全 文 ：J.SHANXI AGRIC.UNIV.(Natura l S cience Ed i tion)
学报(自然科学版)2009 , 29(6) 002596
收稿日期:2009-11-10　　　修回日期:2009-11-20
作者简介:李少华 (1965-), 女 (汉), 河北石家庄人 , 讲师 , 硕士 , 主要从事生物学方面的研究。
通讯作者:曹挥 , 教授。 T el:0354-6289495;E-m ail:liusq71@163.com
基金项目:山西农业大学引进人才项目 (412564)
大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病
抑菌活性初步研究
李少华1 , 曹挥2 , 刘素琪2
(1.太原大学 外语师范学院 , 山西 太原 100100;2.山西农业大学 农学院 , 山西 太谷 030801)
摘　要:探索大戟狼毒的杀菌活性及活性成分 , 为新型植物源杀菌剂的研制和开发提供依据 , 以苹果树腐烂病原菌
为供试菌种 , 用生长速率法测定了大戟狼毒石油醚提取物的对病原菌的抑制率。结果表明:大戟狼毒石油醚提取物
对苹果树腐烂病菌病原菌丝生长有一定的抑制作用。其中提取物为 2 g · L-1的稀释液对苹果树腐烂病菌病原菌丝
生长的抑制作用最好 , 抑制率最高达到 94.0%。大戟狼毒提取物对苹果腐烂病菌具有很好的防治效果 , 极具有开
发潜力。
关键词:大戟狼毒;苹果树腐烂病;抑菌作用
中图分类号:S436.619　　文献标识码:A　　文章编号:1671-8151 (2009)06-0559-03
Study on Antifungal Activities of the Petroleum Ether Extract from Euphorbia f ischeriana S teud .A-
gainst Valsa Mali Miyabe et Yamada
LI Shao-hua1 , CAO Hui2 , LIUSu-qi2
(1.Foreign Language and Pedagogic College , Taiyuan University , Taiyuan Shanx i 100100 , China;2.College
of Agriculture , Shan xi Agricultural University , Taigu Shan xi 030801 , China)
Abstract:The purpo se of this wo rk is to explor e the pesticide pr ope rties of Euphorbia f ischeriana S teud.The re-
sear ch result w ill provide insight into the po tential use o f the ex trac t as a pesticide.In this test , the disc diffusion assay
was used to test the antifungal activity of the ex tract o f E uphorbia f ischeriana S teud against Valsa mali Mi yabe et
Yamada .The result indicated that the petro leum e ther ex tract of Euphorbia f ischeriana S teud has st rong antig funga l
activity ag ainst Valsa mali Miyabe et Yamada .The inhibition rates of the spores g ermination w ere 91.9%, 93% and
94.0%, r espectively in 1 d , 2 d and 3 d w henthe concentra tion of the petro leoum ether ex tract w as 2 g· L-1 Asarum
could be a po tential pe sticide against Valsa mali Miyabe et Yamada .
Key words:E uphorbia f ischeriana S teud.;Valsa mali Miyabe et Yamada;Inhibitor y action
　　随着人们健康意识的提高 , 农产品的安全性
倍受重视 , 对农药残留的要求也就十分严格 。植
物源农药便受到了青睐 。植物源农药又称植物性
农药 , 具有低毒 、低残留 、高选择性 、 有害生物
不易产生抗性 , 以及易与其它生物和非生物农药
相配合等优点而倍受全世界农药研究及应用部门
的重视。
我国药用植物资源十分丰富 , 已鉴定的种数
逾5 000种 , 其中有近千种植物对细菌和其它病原
微生物有抗菌作用 , 但已进行抗菌试验筛选的仅
占 1/6 左右[ 1] 。因此 , 从丰富的植物资源中寻找
新的杀菌 、抑菌活性物质 , 研发新型植物源杀菌
剂 , 是当今新农药开发的热点[ 2] 。
苹果树腐烂病 (Valsa mal i Miyabe et Yama-
da), 俗称烂皮病 , 臭皮病 , 是我国北方苹果树
主要病害 。主要为害 6 年生以上的结果树 , 造成
树势衰弱 、 枝干枯死 、 死树 , 甚至毁园 。华北 、
东北 、西北地区发生普遍。苹果树腐烂病为子囊
菌亚门黑腐皮壳属真菌为害所致 , 此病发生普遍 、
根治困难 、常造成死树乃至毁园[ 3] 。目前 , 防治
腐烂病的药剂有 3%多氧霉素 D锌盐可湿性粉剂 、
四霉菌素 、腐必清 、双胍辛胺 、 5%菌毒清水剂 、
40%福美胂可湿性粉剂 、 5%甲基胂酸铁胺 、
2.12%腐殖酸铜 、 30%腐烂敌 、 10%福美胂涂布
剂 (果康宝)等[ 3] 。
大戟狼毒 (Euphorbia f ischeriana S teud.)
俗称狼毒疙瘩 、 猫眼草 、 山红萝卜等 , 为大戟科
狼毒属植物 , 其根入药 , 为中药 “狼毒” 3 种原
植物之一。现代研究表明:大戟狼毒全株有毒 ,
根毒性大 , 可外用治头癣 , 杀鼠。全草含刺激性
乳汁 , 皮肤接触后 , 能引起水泡 , 误食引起口腔
咽喉的刺激 、 恶心 、 呕吐 、 出血性下痢 、 腹痛 、
出冷汗 、 面色苍白 、 血压下降 、 烦躁 , 严重时精
神失常 , 眩晕 、 站立不稳 、抽搐 、 痉挛 , 有时引
起死亡。还可杀蛆 、 灭孑孓[ 4] 。另有报道 , 将大
戟狼毒开发为植物农药用于驱虫 、 杀蝇 、 灭蛆 ,
防治农作物 、 饲料牧草上的害虫等[ 5 ～ 7] 。狼毒近
年来被用于生物农药 , 成效明显 。为此 , 本文用
大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病的生物活
性进行了测定 , 旨在为新型植物源农药的开发提
供基础。
1　实验材料与方法
1.1　供试材料
1.1.1　供试样品
试验所用大戟狼毒采自山西省金沙滩 , 将新
植物洗净后充分阴干 , 并置于烘箱内 45 ℃烘干 ,
粉碎后过 60目筛备用。
1.1.2　供试菌种
苹果树腐烂病菌原菌种均由山西农业大学农
学院植物病理实验室提供 。
1.1.3　培养基
实验所用培养基为 PDA 培养基 , 由去皮马
铃薯400 g , 葡萄糖35 ～ 40 g , 琼脂38 ～ 40 g , 蒸
馏水 2 000 mL 配制而成。
1.2　实验方法
1.2.1　大戟狼毒提取物的制备
称取大戟狼毒根部粉末 50 g 。装入 500 mL
广口瓶内 。加入干粉 5倍量的石油醚浸泡 2 ～ 3 d
后 , 过滤并浓缩至稠膏状 , (可反复浸提 3次)取
0.2 g 大戟狼毒石油醚提取物 , 加适量石油醚溶
解 , 并加几滴乳化剂 , 加无菌水配成 30 g · L-1
的溶液。
1.2.2　生物活性测定
采用生长速率测定法[ 8 , 9] , 用打孔器取 6 mm
菌落边缘生长茂盛的菌丝的菌种 , 放在加药的
PDA平台上培养 (药与培养基比为 1∶14), 以
培养基内加等量无菌水作为对照 , 每个处理重复
三次 , 置 25 ℃下培养。用十字交叉法测每个菌落
的两个直径 , 以其平均值代表菌落的直径 , 以下
式求出抑制菌丝生长率:菌丝生长抑制率%=
(对照菌落直径-处理菌落直径)/ (对照菌落直
径-0.6)×100%。
2　结果与分析
2.1　大戟狼毒提取物的抑菌活性
将大戟狼毒石油醚提取物配置成 2 g ·L-1的
含药 PDA 平板培养基进行生物活性测定。由表 1
可以看出大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病
菌的有一定的抑制作用 , 1 d , 2 d , 3 d的抑制率
分别为 91.9%, 93.0%, 94.0%。
表 1　大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病菌菌丝生长的抑制作用
Table 1　Antifungal activities o f the petro leum ethe r e xt ract f rom Euphorbia f ischeriana S teud against Valsa mali Miyabe
et Yamada
病原菌
Path ogens
浓度/ g· L -1
C oncent rat ion
/ g· L -1
菌落直径与抑制率/ cm , %
Colony Radius Radius and In habi ting rate/ cm , %
A (1d) B A (2d) B A (3d) B
苹果树腐烂病菌 2.000 0.80 91.9 0.92 93.0 0.92 94.0
CK 3.08 - 5.12 - 5.90 -
2.2　不同浓度大戟狼毒提取物对苹果树腐烂病菌
生长速率的影响
　　将大戟狼毒石油醚提取物配制成 5 个不同浓
度 (2.000 , 1.000 , 0.500 , 0.125 g ·L-1)的含
药 PDA 平板培养基进行生物活性测定 , 求出毒
力回归方程及抑制中浓度 (EC50), 结果见表 2与
表 3:对苹果树腐烂病菌的抑制作用都是随药剂
浓度的增大 , 抑制率增高 , 最高可达 92.5%。3 d
的 EC50为 0.43 g ·L-1 。
560 山 西 农 业 大 学 学 报 (自然科学版) 2009
表 2　不同浓度大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病菌菌丝生长的抑制作用
Table 2　Antifungal activ itie s of the different concentr ation of petr oleum ethe r e xtr act fr om Euphorbia f ischeriana S teud a-
gainst Valsa mali Miyabe et Yamada
病原菌
Path ogens
浓度/ g· L -1
C oncent rat ion
/ g· L -1
菌落直径与抑制率/ cm , %
Colony Radiu s and Inhibit ing rate/ cm , %
A (1d) B A (2d) B A (3d) B
苹果树腐烂病菌
2.000 0.65 92.5 1.00 89.4 1.15 91.9
1.000 0.65 92.5 1.05 89.9 1.25 90.5
0.500 0.67 89.6 1.00 89.4 1.40 88.3
0.250 0.70 90.0 1.40 78.9 2.13 77.5
0.125 0.88 57.5 2.00 63.0 3.05 64.1
CK 1.27 - 4.38 - 7.42 -
表 3　大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病菌的毒力
Table 3　Lethal dosage of the petr oleum ether ex trac fr om
Euphorbia f ischeriana S teud against myce lium
g row th of Valsa mali Miyabe et Yamada
处理 毒力方程 EC 50
g ﹒ L -1 相关系数 r
苹果树腐烂病菌 y =5.7125+1.9683x 0.43 0.9618
注:共 5个浓度 , 每个浓度 3次重复
Note:Total of five con cen t rat ion , each concent rat ion three repli-
cation s
3　结论与讨论
植物源杀菌剂是利用有些植物里含有的某些
抗菌物质或诱导产生的植物防卫素 , 杀死或有效
抑制某些病原菌的生长发育 。植物体内的抗菌化
合物是植物体产生的多种具有抗菌活性的次生代
谢产物 , 包含了生物碱类 、 类黄酮类 、蛋白质类 、
有机酸类和酚类化合物等。
从本实验的结果来看 , 戟狼毒石油醚提取物
对苹果树腐烂病菌有很好的毒力 , 3 d 的 EC50为
0.43 g ·L-1 , 5种浓度的抑制率均在 64%以上 。
其中浓度为 2 g · L-1的第三天抑制率仍达到
91.9%, 具有良好的抑菌活性。大戟狼毒中有毒
成分主要为大戟内酯 (jolkino lide)A 、 B , 狼毒
大戟甲 、 乙素 (f ischeriana A , B)等 , 并含大戟
醇 (eupho l), 皂甙 、 强心甙 、酚类及鞣质 , 但具
体抑菌活性成分是否为这些成分仍需进一步的分
离 、 鉴定 。
大戟狼毒广泛的分布于全国各地 , 资源丰富 ,
对其进行新型安全 、 高效的植物性杀菌剂的开发
有着十分广阔的前景。
参　考　文　献
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(编辑:武英耀)
56129 (6) 李少华等:大戟狼毒石油醚提取物对苹果树腐烂病抑菌活性初步研究