全 文 ：华西药学杂志
W C J P S　2007, 22(2):204 ～ 205 　　
作者简介:王祥培 ,男 ,博士 ,副教授 ,从事生药学的教学和科研工作。
*通讯作者(Correspondent author)
HPLC测定不同产地的头花蓼中没食子酸的含量
王祥培 1, 2 ,万德光1* ,王　强 3 ,裴　瑾 1
(1.成都中医药大学药学院 ,四川 成都 611730;2. 贵阳中医学院 , 贵州 贵阳 550002;3. 西安交通大学第二附属医院骨科 , 陕
西 西安 710004)
摘要:目的　测定不同产地头花蓼中没食子酸的含量。方法　采用依利特 Hypersil C18色谱柱(150 mm ×4. 6 mm , 5 μm),以
乙腈 - 0. 4%磷酸(5：95)为流动相 , 流速 0. 8 m l m in- 1 , 检测波长 272 nm。结果　没食子酸的线性范围为 0. 0816 ～ 0. 4896
μg (r=0. 9996), 平均回收率为 97. 7%, RSD =0. 6%。结论　所建方法准确 、简便 ,可评价不同产地头花蓼质量。
关键词:头花蓼;野生与栽培;没食子酸;高效液相色谱法
中图分类号:R917　 　文献标识码:A　 　文章编号:1006 -0103(2007)02 - 0204 - 02
Determ ination of gallic ac id in Po lygonum capitatum from different hab itats
WANG X iang -pei
1, 2 ,WAN De - guang1* ,WANG Q iang3 , PE I Jin1
(1. Pharmaceutica lCollege, Chengdu University of TCM , Chengdu 611730, China;2. Guiyang Collegeof TCM , Guiyang 550002, Ch i-
na;3. D epartm ent of Orthopaedics Surgery, S econd Hospita l of X i’ an J iaotong Un iversity, X i’ an 710004, China)
Abstrac t:OBJECTIVE　To de te rm ine the content of the ga llic ac id in Polygonum capitatum from differen t hab ita ts.METHODS　
The reve rsed phase HPLC system consisting of an H ype rsil ODS co lumn(150 mm ×4. 6 mm , 5 μm)and a m ix ture of acetonitrile -
0. 4%H
3
PO
4
(5：95) as the m ob ile phase w as used. The flow ra te wa s 0. 8 m l m in- 1 and UV de tec tion was set a t 272 nm. RU SULTS
　The gallic acid assay disp layed good linearity ove r the concen tra tion range of 0. 0816 - 0. 4896μg (r=0. 9996). The ave rage recov-
e ry o f gallic acid w as 97. 7%. CONCLUSION　The m ethod is sim ple, accura te and can be used for the qua lity study of the w ild and
cu ltiva ted Polygonum capitatum .
K ey words:Polygonum capita tum;W ild and cultivated;Ga llic acid;HPLC
CLC num ber:R917　 D ocum ent code:A Artic le ID:1006 - 0103(2007)02 -0204 - 02
　　头花蓼为蓼科植物头花蓼 Polygonum capitatum
Buch. Han. ex D. Don的干燥全草或地上部分 ,主产
于贵州 、云南 、四川 、西藏和广西等省区 ,为贵州苗族
用药 ,具有清热利湿 、解毒止痛 、和血散淤 、利尿通淋
之功效 [ 1] 。其制剂在临床上用于治疗泌尿系统感
染 [ 2] 。没食子酸为头花蓼的有效成分 [ 3] ,文献 [ 4 ～ 6]
已测定了药材和成方制剂中没食子酸的含量 ,但未
见不同产地头花蓼药材中没食子酸含量测定的报
道 。为此 ,采用 HPLC法测定的方法准确 、简便 ,可
为头花蓼品质评价及其资源的综合开发 、利用提供
参考。
1　实验部分
1. 1　仪器和试药
2695高效液相色谱仪包括二级管阵列检测器 ,
Empow er色谱工作站 (美国 W aters公司 );SB2200
型超声清洗器 (上海必能信超声有限公司 )。没食
子酸对照品(中国药品生物制品检定所 ,批号:0831 -
9501);乙腈为色谱纯;水为重蒸馏水;其余试剂均
为分析纯;头花蓼药材共 12批 ,分别产自贵州 、四
川 、云南 、西藏等地 ,由成都中医药大学万德光教授
鉴定 。
1. 2　方法与结果
1. 2. 1　色谱条件 　色谱柱为依利特 Hypersil C18
(150 mm ×4. 6 mm , 5 μm);柱温 25℃;流动相为乙
腈 - 0. 4%磷酸 (5：95);流速 0. 8 m l m in-1;检测
波长 272 nm;理论板数按没食子酸峰计算不低于
4×103。在此色谱条件下 ,对照品和样品的色谱图
见图 1。
1. 2. 2　溶液的制备　精密称取没食子酸对照品适
量 ,加 50%甲醇溶解 ,制成 40. 8 μg m l-1的对照品
溶液 。取 0.5 g头花蓼细粉 ,精密称定 ,置 50 m l具
塞锥形瓶中 ,精密加入 25 m l甲醇 - 25%盐酸溶液
(4：1)提取液 ,称定重量 ,水浴加热回流 1. 5 h,放
冷 ,称重 ,用提取液补足减失的重量 ,摇匀 ,过滤 ,精
密吸取 5m l续滤液至 25m l量瓶中 ,加甲醇定容 ,摇
DOI牶牨牥牣牨牫牫牱牭牤j牣cnki牣wcjps牣牪牥牥牱牣牥牪牣牥牫牬
匀 ,用 0. 45μm微孔滤膜过滤 ,取续滤液为供试品
溶液。
图 1　没食子酸对照品(A)和供试品(B)溶液的色谱图
F ig 1　Chrom a tog ram s of gal lic acid(A)and sam ple(B) so lution
1. 2. 3　线性关系考察　精密吸取没食子酸对照品
溶液 2、4、6、8、10、12 μl,进样 ,测定峰面积 ,以峰面
积为纵坐标 ,进样量为横坐标进行线性回归 ,回归方
程为:Y =8.049×103X +7. 323×102 (r=0. 9996),
结果表明 ,没食子酸在 0.0816 ～ 0.4896 μg范围内 ,
与峰面积的线性关系良好 。
1. 2. 4　精密度试验　取对照品溶液 10 μl,连续进
样 5次 , 记录色谱图 ,没食子酸峰面积的 RSD =
0.16%。
1. 2. 5　稳定性试验　取同一供试品溶液 ,在 0、4、
8、12、16、20 h进样 ,记录色谱图 ,没食子酸峰面积的
RSD =1. 13%。表明供试品溶液在 20 h内稳定 。
1. 2. 6　重复性试验　取同批药材 5份 ,精密称定 ,
按 “1. 2. 2”项下方法制备供试品溶液并测定 ,没食
子酸的平均含量为 0. 304%, RSD =0. 91%。
1. 2. 7　回收率试验　取已知含量的头花蓼粉末 5
份 ,每份约 0. 25 g,精密称定 ,分别精密加入一定量
的对照溶液 ,按 “ 1. 2. 2”项下方法制备并测定 ,结果
见表 1。
表 1　加样回收实验结果 (mg)
Table 1　The results of recovery test(m g)
O rigina l Added Detected Recovery /% X /% RSD /%
0. 7633 0. 8160 1. 5661 98. 4 97. 7 0. 65
0. 7624 0. 8160 1. 5582 97. 5
0. 7694 0. 8160 1. 5610 97. 0
0. 7606 0. 8160 1. 5625 98. 3
0. 7670 0. 8160 1. 5598 97. 2
1. 2. 8　样品的测定　精密吸取对照溶液与 12批头
花蓼药材供试品溶液各 10 μl,按 “ 1. 2. 1”项下条件
测定 ,外标法计算没食子酸的含量(表 2)。
2　讨论
2003年版《贵州省中药材 、民族药材质量标准》
　　
表 2　头花蓼中没食子酸的含量(n=3)
Tab le 2 The content o f the gallic acid in Polygonum capita tum(n=3)
No. H ab itat C ollecting time Conten t /%
1 G uizh ouAnshun(w ild) 2005 - 09 0. 304
2 G uizh ouJianhe(w ild) 2005 - 09 0. 454
3 G uizh ouJinpin(w ild) 2005 - 09 0. 366
4 G uizh ouGu iyang(w i ld) 2005 - 09 0. 355
5 G uizh ouPanxian(w ild) 2005 - 09 0. 382
6 G uizh ouSh ibing(p lan ting) 2005 - 09 0. 337
7 S ichuanM iyi(w ild) 2005 - 09 0. 394
8 S ichuanEmei(w i ld) 2005 - 09 0. 360
9 S ichuanC hengdu(p lan ting) 2005 - 09 0. 420
10 YunnanKunm ing(w ild) 2005 - 09 0. 419
11 XizangMo tuo(w ild) 2005 - 09 0. 330
12 YunnanDali(w ild) 2005 - 11 0. 237
只规定了头花蓼药材中槲皮素的含量。经研究发
现 ,头花蓼药材中没食子酸含量较高 ,可作为头花蓼
药材质量的评价指标。由于没食子酸在植物中常与
鞣质结合 ,试验中分别采用了甲醇 、水 、5%盐酸和甲
醇 - 25%盐酸溶液(4：1)混合液回流提取 ,结果后
者水解回流提取含量最高 。加热回流 1.5 h以后水
解基本完全 ,盐酸浓度不宜再高 ,酸性太强对仪器和
色谱柱腐蚀作用大 。
结果表明 , 不同产地头花蓼中没食子酸含量存
在一定差异 ,其中以贵州剑河野生头花蓼中没食子
酸的含量最高 ,云南大理野生头花蓼中没食子酸的
含量最低 。栽培品中 ,成都产头花蓼较贵州施秉产
头花蓼中没食子酸含量高 ,可能与头花蓼生长的环
境及采收的季节有关。
参考文献:
[ 1] 　 全国中草药汇编编写组. 全国中草药汇编(下册)[ M ] .北
京:人民出版社 , 1978. 282 -283.
[ 2] 　 俞建军 ,马小琴.热淋清颗粒治疗尿路感染的疗效评价 [ J] .
浙江中医杂志 , 2002, (3):135.
[ 3] 　 吴居 ,王德仁.石莽草化学成分的研究 [ J] . 中草药 , 1985, 16
(4):5 - 6.
[ 4] 　 茅向军 , 许乾丽 , 熊慧林 ,等.高效液相色谱法测定热淋清胶
囊中没食子酸的含量 [ J] .中国中药杂志 , 2002, 27(8):589 -
591.
[ 5] 　 任源 ,堵年生. H PLC测定没食子中没食子酸的含量 [ J] .华西
药学杂志 , 2005, 20(1):71 - 72.
[ 6] 　 潘国庆 ,冯学梅 ,马玉花. HPLC测定藏成药仲泽八味沉香散
中没食子酸的含量 [ J] .华西药学杂志 , 2006, 21(4):388 -
389.
收稿日期:2006 - 01
205第 2期 王祥培 , 等。 HPLC测定不同产地的头花蓼中没食子酸的含量