丹参叶水提物对糖尿病大鼠脑组织损伤的影响。方法 高脂饲料诱导后尾静脉注射链脲佐菌素
(streptozotocin, STZ)建立 Wistar大鼠糖尿病模型。给药治疗后测定脑组织内超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,
SOD)的活性及丙二醛(malondialdehyde, MDA)、一氧化氮(nitricoxide, NO)的含量。结果 白花丹参叶制剂能明显降低糖
尿病大鼠血糖 , 同时大鼠体重稳定增加。模型组大鼠脑内 SOD活性显著降低 , MDA, NO含量明显升高;白花丹参叶水提
物治疗后大鼠脑内SOD活性明显增高 , MDA, NO含量显著下降。结论 白花丹参叶水提物能增加糖尿病大鼠脑内抗氧化
酶活性 ,抑制脂质过氧化反应 , 调节 NO生成 , 减轻过氧化损伤起到脑保护作用。
关键词:白花丹参;　水提物;　糖尿病
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)11-2632-02
EffectsoftheLeafAqueousExtractinSalviamiltiorrhizaBungevar.alhaC.Y.WuetH.
W.Li, mss.onBrainImpairmentinDiabeticRats
LIDa-wei1 , ZHANGLing1 , ZHAOXiao-min1 , WANGXin-nong1 , XIAQing2 , XIAZuo-li1＊
(1.InstituteofCerebralMicrocirculation, TaishanMedicalUniversity, Taian, Shandong271000, China;
2.SchoolofPharmacy, BeijingUniversity, Beijing100083, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheefectsofleafaqueousextractinSalviamiltiorrhizaBungevar.alhaC.Y.wuetH.W.Li, mss.
onbrainimpairmentindiabeticrats.MethodsThediabeticmodelwasthroughahighfatforageandSTZintravenousinjectionin
wistarrats.ThecontentsofSOD, MDA, NOinbrainafterdrugtreatmentweredetermined.ResultsTheactivityofSODdecreased
significantlyandthecontentsofMDAandNOincreasedgreatlyinthemodelgroups.Theresultswerereversedaftertreatmentby
aqueousextractofSalviamiltiorrhizaBungevar.alhaC.Y.WuetH.W.Li, mss.leaf.andthebloodglucosedecreasedandbody
weightincreasedaftermedication.ConclusionTheaqueousextractofSalviamiltiorrhizaBungevar.alhaC.Y.WuetH.W.Li,
mss.leafcanprotectthediabeticbrainbyincreasingtheactivityofantioxidase, inhibitingtheperoxidationandregulatingtheNO
productionofbrain.
Keywords:SalviamiltiorrhizaBungevar.alhaC.Y.WuetH.W.Li., mss.;　Aqueousextract;　Diabetesmelitus
　　糖尿病(diabetesmelitus, DM)是由遗传和环境因素共同作
用而引起的一组以糖代谢紊乱为主要表现的临床综合征。近年
来 , 丹参制剂在临床糖尿病治疗中具有显著疗效而受到广泛关
注。泰山白花丹参 SalviamiltiorrhizaBge.f.alba.C.Y.Wu.etH.
W.Li是丹参的变种 ,为山东特有珍稀濒危药用植物 , 主要产于泰
山 , 有研究表明白花丹参茎 、叶中也含有大量的微量元素及化学
成分 [ 1] 。脂质过氧化作用 、自由基和 NO生成增加在糖尿病及
其脑组织损伤的发生发展中起到重要作用 ,而丹参水溶性成分具
有很强的抗脂质过氧化和自由基清除作用 [ 2] 。本实验通过观察
白花丹参叶水提物治疗后糖尿病大鼠血糖体重等一般状况以及
脑内 SOD的活性及 MDA, NO的含量变化 , 探讨其对糖尿病大鼠
脑损伤的影响。
1　器材与方法
1.1　仪器与试剂 冷冻干燥机(FD-190北京博医康技术公
司), 755B紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司), Sig-
ma(3K30)高速冷冻离心机 , 血糖仪(罗氏诊断公司 优越血糖
仪),电子天平 , STZ(Sigma015K1279),盐酸二甲双胍(北京市京
丰制药有限公司), 胆固醇(上海伯奥生物科技有限公司), 丙基
硫氧嘧啶(上海复星朝晖药业有限公司), SOD, MDA, NO,双缩脲
检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.2　动物及分组 清洁级成年健康雄性 Wistar大鼠(山东鲁抗
医药公司实验动物中心提供 , 质量合格证:SCXK鲁 20050017
号)70只 ,体重 210 ～ 220 g,分笼饲养 , 标准饲料 , 自由饮水。动
物房适应 1周后 , 随机分为正常对照组和模型组 , 模型组 60只大
鼠喂饲高脂饲料 ,高脂饲料配方:1%胆固醇 , 10%猪油 , 0.2%丙
基硫氧嘧啶 , 89%基础饲料 [ 3] 。由山东泰安米歇尔生物制品研
究所提供。 4周后 , 大鼠尾静脉注射 pH 4.2柠檬酸 -柠檬酸钠
缓冲液溶解的 STZ(40 mg/kg· bw), 72 h后检测随机血糖 >13
mmol/L, 即确定为糖尿病大鼠。经检测确立模型成立大鼠 53
只 ,将其中 50只大鼠随机分为模型对照组 、阳性对照组 、白花丹
参治疗低 、中 、高剂量组 ,每组各 10只大鼠。
1.3　白花丹参叶水提物的制备及给药 白花丹参由山东莱芜苗
山中药产业化科技示范基地提供 ,白花丹参叶晾干粉碎 ,过 30目
的网眼筛 ,将 10 g白花丹参叶粉末在 100℃水中浸泡 5 min然后
过滤 ,所得滤液进行冷冻干燥 , 冻干粉置于干燥器中避光 4℃保
存待用 [ 4]。白花丹参叶水提物冻干粉制备成浓度为 0.16, 0.32,
0.53 g/ml的双蒸水溶液 ,每天新配制后以 1ml/100 gbw的量给
大鼠灌胃 ,对照组给予等量的容剂灌胃 [ 5] 。盐酸二甲双胍双蒸
水溶解按照浓度为 0.83 mmol/kg[ 6]灌胃给药。各治疗组大鼠连
续给药 4周。
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.11　
1.4　指标检测及方法 实验过程中检测大鼠血糖及体重 ,给药 4
周后 ,心脏灌注冰 PBS将血液冲净后迅速在冰盘上断头取脑 , 滤
纸吸干水分 , 精确称重后与冰 PBS混合制备成 10%匀浆 , 按照试
剂盒要求紫外分光光度计检测各项指标。双缩脲法检测脑组织
蛋白含量 ,硝酸还原酶法检测 NO, TBA法检测 MDA, 黄嘌呤氧化
酶法检测脑组织总 SOD。
1.5　统计方法 实验数据以 x±s表示 , 采用 SPSS12.0软件包进
行统计学分析 , Levene方差齐性检验各组方差齐性(P>0.05),
应用单因素方差分析 , t检验进行均数两两比较。检验标准 α=
0.05(阳性对照组大鼠实验过程中死亡 2只 , 将其数据舍弃不
用)。
2　结果
2.1　实验过程中各组大鼠体重 、血糖的变化情况 见表 1 ～ 2。
与正常对照组相比较 ,模型组大鼠血糖显著升高(P<0.01)。 丹
参治疗组 (DS)与模型对照组(MC)相比体重显著增加(P<
0.01), 阳性对照药二甲双胍组(MET)体重与模型对照组没有显
著性差异。各治疗组均能显著降低血糖 , 丹参高剂量组(DS-
H)、二甲双胍组与模型组相比均有显著性差异(P<0.01)。 白
花丹参叶制剂能明显降低糖尿病大鼠血糖 , 同时大鼠体重稳定
增加 。
表 1　实验过程中体重变化情况( x±s)
组别 n 0周 2周 4周
NC　 10 229.30±11.15 274.90±11.88** 333.40±15.32**
MC　 10 225.70±8.87 216.80±8.15△△ 191.20±9.48△△
MET　 8 226.25±6.69 223.88±7.36△△ 197.63±5.83△△
DS-L 10 228.10±8.08 238.60±7.60**△△ 240.30±7.88*△△
DS-M 10 227.20±8.63 238.00±7.73**△△ 248.20±8.22**△△
DS-H 10 228.40±8.63 243.00±8.82**△△ 255.70±7.32**△△
　　与模型组(MC)相比较 ,差异有显著性*P<0.05, **P<0.01, α=0.05;与正
常对照组(NC)相比 ,差异有显著性 , △△P<0.01, α=0.05
表 2　实验过程中血糖变化情况( x±s)mmol· L-1
组别 n 0周 2周 4周
NC　 10 4.370 ±0.706** 4.560 ±0.804** 4.46 ±0.58**
MC　 10 29.230±2.496△△ 29.680±2.245△△ 30.22±1.52△△
MET　 8 30.562±2.026△△ 13.138±1.187△△** 9.75 ±1.19△△**
DS-L 10 29.250±2.344△△ 27.640±2.284△△* 25.68±2.25△△**
DS-M 10 30.310±1.562△△ 26.850±1.604△△* 23.19±1.54△△**DS-H 10 30.730±1.619△△ 21.940±2.104△△** 15.97±1.53△△**
　　与模型组(MC)相比较 ,差异有显著性*P<0.05, **P<0.01, α=0.05;与正
常对照组(NC)相比 ,差异有显著性 , △△P<0.01, α=0.05
2.2　实验过程中各组大鼠脑组织内 SOD活性及 MDA, NO的含
量 见表 3。与正常对照组(NC)相比 , 各模型组大鼠脑组织内
SOD活性显著降低(P<0.01), MDA、NO的含量则明显升高(P
<0.01 ～ 0.05)。与模型对照组(MC)相比 , 阳性对照二甲双胍
组(MET)、丹参叶水提物各浓度组 (DS)SOD活性显著增高 ,
MDA、NO的含量则明显降低(P<0.01 ～ 0.05)。 由此可见白花
丹参叶水提物可以增加机体抗氧化酶的活性 ,减轻脂质过氧化及
减少 NO产生。
3　讨论
糖尿病对中枢神经系统的损害表现为增加中风的危险性并
加重其损害 ,加重脑缺血缺氧所致的脑血管损害及神经元坏死
等 [ 7] 。糖尿病时由于糖代谢紊乱导致机体葡萄糖自身氧化 , 蛋
白非酶糖化 ,代谢应激等使机体产生大量活性氧 [ 8] ,氧自由基通
过生物膜中不饱和脂肪酸过氧化 ,脂质过氧化物及其分解产物引
起细胞损伤。正常时机体内抗氧化酶可以清除过剩的氧自由基 ,
抑制脂质过氧化反应对机体起到保护作用。糖尿病时机体抗氧
化酶发生糖化或氧化 , 导致机体抗氧化酶如 SOD活性下降。 而
反映氧化应激水平的物质如脂质过氧化终末产物 MDA含量则
明显升高 [ 9] 。NO可作为自由基而损伤神经元 , NO与超氧阴离
子自由基(O-
2
· )形成过氧化亚硝基阴离子(ONOO-)是其主要
毒性作用途径 [ 10] 。通过实验观察发现 , 白花丹参叶水提物治疗
组大鼠与模型对照组大鼠相比脑组织内 SOD活性明显增高 ,
MDA, NO的含量则明显降低。提示白花丹参叶水提物能增加糖
尿病大鼠脑内抗氧化酶活性 , 抑制脂质过氧化反应 , 减少 NO生
成 ,从而减轻糖尿病脑组织过氧化损伤起到保护脑组织的作用。
表 3　大鼠脑组织中 SOD, MDA, NO含量( x±s)
组别 n SOD/u· (mgprot)-1
MDA
/nmol· (mgprot)-1
NO
/μmol· L-1
NC　 10 152.861±4.656** 4.605±0.910** 13.610±3.051**MC　 10 121.489±3.314△△ 10.161±0.759△△ 38.180±5.672△△MET　 8 130.363±7.130△△* 9.686±0.946△△ 28.625±6.210△△**DS-L 10 132.907±4.962△△** 8.312±0.708△△** 27.570±5.506△△**
DS-M 10 138.366±5.421△△** 7.936±0.823△△** 22.700±4.648△△**DS-H 10 143.186±4.773△△** 7.298±0.873△△** 20.850±4.664△**
　　与正常对照组(NC)相比 ,差异有显著性 , △P<0.05 , △△P<0.01 α=0.05与
模型组(MC)相比较 ,差异有显著性*P<0.05, **P<0.01α=0.05
糖尿病及代谢综合征日益威胁着人们的健康和生活质量 , 已
有研究表明泰山白花丹参利于血脂和血糖的正常稳定。本实验
提示白花丹参叶水提物具有减轻糖尿病脑损伤的作用 , 为将白花
丹参这种宝贵的中药材应用于临床糖尿病治疗 ,为人类健康造福
提供了实验依据。白花丹参叶水提物产生该药理作用的具体有
效成分及含量有待进一步研究。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.11 时珍国医国药 2007年第 18卷第 11期