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溪黄草提取物对小鼠免疫功能的影响



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(2007-06-18收稿)
溪黄草提取物对小鼠免疫功能的影响
谢春英
(中山大学附属第六医院药剂科 ,广东广州 510655)
  摘要 目的:观察溪黄草提取物对小鼠免疫功能的影响。方法:分别建立不同的小鼠免疫模型 ,观察溪黄草提
取物对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能 、溶血素抗体生成 、小鼠淋巴细胞增殖反应的影响。结果:溪黄草提取物可激活
小鼠网状内皮系统 , 增加小鼠血清溶血素含量 , 提高淋巴细胞转化程度。结论:溪黄草提取物对机体免疫功能具有
一定的增强作用。
关键词 溪黄草提取物;免疫功能;血清溶血素;淋巴细胞
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2008)01-0116-02
  中药溪黄草主要来源于唇形科香茶菜属植物线
纹香茶菜 Rabdosialophanthoides(Buch.-Ham.ex
D.Don)Hara,具有清热利胆 、凉血散瘀 、强肝益肝等
作用〔1〕。笔者在前期的研究中发现 ,溪黄草提取物
具有良好的预防大鼠急性肝损伤的作用。为进一步
探讨溪黄草提取物预防肝损伤的作用机理 ,笔者分
别建立了不同的小鼠免疫模型 ,从多角度研究溪黄
草提取物对小鼠免疫功能的影响 ,现报道如下 。
1  材料
1.1  药品与试剂 溪黄草药材 ,购于湛江市药材
供应站 ,用水煎煮配制成溪黄草提取物。盐酸左旋
咪唑 ,广东华南制药厂生产 ,批号:040103。环磷酰
胺 ,上海华联制药有限公司生产 ,批号:041005。植
物血凝素 (PHA), Sigma公司生产。印度墨汁 ,
CHROMA生产 ,批号:200307。肝素钠 ,上海卫辉制
药厂生产 ,批号:932010。
1.2 动物 昆明种小鼠 , 18 ~ 22 g。由广东省医
学实验动物中心提供 ,动物合格证号:2003A001。
2 方法与结果
2.1 对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 〔2〕 取
昆明种小鼠 75只 ,随机分为 5组 ,每组 15只 ,分别
为:空白对照组 ,溪黄草提取物高 、中 、低剂量(60、
30、15mg/kg)组 ,阳性对照药盐酸左旋咪唑(40mg/
kg)组。灌胃给药 , 1次 /d,连续 7d。空白对照组给
予等容量蒸馏水 ,其它组给予等容量不同浓度的药
液。于末次给药 1h后按 0.1 ml/10g剂量 ,尾静脉
·116· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials  第 31卷第 1期 2008年 1月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.01.044
注射印度墨汁稀释液(1∶7),注射后于 0.5、6 min用
玻璃毛细管分别从眼眶后静脉丛采血 20 μl,溶于 3
ml0.1%Na2CO3溶液中摇匀 ,在 630 nm处测定吸
光度值 ,最后将小鼠脱颈椎处死 ,分别称肝 、脾 、胸腺
重量 ,计算脏器指数。结果见表 1。溪黄草提取物
(30、60 mg/kg)组和左旋咪唑组均有增加小鼠碳粒
廓清指数 K值的作用 ,与空白对照组比较有显著性
差异(P<0.05, P<0.01)。
 表 1    溪黄草提取物对正常小鼠单核细胞
吞噬功能的影响( x±S, n=15)
组别 剂量(mg/kg) K α
空白对照组 - 0.0127±0.0072 3.3152±0.8336
溪黄草提取物组 15 0.0204±0.0125 4.2349±0.7216*
溪黄草提取物组 30 0.0221±0.0111* 4.2078±0.7457*
溪黄草提取物组 60 0.0270±0.0130** 4.4960±0.8526**
左旋咪唑组 40 0.0190±0.0059* 3.9943±0.5422*
  与空白对照组比较:*P<0.05, **P<0.01。表 3同
2.2  对小鼠溶血素抗体生成的影响 〔3〕 取昆明种
小鼠 75只 ,随机分为 5组 ,每组 15只 ,分别为:空白
对照组 ,模型对照组 ,溪黄草提取物高 、中 、低剂量
(60、30、15mg/kg)组 ,灌胃给药 , 1次 /d,连续 9 d。
空白对照组给予等容量蒸馏水 ,其它组给等容量不
同浓度的药液。于给药第 2 d,小鼠腹腔注射 5%鸡
红细胞(CRBC)混悬液 0.2 ml进行免疫 , 1h后除正
常对照组外 , 各组小鼠均腹腔注射环磷酰胺 (80
mg/kg)0.02ml/20g体重。免疫 7 d后 ,小鼠摘眼球
取血 1 ml, 分离血清 ,取血清用生理盐水稀释 100
倍 ,取稀释血清 1ml加入 5%CRBC0.5 ml,置冰浴
中 ,每管加入 0.5 ml生理盐水 1∶10稀释过的豚鼠
血清 ,随即移至 37℃恒温水浴中 ,保温 30min,即放
入冰浴以终止反应 , 2000r/min离心 10 min,取上清
1 ml,放置 10 min后 ,在 546 nm处测定各样品的吸
光度(A)值 ,另设不加血清的空白对照 ,以 A值作为
 表 2    溪黄草提取物对小鼠溶血素
抗体生成的影响( x±S, n=15)
组别 剂量(mg/kg) A值
空白对照组 - 82.75±20.78**
模型对照组 80 7.34±1.39
溪黄草提取物组 15 8.56±1.89
溪黄草提取物组 30 17.17±10.21**
溪黄草提取物组 60 11.12±2.38*
  与模型组比较:*P<0.05, **P<0.01
判定血清素的指标 ,并进行组间 t检验 。结果见表
2。溪黄草提取物(60、30 mg/kg)组 ,与模型对照组
比较均能明显增加小鼠血清溶血素含量(P<0.05
或 P<0.01)。
2.3 对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响 〔3〕 取昆明
种小鼠 75,随机分为 5组 ,每组 15只 ,分别为:空白
对照组 ,溪黄草提取物高 、中 、低剂量(60、30、15mg/
kg)组 ,左旋咪唑(40 mg/kg)组 ,肌肉注射 PHA10
mg/kg, 1次 /d,共 3 d。给药组在给 PHA当天开始
灌胃等容量不同浓度的药液 ,空白对照组灌胃等容
量的蒸馏水 , 1次 /d,连续 9 d。第 9 d剪尾取血推
片 ,瑞氏染色 ,油镜下计数 100个淋巴细胞中淋巴母
细胞及过渡态细胞数 ,计算它们所占的百分率。结
果见表 3。溪黄草提取物(30、15 mg/kg)组及左旋
咪唑组均能使淋巴母细胞百分率升高 ,与空白对照
组比较 , 有显著性统计学意义 (P<0.05或 P<
0.01);溪黄草提取物各剂量组 、左旋咪唑组均能使
过渡态细胞百分率升高 ,与对空白对照组比较 ,有显
著性统计学意义(P<0.05或 P<0.01)。
 表 3    溪黄草提取物对小鼠淋巴细胞
转化反应的影响( x±S, n=15)
组别 剂量(mg/kg) 淋巴母细胞(%) 过渡态细胞(%)
空白对照组 - 14.9±1.9 21.2±5.2
溪黄草提取物组 15 20.8±4.8** 27.4±4.9*
溪黄草提取物组 30 18.7±3.6* 26.8±4.9*
溪黄草提取物组 60 15.1±3.2 24.6±4.7*
左旋咪唑组 40 21.9±4.8** 29.7±6.7**
3 讨论
本文观察了溪黄草提取物对多项免疫指标的影
响 ,结果表明:溪黄草提取物可影响小鼠的非特异性
免疫功能和特异性体液免疫 、细胞免疫功能 ,能提高
机体免疫力 ,有较好的增强免疫功能作用。笔者认
为 ,溪黄草提取物预防肝损伤的作用与其对机体的
免疫功能的影响直接有关。
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(2007-06-28收稿)
·117·中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials  第 31卷第 1期 2008年 1月