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蓝靛果忍冬性状与显微鉴别的研究



全 文 :蓝靛果忍冬性状与显微鉴别的研究
颜承云 1 , 谷继伟 2
( 1.佳木斯大学化学与药学院 ,黑龙江 佳木斯 154007; 2.佳木斯大学第一附属医院 ,黑龙江 佳木斯 154003)
提要: 目的: 研究黑龙江省蓝靛果忍冬根、茎 、叶片的显微构造。方法:采用石蜡切片法。结论:研究结果表明 ,蓝靛果忍冬
根无髓 ,筛管无伴胞。木材为半环孔材 ,木薄壁细胞发达 ,韧薄壁组织中散生着针状结晶 ,导管、管胞和木纤维内壁明显螺纹加
厚。蓝靛果忍冬叶为单叶迹 ,单叶隙。
关键词 : 蓝靛果忍冬 ;显微鉴定
中图分类号: R285. 1 文献标识码 : A 文章编号: 1008- 0104( 2003) 03- 0015- 02
   蓝 靛 果 忍 冬 ( Lonicera edulis Turcz. )是 忍 冬 科
( Caprifoliaceae)忍冬属 ( Lonicera )植物 ,落叶灌木。又名蓝靛
果 (东北 )、羊奶子 (大兴安岭 )、黑瞎子果 (黑龙江 )、山茄子
(勃利县 )。蓝靛果忍冬具有观赏价值 ,可做观赏树种 [1]。忍
冬 ( Lonicera. japonica Thunb. )的花及花蕾 (金银花 )是著名
中药 ,被誉为“中药中的青霉素”。作为忍冬的同属植物蓝靛
果忍冬其果实具有清热解毒 ,降压的功效 [2 ]。民间作为药用 ,
可治疗小儿厌食。野生蓝靛果忍冬果实酸甜可口、 营养丰
富 ,含有大量的维生素 C和氨基酸以及多种微量元素 ,具有
较高的营养价值及营养保健功能 , 被誉为“第三代水果果中
之王” 。食品工业上蓝靛果忍冬果实是优良的酿酒、饮料的
原料。蓝靛果忍冬中的红色素是食用天然色素 [3] ,具有很大
的经济价值。蓝靛果忍冬是一种很有发展的可食浆果类经济
作物 ,尚待开发。目前对蓝靛果忍冬研究较少。本课题旨在通
对黑龙江蓝靛果忍冬生药显微鉴定的研究 ,可以为科学、合
理地利用这一资源以及扩大资源 (人工栽培 )提供科学依据。
为蓝靛果忍冬分类学进一步的研究以及药用价值、经济价值
的开发提供基础性资料。
1  材料与方法
1. 1  材料
蓝靛果忍冬根、茎、叶片、于 2001- 05~ 2001- 07取自
黑龙江勃利县红星林场。方法 : [4, 5]取蓝靛果忍冬新鲜的根、
茎、叶片、用 F. A. A溶液固定 ,用石蜡切片法制成根、茎、叶
片、花、果实的石蜡切片。然后用番红固绿双重染色。切片厚
度: 根茎 10~ 15μm,茎 10~ 12μm,叶片 8~ 10μm,花序 10~
12μm。置于显微镜下观察并照相 ,绘图。
1. 2 实验用具及药品
Olympus显微镜 ,日立 Hitach - 520型扫描电镜 ,显微描
绘仪 ,切片机 ,番红染色剂 ,固绿染色剂 ,光学树脂胶封固剂 ,
明胶粘贴剂 ,二甲苯 ,乙醇。
2 实验结果
2. 1 形态特征
蓝靛果忍冬是一种落叶小灌木 ,平均株高 1. 0~ 1. 2m,多
分枝 ,直立或开展 ;幼枝被柔毛 ,红褐色 ,老枝红棕色 ;树皮片
状剥裂 ,芽开展 ,卵形 ,外有两枝舟形鳞片 ,有时有副芽 ,暗紫
褐色。叶对生 ,叶长圆状卵形 ,长 4~ 7cm, 宽 1~ 2cm, 基部圆
楔形 , 有时阔楔形 , 先端钝尖或微钝 ,全缘 ,羽状脉 ,有缘毛 ,
上面疏生短柔毛 ,有时无毛或反脉上有毛 ,稀无毛 ,下面淡绿
色 ,有毛 ,叶柄短有长毛 ;但在萌枝或壮枝上部之托叶 ,基部
常联合 ,茎贯穿其中。苞片条形 , 2~ 3倍长于萼筒 ;花两性 ,花
生于叶腋 ,多整齐 ;花梗长 7~ 15mm下垂 ;相邻的 2花之萼筒
1 /2至全部合生 ,萼齿小 ,疏生柔毛和纤毛 ;花冠黄白色 ,常带
粉红色 ,长 10~ 12mm,花筒基部膨大成囊状 ,裂长 5;雄蕊 5较
花冠长或略短 ;花柱比雄蕊长 ,无毛或中下部有毛 ,子房下
位。胎座为近似中轴胎座的侧膜胎座类型。浆果椭圆形或长
圆形 ,长 6~ 12mm ,暗蓝色有白粉 ,酸甜可食。花期 5~ 6个月 ,
果熟期 8~ 9月。
2. 2 显微特征
2. 2. 1 根显微特征
见图 1~ 2。
图 1 蓝靛果忍冬根横切面解剖构造详图Ⅰ (× 600)          图 2 蓝靛果忍冬根横切面解剖构造详图Ⅱ (× 600)
    1.周皮  2. 栓内层                       1.韧皮层  2. 形成层  3. 木质部
   ( 1)表皮被周皮所取代 ,木栓层由 2~ 3层细胞构成 ,细
胞较小形状近似长方形、类长圆形 ,大小不一 ,排列整齐 ,无
细胞间隙。部分木栓层细胞有脱落。整个木栓层呈深棕色。
( 2)栓内层较发达 ,分生能力较强 ,形成类似皮层组织 ,由 6~
8层细胞组成 ,细胞近似圆形或正多边形 (直径 30~ 40μm) ,
为生活的薄壁细胞组织。 ( 3)韧皮部由韧皮薄壁细胞、韧皮纤
维、筛管组成 ,约占根半径的 1 /4。韧皮射线明显 ,由 2~ 3层径
向排列的射线薄壁细胞构成 ,细胞较小类圆形 ,韧皮纤维壁
厚 ,微木化。筛管分布在韧皮薄壁细胞中间。 ( 4)形成层呈环
状 ,由 3~ 4列分生细胞组成 ,细胞扁平 ,排列紧密、整齐。 ( 5)
木质部的厚度约占根半径的 1 /2,由木薄壁细胞、导管、木射
线组成。木薄壁细胞数量较多 ,导管分子较少 ,以螺纹导管和
环纹导管为主要类型 ,导管管孔呈类圆形 (直径 20~ 30μm) ,
单个或多个成群分布在木薄壁细胞间 ,自内向外连续或间断
排列成行。木射线单列或双列 ,细胞类圆形径向排列。木射线
和韧皮射线相连续一起作为从木质部韧皮部的运输结构。根
无髓。
2. 2. 2 茎显微特征
见图 3~ 5。
·15·HEILONGJIAN G MEDICINE AND PHARMACY Jun. 2003, Vo l. 26 No. 3                     
( 1)木栓层为 4~ 5层类长方形扁平的木栓细胞组成 ,外
层细胞外壁较厚 ,呈黄白色。 ( 2)栓内层较宽 ,由 12~ 15列生
活的薄壁细胞组成。靠近木栓层的薄壁细胞呈类圆形 ,较小 ,
靠近韧皮层的薄壁细胞呈多角形 ,大小不一 ,不规则排列。微
管束为外韧型。 ( 3)韧皮部由韧薄壁组织、韧皮纤维、韧皮射
线、筛管组成。韧皮射线为多列 ,全由薄壁组织细胞构成 ,并
常与木射线相连接。韧皮纤维具轴向成束 ,分散在筛管周围
或分散存在。韧薄壁组织轴向分布形成薄壁组织束 ,其中散
生着针状结晶的异细胞。 ( 4)形成层为数列扁平细胞组成 ,细
胞壁较厚 ,束间形成层不明显。 ( 5)木质部为半环孔材 ,生长
年轮明显。由导管、管胞、木纤维、木薄壁组织、木射线等构
成。导管的管孔为椭圆形或多角圆形 (直径 20~ 30μm) ,每平
方毫米 15~ 20个 ,单独或径向及斜向 2~ 3细胞的复管孔 ,胞
壁厚 2. 5μm。侵填体未见。普遍具明显的螺纹加厚 ,且纹孔与
加厚的螺纹同时可见。木薄壁组织丰富 ,多数为离管型的星
散薄壁组织及少数的傍管型的薄壁组织。维管管胞直径 20~
25μm具螺纹加厚 ,纤维管胞直径 10~ 15μm,胞壁厚 2. 5~
3μm,具明显的单螺纹及双螺纹加厚。木纤维壁较薄径向成
列。木射线非叠生 ,每毫米 14— 22根 ,单列射线高 7~ 18细胞 ,
多列射线宽 2~ 3个细胞。木射线属异形Ⅰ 型 ,常形成连接木
射线。髓为非异形髓。
2. 2. 3 叶显微特征
见图 6~ 7。
图 3 蓝靛果忍冬径横切面解剖构造详图Ⅰ (× 300)      图 4 蓝靛果忍冬径横切面解剖构造详图Ⅱ (× 300)
      1.周皮  2. 栓内层                   1.韧皮层  2. 形成层  3. 木质部
图 5 蓝靛果忍冬径横切面解剖构造详图 (× 300)       图 6 蓝靛果忍冬叶脉解剖构造详图 (× 300)   
           1.木质部  2. 髓腔 (中空 )         1.表皮  2.基本组织  3.厚角组织  4.韧皮部  5.木质部
图 7 蓝靛果忍冬叶肉组织解剖构造详图 (× 300)
1.上表皮  2. 栅栏组织  3. 海绵组织  4. 气孔  5. 下表皮
( 1)上表皮由一层形状类长方形的细胞组成 ,细胞壁较
厚 ,外覆角质层 ,上表皮细胞明显较大 ,且有少数特别大的细
胞插入叶肉组织中。下表皮由一层类圆形的细胞构成 ,细胞
较小 ,排列紧密 ,表面覆有角质层。下表皮细胞外壁有少数的
乳头状突起 ,成熟的气孔均分布于下表皮 ,多为不定式气孔
类型。 ( 2)叶肉组织由栅栏组织和海绵组织组成。栅栏组织为
一列长柱形细胞 ,排列紧密。海绵组织细胞不规则排列松散 ,
呈网状或簇生 ,细胞间隙较大 ,叶肉组织中含有叶绿体及小
型维管束 ,维管束鞘多为薄壁组织。 ( 3)主脉表皮由一层细胞
组成 ,细胞圆形 ,排列紧密细胞外壁有角质层。维管束为外韧
型 ,维管束鞘由数层厚角细胞组成。韧皮部半环绕木质部 ,木
质部中导管排列成列。
3 小结
本课题对蓝靛果忍冬根、茎、叶片、进行了显微鉴别。显
微观察过程中发现 ,蓝靛果忍冬根无髓 ,筛管无伴胞。木薄壁
细胞发达 ,多数为离管型的星散薄壁组织及少数的傍管型的
薄壁组织。韧薄壁组织中散生着针状结晶的异细胞。导管、管
胞和木纤维内壁普遍具有明显螺纹加厚。蓝靛果忍冬叶为单
叶迹 ,单叶隙。对黑龙江省蓝靛果忍冬根、茎、叶片、的解剖构
造研究结果与忍冬属形态解剖特征相对照表明 ,两者有一定
的差别。忍冬属形态解剖特征中导管、管胞和木纤维内壁普
遍螺纹加厚偶见 ,导管螺纹加厚微弱。而黑龙江省蓝靛果忍
冬导管、管胞和木纤维内壁普遍具有明显螺纹加厚。黑龙江
省蓝靛果忍冬与汪矛研究的吉林省蓝靛果忍冬的形态解剖
特征大部分相同 ,但也有区别 ,黑龙江省蓝靛果忍冬叶为单
叶迹、单叶隙。汪矛研究的吉林省蓝靛果忍冬叶为三叶迹、三
叶隙。产生这些差别可能是地域自然条件和物种长期进化的
原因。是否需要将蓝靛果忍冬列入新属需要对不同地区的蓝
靛果忍冬进一步研究。
(下转第 17页 )
·16·                                 黑龙江医药科学  2003年 6月第 26卷第 3期
AkPase活性对组织细胞的测定方法
李凯霞 , 秦世武 , 李月秋 , 马奎力
(佳木斯大学基础医学院 ,黑龙江 佳木斯 154002)
关键词: 碱性磷酸酶 ( Ak Pase); 标本 (冻融蟾蜍胃、肠 ); 实验方法
中图分类号: R329. 33 文献标识码: B 文章编号: 1008- 0104( 2003) 03- 0017- 01
  细胞、组织、器官的保存和移植是诸多学者多年一直在
研究的课题 ,对于保存时间、温度、保存液的配制 ,特别是组
织细胞保存活性还很少有人报道 ,本实验采用 Olympus显微
镜观察冻融蟾蜍胃、肠 AkPase活性及三棵针合剂对胃、肠的
保护效应。这将为临床细胞、组织器官的保存、移植提供理论
依据。
1 材料和方法
实验用冬眠状态下中华大蟾蜍 ,体温 12~ 15℃ ,体重 50
~ 70g ,性别不限 ,随机分为两组 ,每组 10只 ,分为药物复温
组、正常冬眠对照组。将实验组蟾蜍置于 - 18℃冰箱内冷冻
10~ 60min,在蟾蜍冻休克状态下 ,将其从冰箱中取出 ,将蟾
蜍置于 500ml三棵针合剂中 40℃复温。复温溶液主要成分:
三棵针 20g、刺五加 30g、茯苓 10g、鸡血藤 50g、甘油 10ml、 5%
g lucose500ml,水煎制剂。冻融蟾蜍在复温溶液 37~ 50℃中 1
~ 10min复活 ,速将其胃肠取下 ( 1)经中性缓冲甲醛液固定 ,
4℃、 24h。( 2)移入 95%酒精内 1h。 ( 3)移入纯酒精内 2次 ,每次
15min。 ( 4)移入苯内 2次 ,每次 30min。 ( 5)浸蜡 54℃以内 3次 ,
每次 20min。 ( 6)切片 , 3~ 10微米厚 ,贴于载玻片上 ,避免用水
漂浮。 ( 7)脱蜡 ,通过纯丙酮及 40%丙酮后入水。 ( 8) 在 37℃
浴槽孵育液内 10~ 60min,孵育液配制法 : p H 9. 0~ 9. 4、 2%
甘油磷酸钠溶液 25ml、 2%巴比妥酸钠溶液 25 ml、 2%硝酸
钙溶液 5ml、 0. 8%氯化镁溶液 5ml、丙酮 40 ml。( 9)过 40%丙
酮。 ( 10)用 40%丙酮配制的 2%硝酸钴作用 2~ 6min。 ( 11)过
40% 丙酮。 ( 12)用 40%丙酮配制的硫化氨稀溶液 (在丙酮内
滴入硫化氨 ,直至呈淡黄色为止 )作用 3min。 ( 13)过丙酮 ,在
酒精内脱水。 ( 14)透明 ,封片如常。
2 结果
Olympus显微镜下可见 AkPase所在处呈褐至黑色 ,有
酶活力处出现黑色 ,胃、肠粘膜表面的 AkPase活力药物复温
较正常对照组 Ak Pase呈强阳性结果。
3 讨论
关于细胞组织、器官活性保存的测定方法 ,国际学者均
作了大量有效工作 ,特别是血液、肝、肾、骨髓、角膜、皮肤、心
脏等保存和移植均有很多报道。积累宝贵临床经验。在生物
学、生物化学、生物物理都作了很多研究。我们只是就其组织
化学和生理机能方面的实验做一些探索 ,实验证明 ,只有适
宜温度、最佳营养保护液才能使细胞、组织、器官保存其活性
和再生能力。否则 ,组织的生物化学诸多方面如 DN A、糖、蛋
白质、酶、细胞膜、离子结构将会失去其功能。实验发现 ,最适
温度可使酶充分显示其活性 ,大多数底物中孵育于
25~ 37℃ ,不能超过 56℃ ,否则 ,导致破坏酶活性。然而 ,浓
度、 pH、激活剂均是促进酶活性的重要条件 ,钙 -钴显示法简
单易行 ,效果良好 ,为科学研究及教学提供了科学依据。我们
的实验证明: 选择适宜的温度和复温保护液对组织保存是非
常重要。三棵针合剂具有促进 AkPase活性的功能。促进神经
体液调节和血液循环。这为临床医学和药物开发利用提供了
理论依据。
( 2003— 03- 05收稿 )
作者简介: 李凯霞 ( 1955~ )女 , 黑龙江佳木斯人 , 实验师。
(上接第 16页 )
  参考文献:
[1 ]周以良 .黑龙江植物志 [M ] .哈尔滨:东北林业大学出社 , 1998,
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[2]朗杰 . 蓝靛果降压作用的实验研究 [ J] . 中医药信息 , 1996, 13
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[ 3 ]马自超 . 蓝靛果红素的分离与鉴定 [ J ] . 南京林业大学学报 ,
1987, ( 4): 6741
[ 4 ]郑国倡 .生物显微技术 [M ] .北京:人民教育出版社 , 1978, 8~
162
[5 ]顾茂书 .中药显微鉴定技术 [M ] .沈阳:辽宁科学出版社 , 1996,
10
( 2003- 01- 04收稿 )
作者简介: 颜承云 ( 1972~ )男 ,黑龙江鹤岗人 ,硕士 ,讲师。
Properties of Lonicera edul is Turcz and
its microscopical identif ication
YAN Cheng- yun, GU J i- wei
( Colleg e of Ch emist ry& Pharmacy, Jiamusi University, Jiamusi 154003, China)
Abstract: Objective: To study the histological structure of rhizome, stem, leaf of Lonicera edulis Turcz. in
Heilong jiang province. Method: The technology of sectioning wi th paraf fin was used. Result: The anatomy
structure rev ealed no pi th in middle of root and no companion cell in the siev e tube its w ood belonged to semi-
ring porous w ood. Wood parenchyma w as numerous, The raphides dist ributed in phloem parenchyma. There
apptarad marked spiral thickening in the inner w alls of the vessel, tube cell and ligni fication. It s leaf was sing le
leaf t race and single leaf gap.
Key words: Lonicera edulis Turcz; microscopical identification
·17·HEILONGJIAN G MEDICINE AND PHARMACY Jun. 2003, Vo l. 26 No. 3