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狼毒大戟活性成分体外抑瘤研究



全 文 :#方药纵横#
收稿日期: 2001 - 09 - 05
基金项目:国家/ 九五0攻关课题
作者简介:杨洪武( 1969 - ) ,男,辽宁兴城人,主管药师,学士,从事中药制剂工艺研究。
狼毒大戟活性成分体外抑瘤研究
杨洪武1,王 峥2, 郑学民2
( 11 辽宁北方生物制药集团有限公司, 辽宁 沈阳 110003; 21 辽宁中医学院, 辽宁 沈阳 110032)
摘 要:选用体外建株的人肿瘤细胞系 U937(人恶性组织细胞淋巴瘤细胞株) , Hela(人子宫癌细胞株) , QRH
- 7701(肝癌细胞株) , 采用 MT T 比色法,观察了狼毒大戟活性成分 W对上述细胞系的影响。结果表明, W 对 3 种
细胞系均有不同程度的抑制作用。
关键词: MTT 比色法;肿瘤; 狼毒大戟; U937; Hela; QRH - 7701; IC50
中图分类号: R2851 5 文献标识码: B 文章编号: 1000 - 1719( 2002) 01 - 0053 - 02
狼毒大戟,始载于5神农本草经6, 民间主要用于癌症等
方面的治疗。近年来,国内外学者对其进行了广泛的研究。
有文献报道,其饮片水和醇的提取物经腹腔注射、静脉注射、
灌胃等不同给药途径, 对小鼠移植性肝癌、肺癌生长均有一
定的抑制作用[1 ]。有学者从其根部分离得到一系列二萜内
酯类化合物,并研究对 Lewis 肺癌、艾氏腹水癌、肝癌、S180等
细胞株有显著的抑制作用 [2]。为进一步探讨其体外的抗肿
瘤作用,笔者采用 MTT 比色法, 观察了从其根部分离提取
得到的活性成分W 的体外抑瘤作用。
1 材料与方法
111 材料 药品:化合物W, 自制。实验时, 以吐温 - 80 作
为助溶剂配制成水溶液; 丝裂霉素 ( MMC) : kyowa Hakko
Kogyolo L td 1 - 6 - 1公司提供, 批号: 071AEJ; RPM I1640 培
养基, 美国 GIBCO 公司 ,批号 430 1800E; Thiazo lyl Blue Te-
trazo lium, 新生小 牛血清, Bromide ( MTT ) : Fluka, 批号
322192 /1193;细胞株: U937、Hela、QRH - 7701 细胞株; 美国
Mount Sinai医学院肿瘤中心惠赠。仪器: 酶标仪, TECON
Classic, 奥地利产品。
112 方法 取对数生长期的 U937、Hela、QRH - 7701 肿瘤细
胞,调整细胞浓度为 5@ 105 /ml,将此细胞悬液接种于 96孔培养
板中,每孔 180Ll,于 37e 、5% CO2、饱和湿度下培养24h 后,实验
组按浓度梯度分别加入W溶液, 是终浓度分别为 3175、715、15、
30Lg /ml,每一浓度平行 3孔。以相同方式设定阳性对照组。为
了消除助溶剂吐温 - 80 对实验的影响, 按浓度设定溶剂对照
组,同时,设空白对照组。于 37 e 、5%CO2饱和湿度下继续培养
24、48、72h( U937 细胞在接种后直接加入不同浓度的W,培养
24、48、72h) , 与培养结束前 4h 加入 MTTPBS 溶液 ( 5mg /ml)
20Ll,培养结束后弃上清,于各孔中加入DMSO200Ll充分振摇溶
解甲瓒,用酶标仪于 570nm 处测吸光度值, 以吸光度值( OD)表
示增殖程度,并按下式计算抑制率。
抑制率= (对照组 OD 值 - 给药组 OD 值) /对照组 OD
值@ 100%
2 结 果
见表 1, 图 1、2、3。
表 1 W对肿瘤细胞 U937 Hela QRH - 7701的影响
培养时间( h) IC50( Lg /ml)
U937 Hela QRH - 7701
0102%吐温 80
化合物 24 1811 1718 1813
W 48 913 1016 1014
72 2017 2013 1115
丝裂霉素 24 1610 2015 811
( MMC) 48 417 512 518
72 313 214 212
图 1 对 U937细胞作用随时间变化趋势
图 2 对 Hela细胞作用随时间变化趋势
图 3 对 QRH - 7701细胞作用随时间变化趋势
3 讨 论
MT T比色分析法, 这一实验技术可通过测定线粒体能
量代谢, 以反映细胞增殖情况, 有简便、快速、重复性好的特
点 [3]。本实验采用 M TT 比色法测定了活性成分 W 对体外
建株的人肿瘤细胞系 U937、Hela、QRH - 7701 的抑制作用。
结果表明, 其对 3 种细胞系均有不同程度的抑制作用。但是
W 对 3 种细胞系的影响与丝裂霉素不同。丝裂霉素对 3 种
细胞系的影响随着培养时间的延长增强。而 W 在培养 48h
作用较强, 培养 72h 与培养 24h 作用相当。有关抗癌机理正
在探讨和研究。
#53#
第 29卷 第 1期
2002年 1月
辽 宁 中 医 杂 志
LIAONING JOU RNAL OF T RADITIONAL CHINESE MEDICINE

Vol. 29 No. 1
Jan. , 2002
DOI:10.13192/j.ljtcm.2002.01.55.yanghw.037
#辨证施护#
收稿日期: 2001 - 11 - 13
作者简介:闻桂英( 1969 - ) ,女(蒙古) ,辽宁喀左人,护师,主要从事中医临床护理工作。
脑血栓形成的康复护理刍议
闻桂英,林秀凤
(喀左县中蒙医院, 辽宁 喀左 122300)
关键词:脑血栓形成; 康复明;护理
中图分类号: R2481 1 文献标识码: B 文章编号: 1000 - 1719( 2002) 01 - 0054 - 01
脑血栓形成,是一种常见病、多发病。是由于颅内外供
应脑部的动脉血管壁发生病理性改变,血流缓慢或血液成分
改变和粘度增加而形成血栓, 致使血管闭塞, 导致脑供血不
足,脑组织缺血、缺氧、坏死。本病属中医学中风(中经络)范
围,其主要临床症状为口眼歪斜、语言障碍, 偏瘫。近年来,
发病率较高,给家庭和社会造成负担。为了促进病人瘫痪肢
体的功能恢复,防止肢体挛缩畸形, 防止各种并发症的发生,
笔者在临床护理工作中, 针对本病采用辨证施护, 取得一定
经验,试述如下。
1 情志护理
心身医学认为,情绪因素在疾病的预防、发生、发展及疾
病的恢复方面起着重要的作用。特别是怒, 怒不仅损伤肝
脏,怒气还可以伤脑。脑血栓形成患者由于突发生活不能自
理,情绪往往很低落, 这样,就需要护理人员时刻掌握病人的
情志变化,关心和鼓励病人, 正确的疏导和调整病人的情绪,
调整病人的心理状态,细心向病人讲解有关本病的知识和不
良情绪对本病的影响,使之身心放松, 心神安合,达到阴阳协
调平和,树立战胜疾病的信心, 使病人以最佳心态面对疾病,
积极治疗和接受护理,早日康复, 回归社会。
2 生活及饮食护理
病室内应保持整洁、温暖、安静、定时通风,保持空气新
鲜,阳光充足。进食应以易消化、富含营养及维生素的食物,
少食多餐。多食蔬菜和水果, 保持大便通畅, 预防便秘。忌
食辛辣、刺激、肥甘、油腻、动风之品。严禁室内吸烟。合并
肺内感染者,要及时有效地促进排痰, 将病人安置适当体位,
通过体位引流,结合护理者叩击患者背部, 使痰排出。
3 功能锻炼
病情平稳后,应防止瘫痪肢体肌肉挛缩、关节强直、韧带
钙化等。在神经恢复的过程中, 除药物治疗外,应经常按摩
瘫痪的肢体, 使关节被动运动。正确指导患者进行合理的功
能锻炼非常重要, 病人因四肢瘫痪,以致局部肌肤长期受压,
气血运行不畅, 肌肤失于濡养而发生溃烂, 为了避免褥疮形
成,恢复肢体功能,应经常为病人翻身, 更换体位, 活动关节,
肢体按摩, 常用温水给病人擦洗,保持皮肤清洁, 定时按摩骨
突出部位及受压部, 病情好转后, 由床上活动, 渐到下肢站
立,床周活动,由室内活动到室外活动。配合器械训练,如扶
拐行走,在进行肢体功能锻炼的同时要控制血压和饮食, 生
活有规律, 从而提高疗效,促使病情好转。
4 失语的护理
对失语的病人应根据失语的种类和程度进行训练,而且
训练越早越好, 运动性失语通过训练可有明显的好转, 对感
觉性失语效果较差。训练时应向病人说明训练的重要性, 鼓
励病人要持之以恒, 循序渐进, 树立战胜疾病的信心。医护
人员对病人的失语要表示同情, 对待病人要热诚耐心。切忌
把病人说错的话, 表达错的意思当作笑料, 而要耐心地一个
字一个字地教病人发音, 从单字、词汇练起, 像小孩学语那
样,教导病人发音。对感觉性失语的病人, 可根据表情得知
所表达的意义, 用手势教给他们表达比较简单的事情, 让病
人理解后反复复述一件事情, 但时间不宜过长。命名性失语
的病人, 可看某物反复教给他们说出名称,训练开始时,切勿
要求过高,病人讲错不要忙于纠正, 语言讲的不完全时重复
练习。不厌其烦的耐心训练, 会使病人早日恢复正常的语言
能力。
总之, 对于脑血栓形成康复期病人原则上应加强护理,
防止并发症, 减少后遗症。对于意识障碍,瘫痪的病人,还可
采用针灸、体疗、推拿、按摩等方法促进康复。也可辅以理疗
或舒筋活血的中药治疗。
编辑:李 立
参考文献:
[1 ] 申屠瑾, 魏品康,韦洁芬, 等. 狼毒对小鼠移植性肿瘤的影响
[ J ] .中西医结合杂志, 1984, 4( 1) : 46.
[2 ] 刘桂芳,傅玉琴,杨志强,等.狼毒大戟抗癌活性成分二萜内酯
的分离鉴定 [ J ] .中药通报, 1988, ( 5) : 35.
[3 ] Mosman T . Rapid colorimet ric assay for Cellular grow th and Sur-
vival, applicat ion to proliferation and cy totoxicity assay [ J ] . J Im-
munal Methods, 1983, 65: 55.
编辑:覃 芳
An experimental study of the anti-tumor on the active
constituent of Euphorbia fischeriana Steud. in vitro
YANG Hong-wu1, WANG Zheng2, ZHENG Xue-min2
( 11Liaoning northern biology pharmacygroup Ltd. S henyang 110003 China;
21Liaoning college of TCM, 110032 China; )
Abstract: In this experimental study, the effect of W-the active constituent of Eupho rbia fischeriana Steud.-to human tumor cell
lines U937、Hela、QRH-7701 of culture in vitro was detected by MTT assay. The result indica ted that the different deg rees inhibitive
effects w as shown by W effecting the three cell lines.
Key words:M TT tumor Euphorbia fischeriana Steud. U937 Hela QRH-7701; IC50
#54#
第 29卷 第 1期
2002年 1月
辽 宁 中 医 杂 志
LIAONING JOURNAL OF TRADITIONAL CH INESE MEDIC INE

Vol. 29 No. 1
Jan. , 2002