全 文 ：E 部分 。 C 部分通过 H P L C 分离 , 得到 5 个部分 。
每个部分通过 H P L C 进一步纯化 , 共得到 8 个化合
物 ( l ~ 8 ) 。 ②选用 7 周龄 iW s枉rI 大鼠 ( l9() 一 2 2 0 )
g
, 在恒温 (2 4士 2) ℃ 、 恒湿 ( 45 士 15) % 条件下
饲养 , 自由摄食和饮水 。 实验分为辣薄荷提取成分
对 C 4 81 8 0 诱导的或抗原卵白蛋 白引发的大鼠腹膜
肥大细胞释放组胺 的影 响以及对抗原或组胺引起
大鼠的鼻部症状的作用 。
结果 : ①分离得到的 8 个化合物分别为圣草构
椽普 ( 一, 6 5 70m g ) 、 nanur
t i n ( 2
,
3 6m g )
、 橙皮普
( 3
,
2 3Om g )
、 木犀草素一7 一O 一芸香糖昔 ( 4 , 3 2 5m0 g ) 、
异野漆树昔 ( 5 , 4 l m g ) 、 布枯普素 ( 6 , 9 3m g ) 、 迷
迭香酸 ( 7 , s g o m g ) 、 5 , 7 一 a in y d or x y c or m o n e 一 7 一O 一芸
香糖昔 ( s , 4 2肠m g ) 。 ②化合物 4 显著抑制 C 4 818 o
或抗原引起细胞中组胺的释放 , 作用 强于木犀草
素 、 木犀草素 一7一口一糖昔 , 在大于 30 林M 浓度时有显
著性差异 ; 其它成分 10 林M 时亦无此作用 。 ③化
合物 4 呈剂量依赖性拮抗抗原引起的鼻部症状 , 在
l o m叭g 和 30 m g瓜 g 时作用显著 , 而 30 m眺g
时对组胺引起的鼻部症状没有明显抑制作用 。 结果
提示 , 成分 4 临床可用 于缓解过敏性鼻炎的鼻部症
状 。
( 张卫华摘译 张保献校 )
0 , 4 小柴胡汤的酚类代谢物体外诱导人肺成纤维
细胞和外周淋巴细胞凋亡 〔英 〕 / iL u .Z 二 / iB ol
P h a r n l B u l l一 2X() 2
,
2 5 ( l ) 一 3 7 ~ 4 1
据报道 , 小柴胡汤提取剂 ( T J 一9) 治疗的慢性
肝损害病例中出现多例间质性肺炎 , 且当 TJ 一 9 与
干扰素 ( IF N 一 a ) 同时使用时 , 发生间质性肺炎的
病例数增 多 。 研究表明 T J 一 9 和 IF N 一 a 体外抑制肺成
纤维细胞增殖 , 增加 IL 一 6 产生 。 尽管认为 TJ 一9 和
( 或 ) INF
一
a 诱发间质性肺 炎是 由于变应性免疫学
机制而不是毒性作用 , 然而是否存在其它解释尚不
清楚 。 从小柴胡汤生药成分及其经体内吸收后从尿
液排泄的成分推测 , T J 一9 中有 7 种代表性成分
m e d i e抑 i n 、 甘草黄素 ( li q u试 t i g e n i n ) 、 黄琴昔 、
黄答黄素 、 木蝴蝶素 A 、 汉黄答黄素和二轻苯基轻
基丙酮 。 本次研究了这 7 种化合物和 IF N 一 a 体外对
人肺成纤维细胞和外周血单核细胞 ( P B M C s ) 凋亡
的影响 。
材料和方法 : ① P B M C s 细胞凋亡 : 健康人血
样中收集 BP M C s , 常规培养 。 980 林L 细胞混悬液
接种于 24 孔平底盘中 , 加入 20 匹溶于 乙醇的受试
化合物 , 终浓度为 or 林岁mL ; 或加入溶于 0
.
1% 白
蛋白用B S 的 INF
一
a
, 终浓度为 1护U /m L 。 对照孔加
入 20 肚L 乙醇 。 取 l m L P B M C s 混悬液于结合缓冲
液 ( 10 m M 轻乙基呱嗦乙磺酸 一氢氧化钠 , p H 7 . 4 ,
含有 14 Om M 氯化钠和 .2 s m M 氯化钙 ) 中与 5林L
膜联蛋 白 V- FI T C 和 10 林L 5 0林梦m L 碘化丙锭室温
培养 巧而 n 后 , 用流式细胞仪进行分析 。 ②成纤维
细 胞凋亡 : 人肺 二倍 体成 纤维细 胞株 于改进的
E ag le 培养基中传代培养 。 980 林L 成纤维细胞混悬
液接种于 24 孔盘中 , 加入 20 林L 溶于乙醇的受试化
合物 , 终浓度分别 为 0 . 1、 1 . 0 、 10 gl mL ; 或加入 2 0肚L
溶于 0 , l % 白蛋白ZP B S 的 I F N 一 a , 终浓度为 10 一
1了ul mL
, 于 3 7 ℃ 、 5% c o 了空气中培养 , 细胞经
胰蛋 白酶处理后 , 于冷 P B S 中洗 2 次 , 然后再次
混悬于结合缓冲液中 , 用上述相同方法检测 。
结果 : 黄答黄素和 m de ic apr in ( l。林留mL ) 显
著诱导 PB M C s 凋亡 。 m de ic apr in 诱导人肺成纤维
细胞凋亡 的活性较高 , 细胞凋亡百分数呈时间和剂
量依赖型增加 ; 9 6 h 后黄答黄素 ( 0 . 1 、 1 . 0协gl m L ) 、
甘 草 黄 素 ( 10林留m L ) 和 二 轻 苯基 轻 基 丙 酮
( 1 0林岁n l L ) 亦显示明显诱导人肺成纤维细胞凋亡
的作 用 。 黄芬昔 、 木蝴蝶 素 A 和 汉黄芬黄素对
P BM C s 和成纤维细胞均无诱导其凋亡的作用 。 黄
答黄素和 m de ic呷 in 抑制肺成纤维细胞生长 , 并降
低其生存力 。 I FN 一 a 不诱导以上 2 种细胞凋亡 , 对
上述化合物诱导细胞凋亡无协同作用 。
结论 : 结果表明小柴胡汤中酚类化合物 , 尤其
是黄答黄素和 me id c呷 in 具有直接诱导人肺纤维
细胞和免疫细胞凋亡的作用 。
(清 风摘译 )
09 5 大花紫薇中的并没食子鞭质具有激活脂肪细
胞中葡萄糖转运的活性〔英〕 / H ay as ih .T 二 / lP an at
M e d一 2X() 2
,
6 8 ( 2 ) 一 17 3~ 1 7 5
大花紫薇 (加g er s 加 ema ic s e Po ia s) 为菲律宾
当地的一种草药 , 其叶制成茶用于预防和治疗糖尿
病 。 动物实验表明其叶的提取物具有降血糖作用 ,
亦有将其叶提取物用于糖尿病治疗的临床报道 。 已
从该植物叶 的 甲醇提取物中得到 1 个活性三菇
c o or so h c ac id ( Za
一轻基熊果酸 ) , 能增加葡萄糖转
运 , 降低实验动物血糖水平 。 本次用一种改良方法
分离和鉴定出另 3 种活性成分 。
干燥大花紫薇叶 ( kI g ) 用 70 % 丙酮室温提取
3 次 , 提取液在低于 4 0℃ 温度下减压浓缩 , 残余
物 ( 224 9 ) 混悬于水 , 依次用 乙醚 、 乙酸乙酷 、 丁
醇萃取 , 分别得到 4 个部分 。 葡萄糖转运增强活性
检测显示水溶性部分具有活性 。 将水溶性部分上苯
乙烯和二 乙烯苯多孔共聚物柱 ( iD ia on H P 一 20) , 用
水一甲醇梯度洗脱 , 其中 20 % 和 30 % 甲醇洗脱部
分显示出活性 。 将此 2 个部分分别经过 M CI 一G E L
柱 (0 %一4 0% 甲醇洗脱 ) 、 O D S 一 A Q 柱 ( 25 % 甲醇
洗脱 )和制备型 H P L c ( O D S 一A 柱 , 10 % 乙睛一 10m M
磷酸盐缓冲液 ) 分离 , 由 3 0% 甲醇洗脱部分得到
l a g e r s tr oe 而 n ( 2 7 m g ) 和 fl o s i n B ( 12m g ) , 由 2 0%
甲醇洗脱部分得到 er ig in n A ( 1 Zm g ) ·
3 个成分均为灰白色无定型粉末 , la g e sr姗 n五n ,
[a猎+ 13 . 5 “ ( c = 0 . 2 , 丙酮 ) ; n o s讥 B , 【a l留+ 6 9 ’
( e = 0
.肠 , 丙酮 ) ; er g而 n ^ , 【a 猎+ 7 7 ’ ( c = 0 . 0 2 6 ,
丙酮 ) 。 这些成分均使大鼠脂肪细胞摄取葡萄糖增加 ,
可能有助于降低血糖 。
(赵宇新摘译 )
以 6 x l 0 5个细胞 / m L 接种于被覆有多聚 L 赖氨酸
的培养皿中培养 , 8一d9 后用于试验 。 ③药物处理
和细胞活力评价 : U SE 、 U SE 一W 、 U SE 一P 、 U SE 一A
和 N O 供体硝普钠 ( SN P ) 及 SNI 一 1 分别溶于稀释
10 倍的洛克溶液 , 培养细胞中先加药物提取物
20 阵 ( 正常和模型对照组加等量洛克溶液 ) , 10 而 n
后再加入 s NP 和 sNI
一
1 2 0泌 (正常对照组加等量
洛克溶液 ) , 37 ℃温箱孵育一定时间 , 加入 M rT
50 林创m L 并在 37 ℃孵育 3 0m i n , 然后细胞冲洗并
溶于含 .0 04 N 盐酸的异丙醇 , 以溶解蓝色还 原产
物 , 于 57 0 nm 测 定光 密 度
。 ④ 统 计 分析 用
K ur
s k al
一认习】15 检验及 B o n fe mr n i , s t 检验 。
结果与讨论 : ①细胞活力检测显示 , 6 、 12 和
2 4 h u s E ( 10
、
3 0 和 l 0() 卜gl m L )组细胞活力明显高
于 s N p ( 3 0林M )组 , U s E ( 10 和 3 0林岁m L )组细胞活
力明 显 高 于 sI N 一 l (3 o 林M ) 组 。 ②在 2 4 h 时 ,
u s E
一
P ( 10 和 30 卜gl 毗 ) 明显抑制 s即 ( 30林M )诱导
的细 胞死亡 , u S E 一P (3 和 1 0林岁m工 ) 明显 抑制
s NI
一
1 (3 o 林M )诱导 的细胞死亡 。 ③在 24 h 时 ,
U S E
一
^ (3 0 和 10 林岁m L )明显抑制 s N p ( 3 0 pM )和
s NI
一
1 (3 o 卜M )诱导的细胞死亡 。
上述结果表明 , 华钩藤对 N O 诱导的离体小脑
颗粒细胞神经元死亡具有防护作用 , 并且其活性成
分存在于酚部分和生物碱部分 。 华钩藤的这一特性
使其可能具有防止 N O 介导的神经元损伤的作用 。
( 史 青摘译 聂淑琴校 )
胭巧 华钩藤对 N O 供体诱导的离体小脑颗粒细胞
神经元死亡的防护作用 〔英〕 / uY ta k a .s 二刀 J T ar d
M e d一 2X() 2
,
19 ( l )
一
15~ 2 0
既往体外研究发现 , 华钩藤水提物对谷氨酸诱
导的神经元死亡有防护作用 , 而 N O 则参与神经元
死亡的过程 , 因此 , 本次研究了 N O 供体做诱导剂
时华钩藤对神经元的保护作用 。
材料与方法 : ①华钩藤购 自中国广西 , 原药经
水煎后的冻干物 ( U S E ) 用色谱法分离 , 得到水提
物 ( U S E一 W ) 、 酚部分 ( U S E 一P ) 和 生物碱部分
( U S E
一
A )
。②小脑颗粒细胞取 自 d8 龄 iW s atr 大 鼠 ,
09 7 肉桂和 肉桂醛对氧自由基诱导的自发性高血
压 大 鼠离体主 动 脉收缩 的抑制 作 用 〔 英 〕 /
K as ha ar a Y … / J rT a d M ed 一 2X() 2 , 19 ( 2 ) 一 5 1~ 5 7
桂枝获荃丸对自发性高血压大鼠 s( H R ) 血管
内皮功能紊乱有保护作用 , 肉桂是该方的主要药
物 , 本次研究了肉桂提取物 ( c C E ) 和 肉桂醛 ( C A )
对氧自由基诱导 S HR 离体主动脉收缩的抑制作用 。
材料与方法 : ① C C E 溶于蒸馏水备用 。 实验
动物为 s H R 和 iW st ar 一K y ot o 大鼠 。 ②大鼠胸主动
脉环固定在 M ag im s 浴槽中 , 浴液为 K er bs 液 , 经
过预适应处理 , 其完整的内皮置于 L 一N G 一硝基精氮
酸 甲酷 ( L 一N AM E ) 中 60 而 n 。 ③每个动脉环分别