全 文 ：[作者简介 ] 　王雪红(1972-),女 ,学士 , 主管技师 ,主要从事理
化检验研究。
【化学测定方法】
氢化物原子荧光法测定溪黄草中的硒
王雪红 ,朱红华
(广东省韶关市疾病预防控制中心 ,广东韶关　512026)
[摘要 ] 　目的:建立氢化物原子荧光法测定溪黄草中硒含量的方法。方法:样品经 1 +1的硝酸 -高氯酸消解完全 、
6.0mol/L的盐酸预还原后通过氢化物原子荧光法进行测定。结果:方法的检出限为 0.02mg/kg,精密度为 5.7%, 回收
率为 86% ～ 105%。结论:采用氢化物原子荧光法测定溪黄草中的硒 , 方法污染少 、灵敏度高 、准确度较好。
[关键词 ] 　硒;氢化物原子荧光法;溪黄草
[中图分类号 ] 　O657.31　　　　[文献标识码 ] 　A　　　　[文章编号 ] 　1004-8685(2007)03-0460-02
Determinationofselenium inXihuangherbbyhydridegenerationatomicfluorescence
spectrometry
WangXue-hong, ZhuHong-hua
(ShaoguanCenterforDiseaseControlandPrevention, Shaoguan512026, China)
[ Abstract] 　Objective:Toestablishamethodofhydridegenerationatomicfluorescencespectrometrytodeterminethetotal
seleniuminXihuangherb.Methods:SampleoftheXihuangherbwasdigestedcompletelywithmixedacid(HNO3 +HClO4 ,
1+1)andreductedSe(Ⅵ )toSe(Ⅳ)with6.0 mol/Lhydrochloricacid, thendeterminedbyhydridegenerationatomic
fluorescencespectrometry.Results:Thedetectionlimitwas0.02 mg/kg, therelativestandarddeviationof6 determination
was5.7% andtherecoverywasrangedfrom86% to105%.Conclusion:Themethodislesscontaminative, highlysensitive
andaccurate.
[ Keywords] 　Selenium;HG-AFS;Xihuangherb
　　溪黄草俗称熊胆草 、血风草 、黄汁草 、溪沟草 、香茶菜和土
黄连等 , 主要产于长江以南的湖南 、四川 、云南 、江西 、广东和
广西等省区。溪黄草具有清热利湿 、退黄祛湿 、凉血散瘀的功
效 , 在广东各地临床应用普遍 , 并已开发出多种以之为主要原
料的防治肝炎的保健产品 , 如溪黄草冲剂 、溪黄草袋泡茶等。
硒作为人体必需的微量元素 ,具有多方面的生理功能 , 硒的含
量与人体健康密切相关 [ 1] 。测定溪黄草中硒的含量对了解人
体的硒摄入量以及溪黄草的药理作用有重要意义 。目前 , 测
定硒的方法有很多 , 其中应用于中草药中的主要有催化光度
法 [ 2] 、原子吸收光谱法 [ 3] 、荧光分析法 [ 4, 5] 、极谱法 [ 6] , 暂未见
有针对测定溪黄草中硒的报道。本文用氢化物原子荧光法测
定了溪黄草中硒的含量 , 方法具有污染少 、灵敏度高 、准确度
较好等特点。
1　材料与方法
1.1　仪器和试剂
AF-601A原子荧光分光光度计(北京瑞利分析仪器厂);
高性能硒空心阴极灯(信息产业部电子第十二研究所);电热
恒温消解器(北京博瑞赛科技有限责任公司)。
硒标准贮备液(GBW(E)080215北京国家标物质研究中
心)100 mg/L:逐级用 1%(v/v)的盐酸稀释为 0.1 mg/L的标
准应用液;硼氢化钾碱性溶液(含 5% 的 KOH)10 g/L:称取
10.0 g硼氢化钾 (KBH4 , 纯度 ≥ 95%)溶于氢氧化钾溶液
(5 g/L)中 ,然后用氢氧化钾溶液(5g/L)定容至 1 000ml, 临
用前现配;铁氰化钾 +EDTA溶液:100 g/L铁氰化钾和 50 g/L
EDTA-2Na等体积混匀;硫脲 +抗坏血酸溶液:50 g/L硫脲和
50 g/L抗坏血酸等体积混匀;硝酸 、高氯酸 、盐酸为优级纯 , 水
为超纯水。其他试剂为分析纯。
1.2　仪器条件
灯电流 60 mA;负高压 280 V;波长 196.3nm;原子化温
度:室温档(约 200℃);炉高 7 mm;载气流速:800ml/min;测
量方式:标准曲线法;读数方式:峰面积;延迟时间:3s;读数时
间:15s。
1.3　实验方法
1.3.1　样品消化　取 1.00 g干燥粉碎样品于 50 ml的消化
管中 , 加少量水润湿后加人 1 +1的硝酸 -高氯酸混合液
10 ml,放置过夜。次日先在约 80℃低温下进行消化 , 待深棕
色浓烟消失后 , 逐渐提高消化温度至 160℃, 溶液颜色变为深
褐色时 , 及时补加硝酸。消化至冒浓白烟溶液变为清亮无色
或淡黄色时 , 取下 ,加入 6.0mol/L的盐酸 2.0 ml, 在约 100℃
继续消解至冒白烟溶液变为清亮无色或淡黄色 , 以使六价硒
还原为四价硒。冷却后将消化液转移到 25 ml容量瓶中 ,用少
量水反复润洗消化管 , 洗液并入容量瓶 ,加入 5.0 ml浓盐酸 ,
加水至刻度。同时做空白对照。
1.3.2　标准系列制备　分别吸取 0.1 mg/L的硒标准应用液
0.00, 0.50, 1.00, 2.00, 4.00, 8.00, 10.00 ml于 50 ml消化管
中 , 以下同 “样品消化”处理。该标准系列含 Se量分别相当于
460 中国卫生检验杂志 2007年 3月 第 17卷第 3期　ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology, Mar2007;Vol17　No3
2, 4, 8, 16, 32, 40 μg/L。
1.3.3　测定　分别往标准液和样品消化液中加入 5.0 ml的
铁氰化钾 -EDTA混合液 , 混匀 , 以 20%(v/v)HCl为载流 ,调
节好仪器的状态进行测定。
2　结果与讨论
2.1　样品的消解
目前 , 测定硒的方法大部分都是将硒转化为四价硒进行
测定。由于硒是一种多价态的低温易挥发元素 , 在消解过程
中极易损失。有报道在消解液中增大高氯酸的比例 , 可以减
少器皿对硒的吸附。但高氯酸在无水的条件下极易引起爆
炸 , 随着高氯酸量的增加 ,实验的危险性也增大。所以高氯酸
的用量不适宜过大 , 且在消化的过程中要密切观察样液颜色
的变化。当大量的棕色烟冒出后 , 样液颜色变深时 ,要及时补
加硝酸。本文采用体积比为 1/1的硝酸 -高氯酸浸泡过夜后
再进行消化 , 这样可以保证实验的安全性 , 同时更有利于样品
的消解。当消化温度高于 180℃时 ,硒容易损失 , 所以消化温
度不宜过高 , 本文采用 160℃。由于在这种消化条件下只能将
样品中的低价硒转化为四价硒 , 而六价硒只有通过在盐酸浓
度为 4 ～ 6mol/L加热还原一定时间才能转化为四价硒。本文
就进行还原和不还原作了比较 , 发现不还原的测定结果只有
还原后的 35% ～ 60%,结果见表 1。
表 1　样品还原后和未还原的测定结果比较
样品号 测定结果(mg/kg)还原后 未还原
未还原测定值
还原后测定值 ×100%
1 0.048 0.028 58.3
2 0.062 0.037 59.7
3 0.081 0.028 34.6
4 0.105 0.041 39.0
2.2　反应条件的选择
氢化物原子荧光法测定硒时 , Cu、Ni、Bi、As、Au、Ag等元素
有严重干扰 , 这种干扰可能是当加入硼氢化物时 , 溶液中的干
扰离子迅速形成金属沉淀而分解或吸附氢化硒 [ 2] 。反应体系
使用了体积比为 20%的盐酸 , 这主要是因为在这种酸度条件
下:①与硼氢化钾的反应速度加快 , 可得到较高的分析灵敏
度;②可增强体系对过渡金属或贵金属离子的抗干扰能力;③
盐酸本身可作为一种还原剂 , 把 Se6+还原成 Se4+;④这种酸
度的盐酸不会导致副反应。 在这种酸度条件下 , 本文进行了
EDTA、硫脲 -抗坏血酸 、铁氰化钾 -EDTA3种试剂抗干扰能
力的比较 ,发现相同体积的 3种试剂 ,铁氰化钾 -EDTA抗干
扰的能力明显优于其他两种。加入铁氰化钾 -EDTA作掩蔽
剂 , 可明显降低这些金属的干扰。
温度对氢化物的反应速度有很大的影响 , 当反应温度低
于 20℃时 , 反应速度明显降低 , 试验的灵敏度下降。所以在
测定时应保证反应温度在 20℃以上。
2.3　干扰试验
在上述选定条件下 , 下列组分量对 0.01mg/L硒的测定
误差在 5% 以内 , 2 000 mg/L的 Cu2+、Zn2+, 500 mg/L的
Ni2+、Ca2+、 Mg2+、 Mn2+, 1 mg/L的 Ag+、Hg+, 50 mg/L的
As5+、Pb2+、Cd2+。
2.4　加标回收试验
取 2份硒含量不同的样品 , 分别加入 0.1 mg/L的硒标准
应用液 0.50, 2.00 ml(相当于硒 0.05, 0.20 μg), 按 “样品消
化”进行处理 , 测定 ,计算回收率。结果见表 2。由表 2可以看
出 , 回收率为 86% ～ 105%。
表 2　回收率实验结果
本底值(μg) 加标量(μg) 测定值(μg) 回收率(%)
0.048 0.05 0.084 85.7
0.048 0.20 0.254 102.6
0.105 0.05 0.163 105.2
0.105 0.20 0.296 97.0
2.5　方法的工作曲线 、精密度和检出限
硒含量在 0 ～ 40 μg/L范围内 , 工作曲线的回归方程 IF=
86.45×C-20.33, 相关系数 r≧ 0.999。
测定硒含量约为 0.05 mg/kg的样品 6次 , 结果分别为
0.054, 0.052, 0.50, 0.049, 0.048, 0.046 mg/kg, 计算相对标准
偏差为 5.7%。
空白样平行测定 11次 , 计算出它的标准偏差 ,以 3倍标准
偏差所对应的硒浓度作为仪器检出限 , 方法检出限则在仪器
检出限上乘以样品的稀释倍数(按本方法的操作 , 稀释倍数为
25)。本方法测定空白对照 11次 , 计算得仪器的检出限为
0.8 μg/L,所以本方法的检出限约为 0.02 mg/kg。
3　小结
目前市场上这类保健品多被肝炎病人所喜爱 , 为了解他
们的硒摄入量以及溪黄草的药理作用 , 很有必要准确测定其
中的硒含量。氢化物原子荧光法测定溪黄草中硒的含量 , 方
法的检出限约为 0.02 mg/kg, 精密度为 5.7%, 加标回收率为
86% ～ 105%;方法具有污染少 、灵敏度高 、准确度较好等特点。
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(收稿日期:2006-10-10)
461中国卫生检验杂志 2007年 3月第 17卷 第 3期　ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology, Mar2007;Vol17　No3