全 文 ：［成分分析］
圆盖阴石蕨的化学成分研究
王 锋， 池翠云， 何翠红， 邵加春， 岑颖洲*
(暨南大学化学系，广东 广州 510632)
收稿日期:2010-07-20
基金项目:国家自然基金项目(20472024，20772047)
作者简介:王 锋(1986 －)，女(土家族)，硕士生，主要从事瑶族植物药有效成分的研究。E-mail:fengfeng__wang@ 163. com
* 通信作者:岑颖洲(1951 －)，男，教授，研究方向为天然产物化学。Tel:(020)85223420，E-mail:ofx@ jnu. edu. cn
摘要:目的 为进一步开发研究瑶族植物药，对圆盖阴石蕨(Humata tyermanni Moore)的化学成分进行研究。方法 圆盖
阴石蕨经乙醇提取再经石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取物用硅胶色谱柱，Sephadex LH-20 色谱柱再进行分离纯化，
通过1H-NMR、13C-NMR、MS、IR等方法鉴定化合物的结构。结果 分离鉴定了 9 个化合物分别为 hop-22(29)-ene(1)，
stigmast-4-ene-3，6-dione(2)，β-谷甾醇(3)，adiantone(4)，friedelin(5)，cyclobalanone(6)，对羟基苯甲酸(7)，2-羟基-4-甲
氧基-3，6-二甲基苯甲酸(8)，原儿茶酸(9)。结论 除化合物 5 外，其余尚未见从该植物中分离得到的相关文献报道;除
化合物 1 和 5 外，其余尚未见从该属植物中分离得到的相关文献报道。
关键词:圆盖阴石蕨;化学成分;结构鉴定
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2011)04-0645-04
Chemical constituents from Humata tyermanni Moore
WANG Feng， CHI Cui-yun， HE Cui-hong， SHAO Jia-chun， CEN Ying-zhou*
(Chemistry Department of Jinan University，Guangzhou 510632，China)
ABSTRACT:AIM To investigate chemical constituents of Humata tyermanni Moore from the Yao nationality.
METHODS Humata tyermanni Moore was extracted by ethanol，then by petroleum eter，ethyl acetate，and n-bu-
tanol，obtained extracts were isolated and purified by silica column and Sephadex LH-20 column chromatography.
Their structures were identified by means of 1H-NMR，13C-NMR，MS and IR respectively，in some cases by direct
comparison with authentic samples. RESULTS Nine compounds were identified as hop-22(29)-ene(1)，stig-
mast-4-ene-3，6-dione(2)，β-sitosterol(3)，adiantone(4)，friedelin(5)，cyclobalanone(6)，p-hydroxybenzoic
acid (7)，2-hydroxy-4-methoxy-3，6-dimethyl benzoic(8)，protocatechuic acid (9). CONCLUSION Except
compound 5，the other compounds were obtained from this plant for the first time. Furthermore，compounds were
isolated from this genus for the first time except compounds 1 and 5.
KEY WORDS:Humata tyermanni Moore;chemical constituents;structural indentification
圆盖阴石蕨 Humata tyermanni Moore 为骨碎补
科 Davalliaceae阴石蕨属 Humata植物，别名白毛蛇。
通常以根状茎入药。主要分布于我国华东、华南和
西南等地，越南也有分布。主治风湿痹痛、湿热黄
疸、咳嗽、哮喘、肺痈、乳痈、牙龈肿痛、白喉、淋病、带
下、蛇伤［1］。“治风湿性关节酸痛或腰背风湿痛:阴
石蕨干全草四两，浸酒一斤，频服”《泉州本草》。除
此之外，圆盖阴石蕨(旁涯别)更是一种常见的瑶族
植物药，瑶民用它来配药治疗肺痈，风湿，横痃。
目前，国内外对圆盖阴石蕨化学成分的研究较
少，叶筱琴等人报道了从该植物中分离得到 6 个化
合物［2］。为了进一步研究和发掘该植物的药用价
值，本实验继续分离并从中得到 9 个化合物。除化
合物 1 和 5 外，其余化合物均尚未见从该属植物中
分离得。
1 仪器与试药
546
2011 年 4 月
第 33 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2011
Vol. 33 No. 4
X-6 型显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限公
司);DSQ 型 EI-MS 质谱仪(美国 Thermo 公司);
Bruker AVANCE 400 型超导核磁共振谱仪(瑞士
Bruker公司);Nicolet 6700 傅立叶变换红外光谱仪
(Thermo 公司);层析用硅胶(青岛海洋化工厂);
Sephadex LH-20(瑞士 Fluka公司);其它所用试剂均
为分析纯。
药材于 2009 年 4 月购于广州市清平东百草药
店，产地为广东和广西。由麦振球高级工程师鉴定，
样品标本保存于暨南大学化学系天然药物研究室。
2 提取与分离
圆盖阴石蕨 36 kg，95%的食用酒精室温浸泡 2
次，浸泡液减压浓缩得总浸膏 580 g，蒸馏水稀释溶
解后分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压浓
缩后得石油醚层 128 g，乙酸乙酯层 85 g，正丁醇层
76 g。其中石油醚层硅胶色谱柱分离，用石油醚-丙
酮梯度洗脱，每流份 500 mL，合并成 16 个组分(Fr.
1 ～ Fr. 16)，其中 Fr. 1 经氯仿-无水乙醇重结晶得化
合物 1(150 mg);Fr. 3 经氯仿-乙醇重结晶得化合物
6(22 mg);Fr. 4 经硅胶色谱柱石油醚洗脱得化合物
4(28 mg)、化合物 5(55 mg);Fr. 5 经硅胶色谱柱石
油醚 /乙酸乙酯(9. 5 /0. 5)洗脱，得化合物 2(35
mg);Fr. 6 经反复重结晶，得化合物 3(280 mg);Fr.
6 经硅胶柱石油醚 /乙酸乙酯(5 /0. 1)洗脱，得化合
物 8(31 mg)。乙酸乙酯层硅胶柱色谱分离，用石油
醚-乙酸乙酯梯度洗脱，每流份 500 mL，合并成 10 个
组分(Fr. 1′ ～ Fr. 10′)，其中 Fr. 4′经硅胶柱色谱三
氯甲烷-甲醇(5 ∶ 0. 1)洗脱，组分 22 ～ 27 合并后重
结晶得化合物 7(50 mg);Fr. 5′经硅胶柱色谱三氯
甲烷-甲醇(5 ∶ 0. 1)洗脱，组分 32 ～ 50 合并后经
Sephadex LH-20 色谱柱纯化得化合物 9(700 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 无色针状晶体(三氯甲烷-乙醇)，mp
194 ～ 196° C。分子式 C30 H50。EI-MS m/z 410
［M］+。1H-NMR (CDCl3，400 MHz)δ:4. 78(2H，s，
H-29)，2. 68(1H，m，H-21)，1. 75(3H，s，H-30)，
0. 96(3H，s，H-26)，0. 94(3H，s，H-27)，0. 84(3H，s，
H-23)，0. 82(3H，s，H-25)，0. 79(3H，s，H-24)，0. 72
(3H，s，H-28)。13 C-NMR 数据见表 1。以上数据推
测并与文献［3］对照，鉴定化合物 1 为 hop-22(29)-
ene。
化合物 2 浅绿色块状晶体(三氯甲烷-乙醇)，
mp 162 ～ 164°C。分子式 C29H46O2。EI-MS m/z 426
［M］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:6. 17(1H，s，
H-4)，1. 16(3H，s，H-19)，0. 94(3H，d，J = 5. 2 Hz，
H-21)，0. 85(3H，t，J = 7. 0 Hz，H-29)，0. 83(3H，d，J
= 6. 5 Hz，H-27)，0. 81(3H，d，J = 6. 5 Hz，H-26)，
0. 72(3H，s，H-18)。13 C-NMR 数据见表 1。以上数
据推测并与文献［4］对照，鉴定化合物 2 为 stigmast-
4-ene-3，6-dione。
表 1 化合物 1、2、4、5、6 的13C-NMR数据
(400 MHz，CDCl3，δ)
Tab. 1 13C-NMR date of compouds 1，2，4，5 and
6(400 MHz，CDCl3，δ)
化合物 1 化合物 2 化合物 4 化合物 5 化合物 6
C-1 40. 3 35. 5 40. 4 22. 3 33. 4
C-2 18. 7 33. 9 18. 7 41. 5 37. 4
C-3 42. 1 199. 5 42. 1 213. 1 216. 5
C-4 33. 3 125. 4 33. 2 58. 3 50. 2
C-5 56. 1 161. 1 56. 2 42. 2 48. 4
C-6 18. 7 202. 3 18. 7 41. 3 21. 5
C-7 33. 2 46. 8 33. 3 18. 3 28. 1
C-8 41. 9 34. 2 41. 9 53. 1 47. 8
C-9 50. 4 51. 0 50. 4 37. 5 21. 1
C-10 37. 4 39. 8 37. 4 59. 5 26. 0
C-11 20. 9 20. 9 20. 9 35. 7 25. 8
C-12 24. 0 39. 1 21. 6 30. 5 35. 5
C-13 49. 5 42. 5 48. 2 39. 7 45. 3
C-14 42. 0 56. 6 42. 0 38. 3 48. 7
C-15 33. 6 23. 9 32. 4 32. 5 32. 7
C-16 21. 7 28. 0 24. 1 36. 0 26. 7
C-17 54. 9 55. 9 54. 2 30. 0 52. 2
C-18 44. 8 11. 9 45. 0 42. 8 18. 0
C-19 41. 9 17. 5 40. 1 35. 4 29. 5
C-20 27. 4 36. 0 25. 5 28. 2 36. 6
C-21 46. 5 18. 7 53. 8 32. 8 18. 4
C-22 148. 7 33. 8 212. 6 39. 9 30. 7
C-23 33. 4 26. 1 33. 4 6. 8 37. 3
C-24 21. 6 45. 8 21. 6 14. 7 38. 7
C-25 15. 8 29. 2 15. 9 17. 9 152. 4
C-26 16. 7 19. 0 16. 7 20. 3 109. 3
C-27 16. 8 19. 8 16. 7 18. 7 19. 4
C-28 16. 1 23. 1 15. 0 32. 1 22. 2
C-29 110. 1 12. 0 30. 2 35. 0 20. 7
C-30 25. 0 — — 31. 8 19. 3
C-31 — — — — 27. 2
C-32 — — — — 27. 5
化合物 3 白色针状晶体(石油醚)，mp141 ～
143°C。将该化合物与 β-谷甾醇的标准品对照，薄
层色谱行为一致，与标准品混合后熔点不下降，鉴定
该化合物为 β-谷甾醇。
化合物 4 无色片状晶体(三氯甲烷-乙醇)，mp
228 ～ 230° C。分子式 C29 H48 O。EI-MS m/z 412
［M］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:2. 14(3H，s，
MeCO-)，0. 97(3H，s，H-27)，0. 95(3H，s，H-26)，
646
2011 年 4 月
第 33 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2011
Vol. 33 No. 4
0. 85(3H，s，H-23)，0. 82(3H，s，H-25)，0. 80(3H，s，
H-24)，0. 69(3H，s，H-28)。13 C-NMR 数据见表 1。
以上数据推测并与参考文献［5］对照，鉴定化合物 4
为 adiantone。
化合物 5 无色针状晶体(三氯甲烷-乙醇)，mp
247 ～ 248° C。分子式 C30 H50 O。EI-MS m/z 426
［M］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:1. 17 (3H，
s，H-28)，1. 04 (3H，s，H-27)，1. 00(3H，s，H-
26)，0. 99(3H，s，H-30)，0. 95(3H，s，H-29)，0. 88
(3H，d，J = 6. 2 Hz，H-23)，0. 86(3H，s，H-25)，
0. 72(3H，s，H-24)。13 C-NMR 数据见表 1。以上
数据推测并与文献［6］对照，鉴定化合物 5 为 friede-
lin(木栓酮)。
化合物 6 无色片状晶体(三氯甲烷-乙醇)，
mp180 ～ 182°C。分子式 C32 H52 O。EI-MS m/z 452
［M］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:4. 72(1H，t，
J = 1. 6 Hz，H-26)，4. 66(1H，d，J = 1. 6 Hz，H-
26)，1. 69(3H，s，H-25)，1. 10(3H，s，H-29)，1. 05
(3H，s，H-31)，1. 02(3H，s，H-32)，1. 01(3H，s，
H-18)，0. 99(3H，s，H-28)，0. 90(3H，s，H-30)，
0. 87(3H，d，J = 6. 4 Hz，H-21)，0. 80(1H，d，J =
4. 0 Hz，H-19α)，0. 57(1H，d，J = 4. 4 Hz，H-
19β)。13C-NMR数据见表 1。以上数据推测并与文
献［7］对照，鉴定化合物 6 为 cyclobalanone。
化合物 7 浅褐色块状晶体(石油醚-乙酸乙
酯)，mp 208 ～ 210° C。分子式为 C7H6O3。EI-MS
m/z 138［M］+。IR(KBr)cm －1:3 392(-OH)，1 679
(-COOH)，1 608，1 595，1 509(苯环)。 1H-NMR
(DMSO-d6，400 MHz)δ:7. 80(2H，d，J = 8. 7 Hz)，
6. 83(2H，d，J = 8. 7 Hz)。以上数据结合推测并与
文献［8］对照，鉴定化合物 7 为对羟基苯甲酸。
化合物 8 浅绿色针状晶体(石油醚-三氯甲
烷)，mp 147 ～ 149°C。分子式 C10H12O4。EI-MS m/z
196［M］+。1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:12. 03
(1H，s，-COOH)，6. 20(1H，s，H-5)，3. 92(3H，s，
4-OCH3)，2. 45(3H，s，6-CH3)，2. 10(3H，s，3-
CH3)。
13C-NMR(CDCl3，400 MHz)δ:105. 2(C-1)，
158. 1(C-2)，108. 6(C-3)，163. 1(C-4)，110. 6(C-
5)，140. 2(C-6)，172. 6(1-COOH)，51. 8(4-OCH3)，
24. 1(6-CH3)，7. 7(3-CH3)。以上数据推测并与文
献［9］对照，鉴定化合物 8 为 2-羟基-4-甲氧基-3，6-
二甲基苯甲酸。
化合物 9 浅褐色块状晶体(石油醚-乙酸乙
酯)，mp 189 ～ 192°C。分子式 C7H6O4。EI-MS m/z
154［M］+。IR(KBr)cm －1:3 212(-OH)，1 680(-
COOH)，1 600，1 528，1 466(苯环)。1H-NMR(DM-
SO-d6，400 MHz)δ:6. 78(1H，d，J = 8. 2 Hz，H-5)，
7. 28(1H，dd，J = 8. 2 Hz，2. 0 Hz，H-6)，7. 33
(1H，d，J = 2. 0 Hz，H-2)。结合以上数据推测并
与文献［10］对照，鉴定化合物 9 为原儿茶酸。
4 讨论
从以上分离鉴定的化合物可知，圆盖阴石蕨中
三萜类化合物以及酚酸类化合物量较大。五环三萜
类化合物特别是羽扇豆烷型具有很好的保肝活
性［11-12］，与圆盖阴石蕨具有治疗湿热黄疸的疗效相
符合。酚酸类化合物具有很好的清除自由基、抗菌
消炎等生理活性［13-14］。其中量较大的原儿茶酸还
有祛痰、平喘作用，用于治疗慢性气管炎［15］，这也是
圆盖阴石蕨传统活性之一。这些都为进一步研究开
发圆盖阴石蕨的药用价值提供科学依据。
参考文献:
［1］ 谢宗万.全国中草药汇编［M］.上册.北京:人民卫生出版社，
1983:280-281.
［2］ 叶筱琴，杨小凤，黄可新，等. 圆盖阴石蕨的化学成分研究
［J］.温州医学院学报，2002，32(1):24-25.
［3］ Hiroyuki A，Kenji S，Hideki S，et al. NMR spectra of triterpe-
noids. I. Conformation of the side chain of Hopane and Isoho-
pane，and their derivatives ［J］. Chem Pharm Bull，1993，41
(11):1939-1943.
［4］ Shen Chien Chang，Syu W J，Li S Y，et al. Antimicrobial activi-
ties of naphthazarins from Arnebia euchroma［J］. J Nat Prod，
2002，65:1857-1862.
［5］ Kenji S，Yoko A，Toshio K，et al. Fern constituents:triterpe-
noids isolated from the leaves of Adiantum monochlamys. Fili-
cenol A，Filicenol B，Isoadiantol B，Hakonanediol and Epihako-
nanediol［J］. Chem Pharm Bull，1993，41(2):262-267.
［6］ Chen Shengchi，Hong Liling，Chang Chungyang，et al. Antipro-
liferative constituents from Gynura divaricata subsp. formosana
［J］. Chin Pharm J，2003，55(2):109-119.
［7］ Si Ying，Yao Xihua，Zhang Cankui，et al. C-32 triterpenes from
Taxodium ascendens［J］. Biochem Syst Ecol，2005，33:211-214.
［8］ 李 军，姜 勇，屠鹏飞.密花远志的化学成分研究［J］.中国
中药杂志，2006，31(1):45-47.
［9］ Suheyla K，Omer K，Huseyin A，et al. Isolation and structure elu-
cidation of novel natural products from Tukish lichens［J］. Turk J
Chem，2003，27(4):493.
［10］ 安士影，钱士辉，蒋建勤，等.细柱五加叶的化学成分［J］. 中
草药，2009，40(10):1528-1534.
［11］ 叶文才，吉兆宁，汤 云，等. 一些三萜类化合物抗小鼠肝损
伤活性比较［J］.中国药科大学学报，1996，27(7):425-428.
［12］ 马葵芬，张相宜，齐罗扬，等. 三萜类化合物对化学损伤原代
746
2011 年 4 月
第 33 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2011
Vol. 33 No. 4
培养大鼠肝细胞的保护作用［J］. 浙江大学学报(医学版)，
2007，36(3):247-254.
［13］ 米宝丽，李可强，张振秋，等. 炎立消制剂多指标成分的含量
测定［J］.药物分析杂志，2009，29(3):504-507.
［14］ 刘志军，戚 进，余伯阳，等. 头花蓼化学成分及抗氧化活性
研究［J］.中药材，2008，31(7):995-998.
［15］ 王 勤，张永玲，侯铁军，等. 高效液相色谱法测定急支糖浆
中原儿茶酸的含量［J］. 中国现代应用药学杂志，2007，24
(5):406-408.
HPLC法同时测定滇产紫丹参中 6 种成分
朱艳琴1， 殷勤红2， 王文辉1， 杨 俊1， 杨朝芬1
(1. 昆明理工大学分析测试研究中心，云南 昆明 650093;2. 昆明积大制药有限公司，云南 昆明 650106)
收稿日期:2010-05-07
基金项目:昆明理工大学分析测试研究中心主任基金(2008-07)
作者简介:朱艳琴(1977 －)，女，工程师，硕士，从事天然产物分析。Tel:(0871)5119674，E-mail:zyq23788@ sohu. com
摘要:目的 采用 HPLC同时测定滇产紫丹参中丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA。方法
采用 Hypersil ODS色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)，乙腈-0. 1%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，体积流量:1. 0 mL /min;
检测波长:280 nm。结果 本方法各主要成分色谱峰之间有良好的分离度，6 个成分的浓度和各自峰面积之间有着良好
的线性关系，加样回收率的 RSD均小于 3. 0%。结论 该方法简便、快速，结果准确，可用于紫丹参的质量控制。
关键词:紫丹参;HPLC;丹参素钠;原儿茶醛;咖啡酸;隐丹参酮;丹参酮Ⅰ;丹参酮ⅡA
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2011)04-0648-03
Determination of six components in Salvia yunnanensis Roots by HPLC
ZHU Yan-qin1， YIN Qin-hong2， WANG Wen-hui1， YANG Jun1， YANG Chao-fen1
(1. Research Center for Analysis and Measurement，Kunming University of Science and Technology，Kunming 650093，China;2. Kunming Jida Pharmaceu-
tical Co.，Ltd，Kunming 650106，China)
ABSTRACT:AIM To develop an HPLC method for determing sodium danshensu，protocate chuicaldehyde，caf-
feic acid，cryptotanshinone，tanshinoneⅠ and tanshinone ⅡA simultaneously in Salvia yunnanensis Roots. METH-
ODS The column was Hypersil ODS (4. 6 mm × 250 mm，5μm). The mobile phase consisted of acetonitrile(A)
－ water (containing 0. 1% phosphoric acid)(B)in the gradient mode. The flow-rate was 1. 0 mL /min. The de-
tecting wave length was set at 280 nm. RESULTS The relationship between the concentration and the peak areas
of the six compounds was all linear. The RSD of recovery were all less than 3. 0% . CONCLUSION The method
is simple，rapid and accurate and reproducible，and could be used for the quality control of Salvia yunnanensis C.
H. Wright.
KEY WORDS:Salvia yunnanensis Roots;HPLC;sodium danshensu;protocate chuicaldehyde;caffeic acid;
cryptotanshinone;tanshinoneⅠ;tanshinone ⅡA
紫丹参［1］为唇形科植物云南鼠尾草 Salvia yun-
nanensis C. H. Wright 的干燥根，该品是云南长期做
丹参要用的品种之一，因其根较《中华人民共和国
药典》收载的唇形科植物丹参 Salvia miltiorrhiza
Bge.，主要产销云南，故又称为小紫丹参、小丹参、滇
紫丹参和滇丹参。紫丹参主要分布于云南东部、中
部和西北部，其药理活性与丹参类似，具有较强的治
疗心血管系统疾病的作用［2-9］。紫丹参活性成分可
以分为脂溶性的丹参酮类和水溶性的丹酚酸类，丹
参素钠、原儿茶醛、咖啡酸为水溶性丹酚酸类的主要
成分，隐丹参酮、丹参酮 I 和丹参酮ⅡA 为脂溶性的
丹参酮类的主要组成。相关文献已报道紫丹参和丹
846
2011 年 4 月
第 33 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2011
Vol. 33 No. 4