免费文献传递   相关文献

不同产地线叶龙胆生药鉴定学研究



全 文 :Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2012 Vol.25 No.10
中国科技 核心期刊
线叶龙胆 Gentiana farreri Balf.f. 为龙胆科
龙胆属植物,多年生草本,以全草入药,归肝胆经,
其性味苦寒,具有清热燥湿,泻火解毒,定惊,镇咳
之功,用于治疗湿热黄疸、喉痛、目赤、阴囊肿痛、
胆囊炎等病症[1],其有效化学成分主要为龙胆苦
苷和獐牙菜苦苷[2-3]。目前流通领域的线叶龙胆
多为野生品,无栽培品种,且多以土特产销售,商
品名为玉美人,在藏区多称为龙胆草、喇叭花,广
泛分布于甘、青、藏草原地带及高山草甸、山谷河
滩等区域,生长在海拔3050~4800米区域。其主
要产区为青海玉树、湟源、互助、祁连、门源;四川
阿坝;西藏灵芝、类乌齐县、八宿、当雄;甘肃夏河、
甘南、玛曲、马衔山等地。目前对该药的生药学研
究较少,为了对龙胆科植物进一步开发利用,本实
验选取甘肃、青海和西藏所产的七个线叶龙胆样品
(产地分别为甘肃夏河、甘南、合作、马衔山,青海
河南县、湟源,西藏灵芝),对其性状特征、显微特
征和理化鉴别等方面进行研究,为不同产地线叶
龙胆的生药鉴别与开发利用提供理论依据。
1 材料及仪器
1.1 材料 采集于甘肃、青海和西藏(甘肃夏河、
甘南、合作、马衔山,青海河南县、湟源,西藏灵芝)
的龙胆科龙胆属植物7个样品,经甘肃中医学院
药学系李成义教授鉴定均为线叶龙胆。
1.2 试剂 水合氯醛、稀甘油、硅胶 GF254、
CMC-Na、氯仿、蒸馏水、分析纯甲醇、色谱醇甲醇,
对照品:龙胆苦苷(110770-200712中国生物制品
检验所提供)、獐牙菜苦苷(0785-200203 中国生
物制品检验所提供)。
1.3 仪器 赛多利斯BS224S型电子分析天平
(北京赛多利斯仪器系统有限公司生产);奥林巴
斯CX21双目生物显微镜(日本OLYMPUS株式会社生
产);尼康80i;Basic Research数码显微成像分析
系统软件(日本Nicon株式会社生产)。
2 方法
2.1 来源鉴定 采集各产地线叶龙胆原植物,并
不同产地线叶龙胆生药鉴定学研究
宁艳梅1,刘高宏 2,张炜华 1,杨 韬 1△
1 甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000;2 甘肃省中医院
[摘 要]目的:通过对线叶龙胆的生药鉴定学研究,为不同产地线叶龙胆的生药鉴别与开发利用提供理
论依据。方法:对线叶龙胆进行植物来源鉴定、药材性状鉴定、显微鉴别、理化鉴定。结果:不同产地供试药材均
为同一种植物线叶龙胆,其药材性状无明显差别;全草粉末中均含有念珠状增厚的表皮细胞、非腺毛、花瓣乳
头状细胞、花粉粒和花柱碎片;叶(花)表皮细胞多为矩形,排列整齐规则;经薄层色谱检测,药材提取物供试品
与对照品在相同的位置上,显出相同颜色的荧光斑点。结论:不同产地线叶龙胆药材无明显差异,其粉末显微
特征无明显差异,通过薄层色谱分析可知,不同产地的线叶龙胆中均含有龙胆苦苷、獐牙菜苦苷。
[关键词]线叶龙胆;显微鉴定;中药鉴定
[中图分类号]R93[文献标识码]A [文章编号]1004-6852(2012)10-0012-03
Identification on Pharmacognosy of Narrowleaf Gentian from Different Habitats
NING Yan-mei1, LIU Gao-hong2, ZHANG Wei-hua1, YANG Tao1△
1 Gansu University of Traditional Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China;
2 Gansu Province Hospital of Traditional Chinese Medicine
Abstract Objective: To provide theoretical evidence for pharmacognosy and development of narrowleaf gen-
tian from different habitats through identifying pharmacognosy of narrowleaf gentian. Method: Origins, medicinal
properties, microscopic identification, physical and chemical identification of narrowleaf gentian were distinguished.
Result: Different samplesare of narrowleaf gentian and there is no obviousdifference; there aremoniliform thicken-
ing epidermic cells, non-glandular hair, petalspapillary cells, pollen grain and stylusbits in thepowder of wholenar-
rowleaf gentian; rectangular epidermic cells are found in the leaf and they lay orderly and regularly; fluorescent
speckles in the same color are found in the same place of test samples and control ones tested with thin layer chro-
matography. Conclusion: Narrowleaf gentian from different habitats and microscopic features of the powder suggest
no remarkable difference. The results of thin layer chromatography demonstrate narrowleaf gentian from different
habitatscontain gentiopicrin and swertiamain.
Keywords narrowleaf gentian; microscopic identification; authentication
方 药·药学研究
12
2012年第 25卷第 10期
中国科技 核心期刊
查阅相关文献,对其进行科、属、种鉴定。
2.2 性状鉴定 对所收集的线叶龙胆进行植物
形态观察,并对其器官形态特征进行描述。
2.3 显微鉴定 取线叶龙胆的干燥茎、叶、花,用
水浸泡,待软化后做徒手切片以及花和叶的表皮
制片,另取干燥全草研粉,按生药鉴定学常规方法
制成线叶龙胆茎、叶、花的横切片以及粉末片。将
制备好的切片置显微镜下观察,并用显微成像系
统对其进行拍摄。
2.4 理化鉴定
2.4.1 总灰分测定粉碎药材并过二号筛,取供
试品粉末各2~3g,置炽灼至恒重的坩埚中,称定
质量,缓缓炽灼,逐渐升温至500~600℃使完全碳化
并恒重,根据残渣质量计算供试品总灰分百分数。
2.4.2 薄层色谱取不同产地线叶龙胆原药材,
分别粉碎,取粉末各0.5g,加甲醇20mL,回流 1
小时,对提取液进行抽滤,保留滤液并减压回收甲醇,
将提取物定容于2.5mL容量瓶中,供点样用,对照
品龙胆苦苷及獐牙菜苦苷浓度分别为0.376mg/mL。
采用GF254-CMC-Na板作为固定相,分别取已定容
好的甲醇提取液以及对照品溶液点样,以氯仿∶甲
醇∶水(13∶ ∶0.2)为展开剂,饱和后展开,挥干溶
剂,置紫外灯下观察。
3 实验结果
3.1 性状鉴定 线叶龙胆植株根茎大多直立短
缩并具有多数略带肉质的须根。叶对生,基部愈合
贯穿茎,下部叶线状披针形,中上部叶线形。花冠
膨大,显黄绿色或蓝绿色,花萼合生,萼筒提钟形;
花冠漏斗状,具5条蓝紫色条纹,5裂,裂片间具
褶蓝色,略显三角形;雌蕊,柱头2裂;雄蕊5枚,
离生。对线叶龙胆药材的性状进行观察,器官形态
特征见表1。
表1 线叶龙胆植物器官形态特征
器官 性状
根部 根茎短缩,直立,具多数略肉质的须根。

大多直立单一,少分枝,黄绿色,具浅纵棱,有节和
节间,节间长0.6~1.0cm。

对生,基部愈合贯穿茎,下部叶线状披针形,中上
部叶线形。
黄绿色或蓝绿色,花萼合生,线形,萼筒钟形;花冠
花 漏斗状,具5条蓝紫色条纹,5 裂,裂片间具褶蓝
色,略显三角形;雌蕊,柱头2裂;雄蕊5枚,离生。
3.2 显微鉴别 对线叶龙胆的干燥花进行粉末
制片并进行观察,其特征见图1。对线叶龙胆叶进
行粉末制片并观察,其特征见图2。对线叶龙胆茎
进行粉末制片并观察,其特征见图3。对线叶龙胆
的茎组织横切片,并观察,其特征见图4。
方 药·药学研究
13
Western Journal of Traditional Chinese Medicine,2012 Vol.25 No.10
中国科技 核心期刊
3.3 显微结构特征 线叶龙胆显微结构特征见
表2。
3.4 理化鉴定
3.4.1 总灰分测定总灰分测定结果见表3。
表2 线叶龙胆显微结构特征
器官 粉末制片 组织切片 表皮制片
表皮细胞着生非腺毛;表皮细胞 最外层为表皮,微木化;皮层稍窄,内外
茎 连珠状增厚,横面类圆形;纤维 皮层明显;薄壁细胞多角形大而疏松;
众多。 维管束成环状排列,韧皮部窄木质部导
管排列整齐,最外围导管较大;髓部宽广。
表皮细胞多角形,壁浅波状,气孔 表皮细胞长方形,排列规则,壁平
叶 不等式;非腺毛头部钝,有的有小 壁平直或浅波状弯曲。
突起,尾部尖。花粉粒类圆球形,
表面具细瘤状突起,组成条纹。
外壁有刺状小突起,萌发孔3个; 表皮细胞长方形,排列整齐,壁深
花 非腺毛多单细胞,导管螺纹,纤维 波浪状,多显樱红色。
多见。
表3 各产地线叶龙胆的总灰分比较
产地 坩埚净重平均值/g 加供试品后平均值/g 加药灰化恒重后平均值/g 结果 灰分平均值
青海湟源 30.2993 32.3198 30.4066 5.31
青海河南县 30.2982 32.2990 30.4066 5.42
甘肃夏河 29.0574 31.0867 29.1380 3.97 4.843
桑科 28.8457 30.8625 28.9445 4.89
合作 38.4190 40.4200 38.4971 3.90
马衔山 29.1503 31.1560 29.2723 4.69
西藏林芝 29.0566 31.0684 29.1717 5.72
3.4.2 薄层色谱A板上展距为:11.7cm。点样
从左到右依次为湟源,桑科草原,马衔山。计算得
各品种组分Rf值:(Rf1为龙胆苦苷,Rf2为獐牙菜
苦苷)标准品 Rf1=0.56,Rf2=0.85;湟源 Rf1=0.56,
Rf2=0.83;桑科草原 Rf1=0.60,Rf2=0.83;马 衔 山
Rf1=0.62,Rf=0.85。见图5。
B板上展距为:11.2cm。点样从左到右依次为
西藏,合作,河南,夏河。计算得各品种组分Rf值:
(Rf1为龙胆苦苷,Rf2为獐牙菜苦苷)标准品
Rf1=0.41,Rf2=0.76;西藏:Rf1=0.42,Rf=0.70;合
作:Rf1=0.43,Rf2=0.71;河南 Rf1=0.43,Rf2=0.72;
夏河Rf1=0.44,Rf2=0.74。见图6。
4 讨论
实验中几种不同产地线叶龙胆药材的外观、
性状无明显差异,药材粉末特征结构中均含有念
珠状增厚表皮细胞﹑非腺毛﹑花瓣乳头状细胞和花
柱碎片等。经薄层色谱检识,供试品与标准品在相
同位置显示相同颜色荧光斑点,由此可知不同产
地线叶龙胆中均含有龙胆苦苷、獐牙菜苦苷,此外
在365 nm波长下可检出一未知成分荧光斑点。不
同产地线叶龙胆其总灰分含量介于3.90%~5.72%
之间。对该药材中存在的有效化学成分的定量分
析,有待于进一步研究。
参考文献
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志·六十二卷
[M].北京:科学出版社,1988:95-99.
[2] 王宁,周乐.龙胆属植物化学成分研究概况[J].陕西林业科
技,2001,29(3):71-78.
[3] 刘涛,付玉芹,才谦,等.龙胆总裂环环烯醚萜苷质量标准研
究[J].云南中医学院学报,2006,29(2):25-27.
收稿日期:2012-02-27
作者简介:宁艳梅(1977—),女,硕士学位,讲师。研究方向:
临床中药学。
△通讯作者:杨韬(1977—),男,实验师。研究方向:中药资源
与药用植物研究。
方 药·药学研究
14