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粗皮桉的组培快繁方法



全 文 :中国园艺文摘 2 06 1年第 6 期
粗皮按的组培快繁方法
石 前 ’ , 李飞宇 2 , 李 俏 ’ , 李丽芳 ’ , 兰 俊 ’
( !
. 广西壮族 自治区国有东门林场 , 广西 扶绥 5 3 2 ! 。 8 ; 2 . 中种国际种子有限公司 , 北京 ! 。 。。2时
摘 要 : 介绍粗皮按的组培快繁方法 , 即采用粗皮按优 良家系的优 良单株 , 对其进行伐桩 萌芽 , 利用
萌芽作为外植体 , 通过带芽茎段离体诱导 无菌芽 , 经过对无菌芽的 继代增殖培养 、 生根培养和生根苗
移栽 , 获得再生植株 。
关键词 : 粗皮按 ; 外植体 ; 快繁方 法
粗皮按生长迅速 , 木质坚实 , 轮伐期 12 一 1 5年 ,
在实木利用方面 , 有尾 巨按等短周期纸浆材无可比拟
的优势 。 由于在前期以开发短轮伐期速生林为主 , 片
面追求木材产量和短期经济效益 , 粗皮按没有受到重
现 , 现在推广粗皮按正是时候 。 选育生长量高的家系 ,
选择优良单株 , 通过无性繁育 , 扩大栽培面积 , 建成
既有高经济价值 , 又利于生态安全 、 环境友好的人工
林 , 具有显著的社会效益 、 经济效益和生态效益 。
粗皮按引种驯化成功 , 适合华南地区生长 。 但是 ,
目前仅仅保存在试验林分中 , 数量很少 。 要快速推广
这一树种 , 利用无性繁殖 , 特别是组培快繁方法是最
有效的途径 。 按树生长周期长 , 而且遗传性状高度杂
合 , 采用常规实生种子育苗方法育苗周期长 , 而且利
用无性繁殖 , 能够保持优良基因型 (优树 )的遗传性状 ,
利用组培快繁 , 则可以在短期内获得大量的苗木 。
1 按树组培快繁研究进展
我国在 20 世纪 70 年代开展按树组培研究 , 取得
一定进展 。 到 80 年代中期 , 以 “尾叶按芽器官离体快
繁研究 ” 的成功为标志 , 按树组织培养技术已进入成
熟阶段 , 解决了长期困扰技术人员的几个关键问题 ,
材料污染 , 选用的培养材料 、 培养基和瓶苗移栽等 。
目前 , 按树组培的特点之一是很重视优 良无性系的外
植体材料来源 , 同时要求在无菌芽诱导时 , 不经过脱
分化过程 , 由离体芽器官通过分生侧芽的途径直接产
生丛生芽 , 将丛生芽切割后接种到生根培养基诱导生
根小植株 , 这样的组培苗能够保持优树的优良遗传性
状 , 造林后林相整齐 , 生长量高 。 而采用通过愈伤组
织途径分化而成的组培苗 , 因为经过脱分化过程 , 培
第一作者简介 : 石
事林木 良种繁育研究 。
通讯作者 : 兰 俊 ,
1 0 7@y a h o o
.
e o m
.
e n
前 ( 1 9 8 2一 ) , 女 , 硕士 , 工程师 ; 从
养的苗木容易产生变异 , 造林后林分出现分化 , 所以
不适合大面积推广造林 。
迄今为止 , 已有 60 多种按树的组织培养获得成
功 。 而对于粗皮按只有曾富华等利用粗皮按无菌实生
苗下胚轴为外植体诱导愈伤组织 , 在经不定芽增值 、
不定芽伸长 、 生根及移栽 , 得到再生植株 。
目前国内外还未见有用粗皮按优良家系的优良单
株萌芽条作外植体 , 不经过愈伤组织 , 直接进行组织
培养快速获得大量 、 遗传特性稳定的粗皮按苗木的相
关文献报道 。
2 粗皮按优良单株选择
在澳大利亚引种的家系试验林 中 , 通过栽培试
验 、 测定分析 , 选择出适合本地生长 、 生长量高 、 抗
逆性强 , 已成功驯化的家系 / 种群 。 经测试对比 , 选
择出适合本地生长的粗皮按优良家系 。
在粗皮按优良家系中 , 通过测量胸径 、 树高 、 蓄
积 、 连年生长量 、 木材材性以及干形指标 , 综合对比
后选择出优良单株 。
3 粗皮按的组培快繁方法
3
.
1 芽条处理
将优 良单株在离地面 20 cm 高度处伐倒 , 促萌
芽 , 当萌芽条长到 18 cm 时 , 剪取萌芽条 , 用水浸
泡基部带 回实验室备用 ; 将萌芽条修剪去叶片 、 叶
柄 , 用自来水流水冲洗 5 m in , 再用饱和洗衣粉溶液
洗涤 10 m加 , 用纯净水清洗干净 ; 在超净工作台上 ,
将萌芽条剪去嫩梢段和基部老化部分 , 留半木质化茎
段 , 切成长 2 一 3 c m , 保留有 1 一 2 个潜伏芽的切
段做消毒材料 ; 将待消毒材料置于高压灭菌处理过的
无菌瓶 中 , 用 75 % 酒精溶液浸泡 17 5 , 无菌水清洗
5 次 , 洗去残留酒精 , 再用 0 . 1% H g C L : 溶液浸泡并
适当搅拌 , 9 m in 后倒去 H g C L : 溶液至专用收集罐中 ,
用无菌水清洗材料 6 次 。
硕士 , 高级工程师 。 E一 m a i l : l a nj un
(下转 1 6 9 页 )
一 1 6 7
中国园艺文摘 0 26 1年第 6 期
气温 3一 5 ℃时 , 有利于插穗生根 。 采用地膜覆盖具
有明显的增温作用 , 可有效提高插壤的温度 7[] 。 覆盖
地膜后 , 土壤温度一般都能达到河杨生根的最适温度
1 8 一 2 5℃ [吕] , 提高河北杨扦插成活率 10 个百分点 [ 4 ]。
.4 2 生长激素处理
用生长素水溶液处理时 , 将已剪好的插穗以一定
数量捆成 1束 , 并使下端切 口在同 1 个平面上 , 然
后浸在水溶液中 , 插穗的基部浸入约 Z cm 即可 。 用
A B T 生根粉 l 、 2 号时 , 一般采用 刃 一 10 0 m g / k g
的药液 。
4
.
3 倒置沙藏催根
将经生长素处理过 的插条 , 斜 口朝上 , 平 口朝
下 , 分 3 一 5 层码放 , 层与层之间用 10 一 15 c m 的
沙子隔开 , 插条之间用细沙填充 , 四周用 20 一 2 5 cm
厚的沙子密封 , 用水渗透 。 沙藏催根期温度应控制在
1 5℃左右 , 不能超过 20 ℃ , 否则要洒水降温 3[] 。 沙藏
2 5 d 左右皮下生不定根 , 切 口生成愈合组织 , 然后
及时扦插 阴 。
5 扦插后管理
扦插后应立即浇足第 1次水 , 以后经常保持插壤
湿度 , 确保插穗生根的最适环境条件 。 注意拔草 、 做
好病虫害防治等工作 , 一旦发现病虫害要及时彻底防
治 。 新苗长到一定高度时 (一般为 巧 一 30 Cm ) , 应
及时摘芽 , 只留取 1个健壮的直立芽 。
参考文献 :
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(上接 1 6 7 页 )
.3 2 诱导培养
用镊子夹取清洗好的茎段 , 放置在灭菌的接种
碟上 , 用灭菌过的滤纸吸干表面水分 , 切去叶柄和
茎段的两端 , 接种到无菌芽诱导培养基上 , 无菌芽
诱导 培 养基 为 : 改 良 M s + N 6 节基 腺嚓 吟 (6一B A )
1
.
0 m g / L + 蔡乙酸 0 . 4 m g / L + 维生素 C 2 . 0 m g / L +
核黄素 7 , 0 m g / L + 蔗糖 30 9 / L + 琼脂 3 . 75 9 / L ,
p H 值 5 . 8 一 6 . 0 ; 全暗培养 12 d 后 , 在温度 26 士
2 ℃ , 光照 12 h / d , 光照强度 1 5 00 一 2 0 0 0 l x 条
件下培养 15 do
外植体萌芽后 , 侧芽和不定芽不断生长 , 萌芽
20 d后 , 选取没有污染的无菌芽 , 切割后转入继代增
殖培养基上 , 继代增值培养基为 : 改良 M S + N 6 节基
腺嚓吟 (6一 B A )0 . 5 m g / L + 茶乙酸 0 . 15 m g / L + 核
黄素 7 . 0 m g / L + 维生素 C 2 . 0 m g / L + 蔗糖 30 9 / L +
琼脂 3 . 75 9 / L , p H 值 5 . 8 一 6 . 0 ; 在温度 26 士 2 ℃ ,
光照强度 2 0 0 0 一 2 5 0 0 l x 条件下培养 18 d , 以促
进丛芽增殖和生长 , 在增殖培养基上反复继代培养 ,
无菌芽苗数量不断增多 。
.3 3 根系培养
当继代培养的芽苗长到 2 一 3 c m , 并有 3 一 4 对
叶片时 , 切取芽苗转入生根培养基上培养 。生根培养基
为 : 1/ 2改良M S + A B T , 0 . 6 m g / L + BI A 0 . 1 m g / L +
蔗糖 1 5 9 / L + 琼脂 3 . 9 9 / L , p H 值 5 . 8 一 6 . 2 ; 温
度 2 8 一 3 0 ℃ , 光照强度 1 2 0 0 一 l 万0 0 l x 培养 1 0 d ,
当切 口冒出短根或根点 , 出根率达到 6 0% 一 7 0% 时 ,
移瓶至温度 28 一 3 5℃ , 光照强度 3 0 0 一 5 0 0 玫
的自然光下培养 1万 do
生根齐全 , 苗高 3 一 4 c m 的生根瓶苗 , 洗去琼
脂 , 移栽至用 K M n O 、 消毒过的黄心土和蛙石做基质
的营养杯或轻基质育苗杯上 , 黄心土和蛙石的比例为
5 : 1
, 培养 80 d , 得到再生植株 。
4 粗皮按组培快繁技术的价值
采用粗皮按优 良家系的优 良单株萌芽作为外植
体 , 组培无菌芽获得方式是由芽器官 (带潜伏芽的茎段 )
离体诱导丛生芽 , 不经过愈伤组织途径 , 无菌芽诱导过
程中没有经过脱分化过程 , 培育的组培苗遗传性状稳
定 , 能够完整保持母树的遗传特性 , 不易发生变异 。
粗皮按 的组培快繁方法操作难度低 、 生产成本
低 , 生根率高达 万0% 以上 , 生产的组培苗成活率高 ,
易于在大范围内推广使用 。 采用组培快繁方法 , 可以
获得大量整齐一致 、 遗传性状稳定的再生植株 , 试验
结果稳定 , 重复性良好 , 可应用于大规模商品化育
苗 , 苗木能够保持优树的优良遗传性状 , 适合大面积
区域种植 。 另外 , 在此基础上 , 也可以进行粗皮按的
转基因育种 。
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