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狼毒大戟抗菌抗病毒作用初步研究
王学林1 ,邓旭明1 ,袁书智2 ,陈志宝3 ,高　丰1 ,柳巨雄1 ,丁艳丽1 ,闫继业1
( 1. 中国人民解放军军需大学 ,吉林长春　 130062;
2. 中国人民解放军军需大学军事兽医研究所 ; 3. 黑龙江八一农垦大学 )
摘要: 　通过对狼毒大戟的抗菌、抗病毒及药物毒性进行了初步研究表明 ,狼毒大戟提取物对
大肠杆菌、沙门氏杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌的 MIC值分别为: 25 mg /ml、 12. 5
mg /ml、 12. 5 mg /ml、 12. 5 mg /ml、 3. 125 mg /ml。对 NDV、 CPV的最大抑制率为 53. 68% 、 53. 96%。
结果证明狼毒大戟对细菌、病毒有抑制作用。
关键词: 　狼毒大戟 ;抗菌 ;抗病毒
中图分类号: S859. 7　　　文献标识码: A　　　文章编号: 1000-6354( 2001) 06-0005-03
　　狼毒大戟为狼毒的一种。性味辛、平、有毒〔1〕。具
有逐水去痰 ,破疾杀虫之功效。治水肿 ,胀 ,痰 ,积食 ,
心腹疼痛 ,慢性气管炎 ,咳嗽 ,气喘 ,淋巴结、皮肤、
骨、附睾等结核 ,瘘痔。其植化研究结果表明 ,狼毒大
戟的根含有甾醇酚性成分、氨基酸、萜类及有毒的高
分子有机物 ,并可能含有蒽甙。其酚性成分主要为狼
毒素和 7—甲氧基狼毒素〔2〕 ,近几年来 ,狼毒大戟在
人医临床上备受关注 ,据报道它具有抗癌作用〔3〕。但
目前尚未见狼毒大戟在兽医临床应用及药理研究的
报道 ,为此进行了研究其对兽医临床常见病原细菌、
病毒的作用的研究。 现将研究报告如下。
1　材料与方法
1. 1　中草药
用水煮醇沉法提取狼毒大戟提取物一份 ,每毫
升相当于 1 g生药。
1. 2　实验动物
小白鼠 ( 18～ 22 g ) ,购自中国人民解放军军需
大学实验动物中心。
1. 3　菌种
大肠杆菌 C 8309、猪霍乱沙门氏菌 C79-74、金黄
色葡萄球菌 C 56000、绿脓杆菌 10101、变形杆菌
49005均购自中国兽药监察所。
1. 4　抑菌试验
选用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、猪霍乱沙门氏
菌 、变形杆菌、绿脓杆菌作为受试菌株 ,将狼毒大戟
提取物稀释为不同浓度 ,应用试管法测定药物的最
小抑菌浓度 ( M IC) ,并设细菌对照和空白对照。
1. 5　病毒和细胞
鸡新城疫病毒 [ NDV ND-IV ( usota ) ]及犬细小
病毒 ( CPV )均来自中国兽药监察所 ,猫胎肾传代细
胞 ( F81)由中国人民解放军军需大学军事兽医研究
所惠赠 ,用于培养 CPV ,传代时用含 10%小牛血清
的 M EM,维持液换以 2%的小牛血清的 M EM。成纤
维细胞 ( FB )原代培养使用含 10%小牛血清的
MEM,维持液换以 2%的小牛血清的 M EM。
1. 6　狼毒大戟提取物在细胞上使用浓度的选择
取狼毒大戟提取物 ,用细胞维持液作适当稀释 ,
经混和纤维素微孔滤膜 (孔径 25μm)滤过 ,加入已
长成单层细胞的 96孔细胞培养板中 , 37℃、 5% CO2
环境中培养 72 h选择对细胞的最大无毒浓度。
1. 7　抗病毒实验〔3～ 7〕
1. 7. 1　病毒滴定　按常规方法分别在 F 81、 FB上
测定 CPV、 N DV的 TCID50。
1. 7. 2　细胞病变抑制实验　在长成单层细胞的 96
孔细胞培养板上分别感染 100个 TCID50的 CPV、
NDV加不同稀释度的可耐受药液观察 CPE,计算
IC50。
1. 7. 3　药物对病毒增殖的影响　将 10- 1～ 10- 8稀
52001年第 6期DOI : 10. 13823 /j . cnki . jtcvm. 2001. 06. 002
释的 C PV、 NDV分别加入单层细胞 F81、 FB中 , 37
℃、 5% CO2培养箱中感作 2 h,弃去毒液 ,加入含相
应药物浓度的维持液 ,对照组换以不含药物的维持
液继续培养 ,测定实验组与对照组的 TCID50 ,计算抑
制指数和抑制率。
1. 8　毒性试验〔8〕
取小白鼠 60只 ,随机分为 6组 ,每组 10只 ,雌
雄各半。 根据预试验结果 ,将药物以 1. 16倍的比率
分成 5个剂量组 ,按剂量给每组小白鼠灌胃 ,观察 48
h内的各剂量组死亡情况。 并设空白对照组。
2　结果
2. 1　狼毒大戟提取物的抑菌效果
根据表 1结果 ,经计算狼毒提取液对大肠杆菌、
沙门氏杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌
的 M IC值分别为 25. 000 mg /ml、 12. 500 mg /m l、
12. 500 mg /ml、 12. 500 mg /ml、 3. 125 mg /ml。
表 1　狼毒大戟提取物对五种细菌的作用
菌株　 药物稀释倍数
10 20 40 80 160 320 640
大肠杆菌 - - - + + + +
沙门氏菌 - - - - + + +
绿脓杆菌 - - - - + + +
变形杆菌 - - - - + + +
金黄色葡萄球菌 - - - - - - +
2. 2　狼毒大戟对细胞的最大无毒浓度
以稀释倍数表示 ,详见表 2。
表 2　狼毒大戟提取物对细胞的最大无毒浓度
细胞 药液稀释倍数
F81 40
FB 40
2. 3　狼毒大戟的抗病毒实验结果
表 3　狼毒大戟提取物对 NDV、 CPV在 CB、 F81细胞增殖影响
药物稀
释倍数
NDV
TCID50 抑制指数 抑制率 /%
CPV
TCID50 抑制指数 抑制率 /%
40 3. 3769 3. 9131 53. 68 3. 2550 3. 8150 53. 96
80 4. 1034 3. 1866 43. 71 3. 4467 3. 6233 51. 67
160 4. 1638 3. 1262 42. 86 3. 9831 3. 0869 43. 66
320 4. 3403 2. 9497 40. 46 5. 2050 1. 8650 26. 38
640 4. 9437 2. 3463 32. 16 5. 6617 1. 4083 20. 63
960 5. 0647 2. 225 30. 53 6. 4137 0. 6560 9. 28
病毒对照 7. 2900 0. 0000 7. 0700 0. 0000
　　狼毒大戟提取物对 N DV、 CPV的 IC50分别为 1
∶ 505. 6、 1∶ 430. 5。狼毒提取物对 NDV、 CPV增殖
影响见表 3和图 1、图 2。
2. 4　狼毒大戟 LD50的测定结果
应用寇氏改良法计算狼毒提取物对小白鼠的
LD50为 33. 42g /kg (见表 4)。
表 4　狼毒大戟提取物 LD50的测定结果
剂量组编号 1 2 3 4 5 6
　给药剂量
　 /g· 10g- 1 0 0. 25 0. 29 0. 335 0. 39 0. 45
受试动物数 /只 10 10 10 10 10 10
死亡动物数 /只 0 0 2 5 8 10
3　讨论
狼毒为常用中药 ,史载于《神农本草经》 ,古今均
有异物同名现象存在。 目前全国各地所用狼毒的原
植物发现的有 3科 12种 (变种、变型 ) ,狼毒大戟 [ E.
fischeriana Steud( E. pa llasii. b) ]是其中主要商品〔9〕。
狼毒具有散结杀虫之功效〔10〕 ,有一定毒性 ,近年来 ,
民间广泛用于抗肿瘤、抗结核及治疗皮肤病 ,并从中
分离出一系列具有较强药理活性的有效成分 ,其药
理作用研究结果表明狼毒确有抗肿瘤、抗菌、镇痛、
增强小肠的蠕动 ,并有杀蛆、灭孑孓等作用〔11〕 ,但尚
未见以狼毒为原料作为治疗制剂的报道。
狼毒在兽医临床上应用及药理作用尚未见报
道。 因而我们根据狼毒在人医临床上的应用及研究
基础探索它作为兽药的药用价值 ,初步试验结果表
明 ,狼毒大戟水提液对大肠杆菌、沙门氏杆菌、绿脓
杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌 MIC值分别为
25. 000 mg /m l、 12. 500 mg /ml、 12. 500 mg /ml、 12.
500 mg /ml、 3. 125 mg /m l。 对 NDV、 C PV的最大抑
制率为 53. 68% 、 53. 96%。由于上述细菌病毒均分离
自兽医临床 ,提示狼毒可能在兽医抗感染方面有一
定应用价值。
参 考 文 献
6 中兽医医药杂志 　 J TCVM
药物稀释倍数
图 2　狼毒大戟提取物在 FB细胞上抗 N DV活性
药物稀释倍数
图 1　狼毒大戟提取物在 F81细胞上抗 CPV活性
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蜂胶提取物对离体山羊虱的药效试验研究
梁崇礼1 ,李海山2 ,赵稳兴1 ,李树荣3 ,沈　毅1 ,郭　海1 ,陈志龙1
( 1. 成都军区昆明总医院医学动物实验中心 ,云南昆明 650032; 2.云南省药品检验所 ; 3.云南农业大学 )
摘要: 　用 0. 10% 、 0. 30% 、 0. 50% 、 0. 75% 、 1. 00%和 1. 50% 6个不同浓度的蜂胶提取液对离
体山羊虱进行药效筛选试验 ,探讨了蜂胶提取物对离体山羊虱的灭虫效果。 实验结果表明 1. 00%
的蜂胶提取液对离体山羊虱的灭虫效果较好 (P < 0. 01) , 0. 75%最好 (P < 0. 001)。
关键词: 　蜂胶 ;药效 ;山羊颚虱
中图分类号: S859. 7　　文献标识码: A　　文章编号: 1000-6354( 2001) 06-0007-03
72001年第 6期