全 文 ：表 1　两种仙人掌提取物对荷 S180瘤小鼠的抑瘤作用(–x±s)
组别 剂量 C /g kg- 1 瘤重 C /g 抑瘤率(%)
生理盐水 0. 2m l /只 2. 13±0. 12 -
醇提取物 0. 30 0. 59±0. 24* 72. 30
水提取物 0. 30 0. 64±0. 31* 69. 95
环磷酰胺 0. 03 0. 48±0. 45* 77. 46
　　与对照组比较 , *P<0. 01, n=10
表 2　两种仙人掌提取物对 EAC小鼠存活期的影响(–x±s)
组别 剂量 C /g kg- 1 瘤重 /g 抑瘤率(%)
生理盐水 0. 2m l /只 15. 12±3. 14 -
醇提取物 0. 30 23. 76±2. 41* 57. 14
水提取物 0. 30 21. 56±3. 23* 43. 92
环磷酰胺 0. 03 20. 98±1. 04* 38. 76
　　与生理盐水组比较 , *P<0. 01, n=10
　 从表 1 ～ 2可见 , 两种仙人掌提取物不仅具有抗肿瘤效果 ,而
且也能延长小鼠的存活期。给药组的抑瘤率和生命延长率均高
于生理盐水组 , 与对照组比较 , 有显著的差异性(P <0. 01)。
3　讨论
小鼠肉瘤(S180)和艾氏腹水瘤(EAC)是抗肿瘤药物筛选实
验中常用的动物移植性肿瘤模型。本实验结果表明 ,两种仙人掌
提取物具有抑制动物体内移植性肿瘤的生长作用 ,其抑瘤率分别
为 72. 30%和 69. 95%,与对照组相比差异有显著性(P <0. 01);
两种仙人掌提取物也能延长荷氏腹水瘤 (EAC)小鼠的生存时
间 , 生存时间延长率分别为 57. 14%和 43. 92%,与对照组相比差
异有显著性(P <0. 01)。从实验结果看出 , 无论是抑瘤率还是生
命延长率 , 醇提取物作用强于水提取物 , 这可能是提取方法不同 ,
其所含的成分不同而导致的 ,但可初步认为仙人掌提取物具有一
定的抗肿瘤作用。
实验表明 , 仙人掌提取物具有一定的镇痛和镇静作用。从本
实验中也看出 ,仙人掌药物组小鼠的精神状态和鼠毛的光泽度均
好于对照组 , 也比较安静。总之 , 仙人掌提取物具有镇痛和镇静
作用 , 又有一定的抗肿瘤作用。因此 ,可作为一种有前途的镇痛
和抗肿瘤药物进行研究和开发。本实验用的是仙人掌粗提取物 ,
其抗肿瘤作用的有效成分和机制有待进一步研究。
参考文献:
[ 1 ] 　全国中草药汇编编写组. 全国中草药汇编 [ M ] .北京:人民卫生出
版社 , 1975:275.
[ 2 ] 　覃特营 ,韦国锋.仙人掌提取物三萜皂甙镇痛作用的研究 [ J] .右江
民族医学院学报 , 1995, 17(4):339.
[ 3 ] 　韦启后 ,韦国锋 ,黄祖良 ,等.仙人掌提取物对狗降血压作用的实验
研究 [ J] .右江民族医学院学报 , 2003, 25(6):281.
[ 4 ] 　韦启后 , 韦国锋 ,覃淑云 , 等.仙人掌提取物对荷瘤 S180小鼠免疫
功能的影响 [ J] .右江民族医学院报 , 2004, 26(5):625.
制剂与炮制
收稿日期:2006-02-28;　修订日期:2006-08-08
基金项目:广东省肇庆市科技局基金资助项目(No. 203E501)
作者简介:段志芳 (1973-),女(汉族),河南安阳人 ,现任肇庆学院生物系
讲师 ,博士学位 ,主要从事天然产物化学研究与开发工作.
超声波法提取溪黄草中总二萜的最佳工艺研究
段志芳 , 陈庆华
(广东肇庆学院生物学系 ,广东 肇庆　526061)
摘要:目的 研究超声波法提取溪黄草中总二萜的最佳工艺。 方法 以冬凌草甲素为对照品 , 采用紫外分光光度法测定
溪黄草各提取液中总二萜含量 ,通过单因素及正交试验考察超声波法提取溪黄草总二萜的主要影响因素 , 确定最佳工艺
条件。结果 超声波法的最佳提取条件为:使用 60%乙醇 ,在温度 80℃, 料液比 1∶35条件下提取 30 m in,连续提取 2次 ,
二萜类化合物的总提取率可达 99. 86%。结论 超声波法提取溪黄草中总二萜的提取率高 ,效果好 , 测定方法简单可行。
关键词:超声波;　溪黄草;　二萜
中图分类号:R284. 2;Q946　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)12-2436-02
Optmi um U ltrasonic Technology on Extracting D iterpenoids from Rabdosia serra(Max-
mi . )Hara
DUAN Zhi - fang, CHEN Q ing - hua(Department of B iology , Zhaoqing University, Zhaoqing 526061, China)
Abstract:Object ive To study the u ltrasonic ex trac tion te chno logy on diterpeno ids from Rabdosia serra(M axim. )H ara. M ethods
The orthogona l test conditions of u ltra son ic ex traction o f dite rpenoids we re studied. The conten t o f dite rpeno idsw as dete rm ined by
UV - spec tropho tom etry using oridonin a s a standa rd. R esu lts Acco rding to the o rthogona l design, the op tim um cond itionsw ere ob-
tained. The results show ed that 1∶35 o f 60% ethanol to theRabdosia serra(Maxim. )Hara. w eight ra tio w as used w ith u ltrasonic
treatm ent for 30 m in a t80℃ for two tim es and the average ex trac tion ratew as as high as 99. 86%. Conc lu sion The ultrasonic ex-
tracting rate of d iterpeno ids is high. The analyzing me thod is sim ple and re liable.
Key words:U ltrasonic;　Rabdosia serra(M ax im . ) H ara;　Diterpeno ids
　　溪黄草 Rabdosia serra (M ax im) H ara属于唇形科香茶属植
物 , 是一种多年生小草本。 具有清热祛湿 、凉血散瘀 、抗肿瘤 、抗
菌 、消炎作用及对肝脏的保护作用 ,临床用于治疗乙型肝炎 、急性
黄疸型肝炎 、急性胆囊炎 , 治疗跌打 、痈肿等症 [ 1] 。 近年来 , 中药
溪黄草在华南各地临床上广为应用 ,并出现了一些以其为主要原
料的保健产品 ,具有较大的开发应用前景 [ 2] 。
溪黄草主要成分为萜类 、黄酮类 、酚类和氨基酸等。据文献
报道 , 溪黄草中的萜类主要为对映 -贝壳杉烷型二萜化合物 , 是
具有抗癌活性的化合物 [ 3 , 4] 。此类化合物的分子结构式都存在
一个环外 α-亚甲基环戊酮结构 , 这种结构具有较大的内应力 ,
是一个抗癌活性区 [ 5, 6] 。 此结构与冬凌草甲素极为相似。说明
冬凌草甲素与溪黄草二萜类化合物在同一波长处具有相似的紫
外吸收特征峰。由于目前获得溪黄草二萜类化合物标准品的技
术难度大 ,可以用冬凌草甲素为标准品 , 采用紫外 -分光光度法
对溪黄草超声波法提取物的总二萜含量进行测定 [ 7] 。
用超声波法提取中药有效成分是近年发展起来的一种新方
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 12期 LISH IZHEN MEDIC INE AND MATERIA M EDICA RESEARCH 2006 VOL. 17NO. 12　
法 , 目前尚未见用此方法对二萜类化合物进行提取 , 本研究通过
单因素及正交试验考察了超声波法从溪黄草中提取二萜类化合
物的主要影响因素 , 研究了最佳提取工艺条件 , 期望探索一种快
速 、简便 、提取率高的总二萜的提取方法。
1　仪器与材料
1. 1　仪器 KQ -50E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公
司 , 频率:40KH z);UV - 2550型紫外 -可见分光光度计 (日本岛
津);FA2004N型 、 JA5003N型电子天平 (上海精科);101 - 2AS
恒温干燥箱(上海迅能电热设备有限公司);HH - 4数显恒温水
浴锅(常州国华电器有限公司);DJ -10A型粉粹机(上海淀久中
药机械制造有限公司 )。
1. 2　材料与试剂 溪黄草全草 Rabdosia serra(M ax im. )H ara购自
广东肇庆市中药市场 ,由肇庆学院生物系植物教研室鉴定;冬凌
草甲素标准品购自陕西旭煌植物科技发展有限公司;所用试剂均
为国产分析纯;实验用水为二次蒸馏水。
2　方法
2. 1　索氏法提取溪黄草中的总二萜 准确称取 0. 50 g溪黄草粉
末 , 用无水乙醇进行索氏提取至无色 ,提取液抽滤 , 定容 , 作为待
测液。
2. 2　超声波法提取溪黄草中总二萜 提取工艺流程:溪黄草→粉
碎(过筛)→按一定料液比加提取剂浸润→超声处理→抽滤→定
容→取样检测提取率
准确称取 0. 50 g溪黄草粉末于 50 m l具塞三角烧瓶中 ,按要
求加入一定量的提取剂 , 在一定温度下超声波辅助提取一定时
间 , 抽滤 ,加相应提取剂定容 , 作为待测液。
2. 3　提取液中总二萜的含量测定
2. 3. 1　对照品溶液的制备 精密称取冬凌草甲素(60℃下干燥 6
h)对照品 5. 50 mg, 用 95%乙醇溶解 ,定容至 50 m l容量瓶中 ,即
得对照品溶液;分别量取 0. 5, 1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0, 5. 0 m l置于 10
m l容量瓶中 , 用 95%乙醇定容至刻度 , 获浓度分别为 5. 50,
11. 00, 22. 00, 33. 00, 44. 00, 55. 00 m g /L冬凌草甲素标准液。
2. 3. 2　测定波长的选择 取浓度为 33. 0 mg /L对照品溶液 , 以
95%乙醇为空白溶媒 , 在 200 ～ 700 nm范围内扫描 , 237 nm处有
最高吸收峰 , 测定其吸光度 A, 并确定测试波长为 237 nm。
2. 3. 3　标准曲线的绘制 取系列浓度标准品溶液 , 以 95%乙醇
为空白溶媒 , 在 237 nm处测定其吸光度 A。结果见表 1。
表 1　标准曲线测定值
浓度 C /m g L - 1 A
5. 50 0. 405
11. 00 0. 679
22. 00 1. 210
33. 00 1. 761
44. 00 2. 303
55. 00 2. 817
　 可看出浓度在 5. 50～ 55. 00 mg /L范围内吸光度和浓度呈良好线
形关系 ,工作曲线方程为:A=0. 048 88C+0. 140 03, r=0. 999 91。
2. 3. 4　各提取液中总二萜的含量的测定 精密取 0. 1 m l各待测
液用相应浓度溶剂稀释定容至 25 m l,用 2. 3. 3中方法测其吸光
度 , 由工作曲线方程可得相应浓度 , 并计算提取液中总二萜的
含量。
3　结果
常温提取条件下 ,用单一溶剂提取 , 无水乙醇效果最好 , 水 、
正丁醇 、乙酸乙脂和苯也有较好的浸取效果 [ 7] , 从溶剂的经济和
节约角度考虑 , 本实验选择一定浓度的乙醇溶液作为提取剂 ,主
要讨论乙醇浓度 、料液比 、超声波辅助提取时间和提取温度对总
二萜提取率的影响。由于常法乙醇提取效果好 ,本实验以无水乙
醇作溶剂 、索氏法提取的总二萜含量作为比较标准。
3. 1　索氏提取法中总二萜的含量测定 由 2. 3. 4求出索氏法所
得提取液中总二萜浓度 , 由此得出溪黄草总二萜含量为 2. 765%
(以此作为超声波法提取液中总二萜的比较标准 , 得到各提取液
的相对提取率)。
3. 2　超声波提取法中单因素实验
3. 2. 1　乙醇浓度对总二萜提取率的影响 在 0. 50 g样品中 , 分
别加入水 , 20%, 40%, 60%, 80%乙醇 10 m l, 40℃超声波辅助提
取 20 m in,按 2. 3. 4测定其含量 ,由此得到总二萜相对提取率与
乙醇浓度的关系如图 1所示。
图 1　乙醇浓度对提取率的影响
　 从图 1可以看出:总二萜的提取率开始随着乙醇浓度的增大
而增大 ,当浓度达到 60%时 , 总二萜的提取率最大;当乙醇浓度
再增大时 ,提取率反而下降 , 所以从溶剂成本和提取率考虑 ,乙醇
浓度最好控制在 40% ～ 60%为佳。
3. 2. 2　料液比对总二萜提取率的影响 在 0. 50 g样品中 , 分别
加入 5, 10, 15, 20, 25 m l 60%乙醇 , 40℃超声波辅助提取 20 m in,
按 2. 3. 4测定其含量 ,由此得到总二萜相对提取率与料液比的关
系如图 2所示。
图 2　料液比对提取率的影响
　 从图 2可以看出:总二萜的提取率开始随着料液比的增大而
增大 , 当料液比达到 1∶40时 ,总二萜的提取率最大;当料液比再
增大时 , 提取率反而下降 , 所以料液比控制在 1∶ 30 ～ 1∶ 40
为佳。
3. 2. 3　超声波辅助提取时间对总二萜提取率的影响 在 0. 50 g
样品中 ,分别加入 20 m l60%乙醇 , 40℃超声波辅助分别提取 10,
20, 30, 40, 50 m in, 按 2, 3, 4测定其含量 , 由此得到总二萜相对提
取率与超声波辅助提取时间的关系如图 3所示。
图 3　超声时间对提取率的影响
　 从图 3可以看出:提取时间在 10 ～ 30 m in之间时 , 总二萜的
提取率变化较大 ,延长提取时间 , 提取率反而下降 ,所以提取时间
控制在 30 ～ 40 m in为佳。
3. 2. 4　超声波辅助提取温度对总二萜提取率的影响 在 0. 50 g
样品中 ,分别加入 20 m l 60%乙醇 , 分别在 40, 50, 60, 70, 80℃超
声波辅助提取 30 m in,按 2. 3. 4测定其含量 , 由此得到总二萜相
对提取率与超声波辅助提取温度的关系如图 4所示。
　 从图 4中可以看出:随超声波提取温度的升高总二萜的提取
率逐渐增大 ,所以提取温度选择在 60 ～ 80℃。
3. 3　超声波提取法中正交实验 由于提取率实际上是受到乙醇
浓度 、溶剂用量 、超声波辅助提取时间和温度 4个因素交叉影响 ,
而以上所做的都是单因子影响 , 为了全面考察这 4个因素的影
响 , 设计了 4因素 3水平正交实验(L9 34)。结果见表 2。
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LISH IZH EN MEDIC INE AND MATERIA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 12 时珍国医国药 2006年第 17卷第 12期
图 4　超声温度对提取率的影响
表 2　L
9
(34)正交设计及极差分析结果
实验
号
A乙醇
浓度(%)
B
料液比
C超声
温度 T /℃
D超声
t /m in
总二萜相对
提取率(%)
1 40(1) 1∶30(1) 60(1) 30(1) 66. 10
2 40(1) 1∶35(2) 70(2) 35(2) 68. 42
3 40(1) 1∶40(3) 80(3) 40(3) 64. 39
4 50(2) 1∶30(1) 70(2) 40(3) 72. 41
5 50(2) 1∶35(2) 80(3) 30(1) 91. 09
6 50(2) 1∶40(3) 60(2) 35(2) 70. 90
7 60(3) 1∶30(1) 80(3) 35(2) 92. 86
8 60(3) 1∶35(2) 60(1) 40(3) 95. 83
9 60(3) 1∶40(3) 70(2) 30(1) 97. 92
K 1 66. 30 77. 12 77. 61 85. 04
K 2 78. 13 85. 11 79. 58 77. 39 最优为
K 3 95. 54 77. 74 82. 78 77. 54 A3B2C3D1
R 29. 24 7. 99 5. 17 7. 65
　 从表 2中可以看出:乙醇浓度对总二萜提取率影响最大;超声
波辅助提取时间 、提取温度及料液比对提取率的影响不明显。超
声波法最佳提取条件为 A 3B2C3D1 , 即使用 60%乙醇 、在温度
80℃、料液比 1∶35条件下超声提取 30 m in。各因素对总二萜提
取效果的主次顺序依次为乙醇浓度 A >料液比 B >超声波辅助
提取时间 D>超声波辅助提取温度 C。
3. 4　超声波法浸提次数的确定 按上述 A3B2C3D1方案进行超
声提取。结果见表 3。 由表中可知:超声波提取次数越多 , 总
二萜累计提取率就越高 ,但提高幅度显著降低 , 第3次总二萜提取
率只有 0. 11%, 因此只需提取 2次 ,取可将 99. 86%以上的总二
萜化合物从溪黄草中提取出来。
表 3　浸提次数实验数据 %
提取次数 总二萜含量 相对提取率 累计提取率
1 2. 75 99. 46 99. 46
2 0. 011 0. 40 99. 86
3 0. 003 0. 11 99. 97
4　结论
　 本文研究了超声波法提取溪黄草总二萜的工艺。结果表明超
声波法的最佳提取条件为:使用 60%乙醇 、在温度 80℃、料液比 1
∶35条件下超声波提取 30 m in。在最佳条件下提取 , 超声波法
的单次总二萜相对提取率可达 99. 46%, 连续提取 2次 , 二萜类
化合物的总提取率可达 99. 86%。
本法的总二萜提取率高 , 可节省大量的时间和溶剂 , 使生产
成本降低 , 提高了经济效益 , 为开发利用该资源提供了有益的
参考。
参考文献:
[ 1 ] 　江苏新医学院. 中药大辞典 , 下册 [M ] . 上海:上海科学出版社 ,
1977:25.
[ 2 ] 　吴剑峰.溪黄草的研究综述 [ J] .时珍国医国药 , 2003, 14(8):498.
[ 3 ] 　金人玲 ,程培元 ,徐光漪.溪黄草甲素的结构研究 [ J] .药学学报 ,
1985, 20(5):366.
[ 4 ] 　Fu jita Tetsu ro, Takeda, SunH andong et a.l C ytotoxic ant i- tum or act ivi-
ties of Rabdosia diterpenoid s[ J] . PlantaM ed, 1988:414.
[ 5 ] 　陈元柱 ,吴兹武 ,程培元.天然萜类分子中部分共轭五员环的内应
力与抗肿瘤活性 [ J] .有机化学 , 1987, 7(1):21.
[ 6 ] 　居学海 ,翟宇峰 ,翟锦库 ,等.溪黄草中三种活性组分的电子结构与
抗癌活性 [ J] .郑州大学学报自然科学版 , 1997, 29(3):80.
[ 7 ] 　邓　韵 ,蔡妙颜 ,田　野 ,等.溪黄草不同溶剂提取物中总二萜含量
的测定 [ J] .现代食品科技 , 2005, 21(2):153.
收稿日期:2006-01-16;　修订日期:2006-08-07
基金项目:广东省中医药局科研资助项目(No. 102042)
作者简介:吴晓松 (1960-),女(汉族),湖南冷水江人 ,现任暨南大学附属
第一医院主任药师 ,学士学位 ,主要从事药剂学工作.
乙酸龙脑酯滴丸制备工艺研究
吴晓松 1 , 徐珍霞2 , 张志东 1
(1.暨南大学附属第一医院 ,广东 广州　510630;　2.暨南大学药学院 ,广东 广州　510632)
摘要:目的 对乙酸龙脑酯滴丸的制备工艺进行研究。方法 采用正交实验法研究滴丸成型的最佳工艺条件。结果 以
选择 PEG4000∶PEG6000(2∶1)混合液作为基质 , 药物∶基质以 1∶4配比 , 料温为 70℃, 液体石蜡为冷却剂 , 冷凝液温
度为 10℃, 滴口内外径为 2. 5 /2. 9(mm /mm),滴口距冷液面 3 cm ,滴速 40 d /m in为最佳条件。结论 该工艺可为乙酸龙
脑酯滴丸的制备提供实验依据。
关键词:乙酸龙脑脂;　滴丸;　正交实验
中图分类号:R283. 6　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)12-2438-02
Study on Preparing Technology of BornylAcetateDropp ing P ills
WU X iao-song1 , XU Zhen-xia2 , ZHANG Zh i-dong1
(1. The F irst Affiliated Hosptial of J inan Un iversity , Guangzhou 510630, China;2. Pharmaceutica l College of
J inan University , Guangzhou 510632, China)
Abstract:Objective To study the technologica l preparation o f Bo rny1 Ace ta te D ropp ing P ills. Methods Orthogonal testw as ap-
p lied to op tim ize the p repa ra tion o f Bo rny lA ce tate dropping p ills. Resu lts The optim ized pro ject w as as fo llow s:the m a trix con-
tained PEG4000∶PEG6000(2∶1);the ra te o f Bo rny l Aceta te to ma trixw as 1∶4 and the tem pe ra ture o f lim onene was 70℃. The
re frigeran tw as liquid pa raffin;the in te rna l and ex te rnal diame ters o f bu re tte w ere 2. 5 mm and 2. 9mm, re spec tive ly. The bu re tte
w as 3cm above the su rface of refrige rant;drugw as dropped into re frigeran t o f 10℃ at 40 d rops perm inute. Conc lu sion The results
prov ide the data fo r the a sce rtainm en t o f shap ing ope ra tion o f Borny1 A ce tate D rop ing P ills at them anufac turing sca le.
Key words:Bo rny1 Aceta te;　Dropping pills;　O rthogona l design
　　乙酸龙脑酯是临常用中药砂仁挥发油中的主要成分 ,含量可
高达 80%以上 [ 1] , 属双环茨烷单萜化合物 , 结构和性质稳定 , 不
溶于水 ,有异味。研究文献报道了乙酸龙脑酯的药理作用 , 证明
乙酸龙脑酯有行气止痛和抗炎的作用 [ 2] 。为了进一步研究其药
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