全 文 ：选择中 , 比较了不同比例的甲醇-水 、乙腈-水 , 结果表明乙腈-水
(0.5∶99.5)在样品分析中梓醇与其他峰均能达到基线分离 ,
保留时间适中 , 柱效最高。
表 1　不同地区地黄饮片中梓醇的含量测定结果　　　　%
样品 梓醇 RSD
山东(生) 0.178 1.34
山东(熟) 0.146 1.51
上海(生) 0.895 1.93
上海(熟) 0.438 1.84
天津(生) 1.300 1.62
天津(熟) 0.766 1.17
河北(生) 0.637 1.24
河北(熟) 0.324 1.69
　　n=3
3.2　 在地黄的提取试验中 , 比较了用水提取与甲醇提取的结
果 , 两者均能提尽其中的梓醇 ,考虑到试剂的价格与毒性 ,选用水
提取 , 经重复性等实验 ,表明本方法可行。
3.3　 由测定结果可知 , 不同地区地黄饮片的梓醇含量差异很
大 , 这可能与地黄饮片在炮制及生产加工过程中的梓醇损失程度
不同有关 [ 5] , 因此及早实行中药饮片生产的 GMP制度 , 从而保
证中药饮片的临床疗效 ,势在必行。
参考文献:
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国中药杂志 , 1997 , 22(6):3451.
收稿日期:2005-11-07;　修订日期:2006-04-16
作者简介:王祥培(1975-),男(侗族),贵州贵阳人 ,现任成都中医药大学
药学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事中药品种 、品质与资源开发研究工作.
不同产地野生与栽培头花蓼中总黄酮的含量分析
王祥培 1, 2 , 万德光 1 , 王祥森 3 , 王　强 4 , 靳凤云 2 , 王毓杰1
(1.成都中医药大学药学院 ,四川 成都　611730;　2.贵阳中医学院 ,贵州 贵阳　550002;
3.西藏墨脱县墨脱镇人民政府 , 西藏 墨脱　860016;　4.西安交大医学院 ,陕西 西安　710061)
摘要:目的 比较了不同产地野生与栽培头花蓼中总黄酮的含量差异。方法 紫外分光光度法测定了头花蓼中总黄酮的
含量。结果 11批头花蓼中 ,贵州盘县 、云南昆明 、西藏墨脱等地野生头花蓼中总黄酮的含量较高 , 贵州施秉栽培头花蓼
中总黄酮的含量较高。结论 不同产地野生与栽培头花蓼中总黄酮的含量存在一定的差异 ,应注意生长环境对药材质量
的影响。
关键词:头花蓼;　野生与栽培;　总黄酮;　紫外分光光度法
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)09-1713-02
DeterminationoftheContentsoftheTotalFlavoneintheWildandCultivatedPolygonum
capitatumfromDifferentProducingAreas
WANGXiang-pei1, 2 , WANDe-guang1 , WANGXiang-sen3 , WANGQiang4 , JINFeng-yun2 , WANGYu-jie1
(1.PharmaceuticalColege, ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine, Chengdu, Sichuan611730,China;2.GuiyangColegeofTraditionalChineseMedicine, Guiyang, Guizhou550002, China;3.TibetMotuo
CountyMotuoTownGovernment, Motuo, Tibet860016, China;4.MedicalColege, XianJiaoTongUniversity, Xi
an, Shanxi710061, China)
Abstract:ObjectiveTocomparethecontentsofthetotalflavoneinthewildandcultivatedPolygonumcapitatumfromeleven
producingareas.MethodsUV-VISspectrophotometrymethodswereusedtodeterminethecontentsofthetotalflavone.Results
IntheelevenkindsofPolygonumcapitatum, thoseproducedinPanxian, KunmingandMotuocontainedthetotalflavonemore,
andthecultivatedPolygonumcapitatuminShibingcontainedthetotalflavonemore.ConclusionThecontentofthetotalflavonein
thewildandcultivatedPolygonumcapitatumfromvariousareasisdiferent, andatentionmustbepaidtotheefectsofenviron-
mentonthequalityofherbs.
Keywords:Polygonumcapitatum;　Wildandcultivated;　TotalFlavone;　UV-VISspectrophotometry
　　头花蓼为蓼科植物头花蓼(PolygonumcapitatumBuch.-Han.
exD.Don)的干燥全草或地上部分。主产于贵州 、云南 、四川 、西
藏 、广西等省区 ,我国民间常将头花蓼用于治疗泌尿系统感染 、血
尿 、湿疹 、肾盂肾炎 、膀胱炎 、尿路结石 、风湿痛 、跌打损伤 、痄腮 、
疮疡 、腹泻 、痢疾等 [ 1 , 2] 。以头花蓼为原料制成的中成药制剂在
临床上治疗泌尿系统感染有很好的疗效 [ 3 , 4] 。其中黄酮类成分
为其主要成分 [ 5] , 为考察不同产地野生与栽培头花蓼的质量以
及野生变家种提供依据 ,本实验测定了头花蓼药材中总黄酮的含
量 , 现报道如下。
1　仪器与材料
1.1　仪器 贝克曼 DU-70可见-紫外分光光度计(美国贝克曼公
司);梅特勒 1/10万电子天平(梅特勒-托利多公司)。
1.2　材料 芦丁对照品(080-9002.购于中国药品生物制品检定
所),其他试剂均为分析纯 , 10批头花蓼样品均由成都中医药大
学万德光教授鉴定。
2　方法
2.1　对照品溶液的制备 精密称取在 120℃减压干燥至恒重的芦
丁对照品 12.55 mg,置于 100 ml量瓶中 ,加 60%的乙醇溶解, 并稀
释至刻度 ,即得对照品溶液(每毫升含有无水芦丁0.125 5 mg)。
2.2　标准曲线的制备 精密吸取 0, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0, 6.0
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.9 时珍国医国药 2006年第 17卷第 9期
ml芦丁对照品溶液分别置于 25 ml容量瓶中 ,分别加入 60%乙
醇至 6.0 ml,再分别加入 3.0ml0.1 mol/LAlCl3溶液 , 5.0ml1.0mol/LKAc溶液 ,加 60%乙醇稀释至刻度 , 摇匀 ,放置 40min。以
第一瓶为空白溶液 , 任取 1份选择波长 350 ～ 600 nm进行扫描 ,
扫描结果在 412 nm处有最大吸收 , 故选择 412 nm为测定波长 ,
测定 A值。并以吸光度为纵坐标 ,浓度为横坐标 , 绘制标准曲线 ,
计算回归方程为:A=22.714C+0.001, r=0.999 9(n=6)。
2.3　样品中总黄酮含量的测定
2.3.1　供试品溶液的制备 精密称取头花蓼细粉 0.5 g, 置 50
ml量瓶中 ,加甲醇至刻度 , 密塞 , 称重 , 静置过夜 , 超声提取 30
min,称重并补足原重。测定时吸取续滤液。
2.3.2　测定方法 精密吸取供试品液 2 ml, 置 25 ml量瓶中 , 按
标准曲线操作方法 , 自 “加入 60%乙醇至 6.0 ml”起依法测定吸
收度。据 A=22.714C+0.001, 计算样品中总黄酮的含量。
2.4　重现性实验 精密称取同一样品粉末 5份 , 每份 0.5 g。按
上述(2.3.1 ～ 2.3.2)测定方法进行测定 , 总黄酮平均含量为
1.57%, RSD为 1.5%,表明本法重现性良好。
2.5　稳定性实验 精密称取样品 0.5 g, 按上述(2.3.1 ～ 2.3.2)
测定方法进行 ,显色放置 40min后 ,每隔 30 min测定 1次 ,持续 2
h,总黄酮平均含量为 1.40%, RSD为 1.65%。表明显色放置 40
min后 , 2 h内测定稳定。
2.6　回收率实验 采用加样回收法:精密称取已知含量样品 0.25
g, 平行 6份 ,每份精密加入芦丁对照品液(1.681 mg/ml)2.0 ml,
按(2.3.1 ～ 2.3.2)项下方法测定 , 计算回收率。其平均回收率
为 98.18%。RSD为 0.90%。结果见表 1。
表 1　芦丁回收率实验结果
序
号
样品含量
m/mg
加入量
m/mg
侧得量
m/mg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 3.511 3.362 6.791 97.56
2 3.518 3.362 6.785 97.17
3 3.506 3.362 6.855 99.61
4 3.513 3.362 6.812 98.13 98.18 0.90
5 3.509 3.362 6.798 97.83
6 3.515 3.362 6.836 98.78
　　n=6
2.7　样品测定 精密称取头花蓼细粉 0.5 g, 置 50 ml量瓶中 ,加
甲醇至刻度 ,密塞 , 称重 ,静置过夜 , 超声提取 30 min,称重并补足
原重 ,过滤 , 取滤液 2.00ml自 “加入 60%乙醇至 6.0 ml”起 , 按标
准曲线操作方法进行测定。结果见表 2。
表 2　不同地区野生与栽培头花蓼中总黄酮含量
序号 产地 采收时间 含量(%) RSD(%)
1 贵州安顺＊ 2005-09 0.97 1.21
2 贵州剑河＊ 2005-09 1.14 1.29
3 贵州锦屏＊ 2005-09 1.02 1.51
4 贵州贵阳＊ 2005-09 1.11 1.26
5 贵州盘县＊ 2005-09 1.41 1.16
6 贵州施秉＊＊ 2005-09 1.05 1.35
7 四川米易＊ 2005-09 1.06 1.33
8 四川峨眉＊ 2005-09 1.21 1.53
9 四川成都＊＊ 2005-09 0.95 1.46
10 云南昆明＊ 2005-09 1.44 1.61
11 西藏墨脱＊ 2005-09 1.40 1.55
　　＊野生 , ＊＊栽培
3　讨论
前期研究曾考察了直接回流法 、索氏提取法 、超声法等不同
提取方法 , 通过含量测定结果得知 , 超声法提取最完全 ,故选择超
声法提取。
根据收集到的 11批不同产地野生与栽培头花蓼中总黄酮的
含量测定结果得知 ,云南昆明 、贵州盘县 、西藏墨脱等地野生头花
蓼中总黄酮的含量较高 ,四川成都栽培头花蓼中总黄酮的含量最
低 , 在相同省份内头花蓼总黄酮含量也存在一定差异 , 因此提示
我们在用药时应注意产地与药材质量的关系 ,在进行头花蓼的栽
培研究时 ,应注意生长环境对药材质量的影响。
参考文献:
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(上接第 1711页)标准品的水溶液在 190 ～ 500 nm波长范围内 ,
多数核苷酸最大吸收波在 260 nm附近 ,本文选择 260 nm作为最
大检测波长。
2.2　流动相的确定 在强酸(pH<2)及碱性(pH>8)条件下 ,核
苷酸会分解变性 , 故必须在弱酸性或中性条件下进行测定。实验
表明大部分组分的保留值随 pH增加而不同程度的增大。当用
流动相 A:0.2mol/LKH
2
PO
4
-H
3
PO
4
缓冲盐溶液(pH=3.75);流
动相 B:甲醇时 ,盐浓度增大使核苷酸的保留值增大 , 分离效率提
高 , 对核苷和碱基影响较小。但盐浓度过大对仪器及柱子的腐蚀
性也大 , 经实验确定为 0.2mol/L。
2.3　核苷酸定量标准曲线 、检测限 、精密度及回收率 各组分的
定量标准曲线 、检测限 、精密度及回收率详见表 1。
表 1　各组分的定量标准曲线 、检测限 、精密度及回收率
核苷酸 工作曲线 相关系数
检测限
C/mg· L-1
RSD
(%)
回收率
(%)
CMP Y=5480590X+26005 1.0000 0.10 3.18 97.6
UMP Y=6713955X+18760 0.9988 0.10 2.45 96.7
GMP Y=7748311X+11457 0.9981 0.10 2.77 101.3
IMP Y=6257798X+23920 0.9988 0.10 2.16 98.2
XMP Y=7680350X+16520 0.9988 0.10 3.04 99.4
AMP Y=11017273X+17264 0.9995 0.10 2.89 96.5
　　n=5
3　结论
用标准加入法对各核苷酸类组分进行定性 ,用标准曲线法计
算样品中各种核苷酸的含量 ,计算结果见表 2。
表 2　蛹虫草菌丝体中核苷酸种类及含量
核苷酸 含量 C/μg· g-1
5′-CMP 173.0
5′-UMP 824.9
5′-GMP 92.9
5′-IMP 2114.0
5′-XMP 79.6
5′-AMP 231.4
实验结果表明 ,蛹虫草菌丝体中 5′-IMP含量较高 ,为 2 114.0
μg/g,其次 , 为 5′-UMP(824.9μg/g)和 5′-AMP(231.4 μg/g), 而
5′-GMP(92.9μg/g)和 5′-XMP(79.6μg/g)含量相对较低。
本实验用反相高效液相色谱法对 6种样品中的核苷酸类物
质进行定性 、定量分析 , 快速 、简便 、重现性好。该方法可以有效
地应用于上述样品中核苷酸类物质的测定 ,为进一步开发利用蛹
虫草菌丝体等珍贵药材提供了理论数据 ,亦可作为工厂化生产的
质检手段予以应用。
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 9期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2006VOL.17NO.9