全 文 ：壮药扁担藤醇提取物对ＣＣｌ４所致小鼠肝损伤的保护作用①
韦贤彬１，潘乔丹２，黄元河２②，韩佳迪１，吴龙群３，农静羽１，谢畅宇３
（１．右江民族医学院２０１２级药学本科１班，广西　百色　５３３０００　Ｅ－ｍａｉｌ：１３５８６７０９９６＠ｑｑ．ｃｏｍ；
２．右江民族医学院，广西　百色　５３３０００；
３．右江民族医学院２０１２级药学本科２班，广西　百色　５３３０００）
摘　要：目的　研究扁担藤醇提物抗ＣＣｌ４ 所致小鼠急性肝损伤效果。方法　采用０．１５％ ＣＣｌ４ 对小鼠腹腔注射，建立
小鼠急性肝损伤模型，检测扁担藤醇提取物对血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）活性、天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）活性、肝匀浆超氧
化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量、肝指数的影响，并对肝组织进行病理学检查。结果　扁担藤醇提物能显
著降低ＣＣｌ４ 所致肝损伤小鼠的血清ＡＬＴ、ＡＳＴ值升高并降低肝匀浆中 ＭＤＡ的含量，增强ＳＯＤ的活性。病理学切片显
示对肝组织的病理变化有显著的改善。结论　扁担藤醇提物具有显著地抗肝损伤的作用。
关键词：扁担藤提取液；四氯化碳；急性肝损伤
中图分类号：Ｒ２８５．５　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００１－５８１７（２０１６）０１－００１７－０３
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－５８１７．２０１６．０１．００６
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍＴｅｔｒａｓｔｉｇｍａ　ｐｌａｎｉｃａｕｌｅ（Ｈｏｏｋ．ｆ．）
Ｇａｇｎｅｐ　ｏｎ　ａｃｕｔｅ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＣＣｌ４ｉｎ　ｍｉｃｅ
Ｗｅｉ　Ｘｉａｎｂｉｎ１，Ｐａｎ　Ｑｉａｏｄａｎ２，Ｈｕａｎｇ　Ｙｕａｎｈｅ２，Ｈａｎ　Ｊｉａｄｉ　１，Ｗｕ　Ｌｏｎｇｑｕｎ３，Ｎｏｎｇ　Ｊｉｎｇｙｕ１，Ｘｉｅ　Ｃｈａｎｇｙｕ３
（１．Ｕｎｄｅｒｇｒａｄｕａｔｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｃｌａｓｓ　１，Ｇｒａｄｅ　２０１２，Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，
Ｂａｉｓｅ　５３３０００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ　Ｅ－ｍａｉｌ：１３５８６７０９９６＠ｑｑ．ｃｏｍ；２．Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ
Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ　５３３０００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ；３．Ｕｎｄｅｒｇｒａｄｕａｔｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｃｌａｓｓ　２，Ｇｒａｄｅ　２０１２，
Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｂａｉｓｅ　５３３０００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｈｉｓ　ａｒｔｉｃｌｅ　ａｉｍｓ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍＴｅｔｒａｓｔｉｇｍａ
ｐｌａｎｉｃａｕｌｅ（Ｈｏｏｋ．ｆ．）Ｇａｇｎｅｐ　ｏｎ　ａ　ｍｏｕｌｄ　ｃｕｔｅ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ＣＣｌ４ｉｎ　ｍｉｃｅ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｍｏｕｓｅ　ａｃｕｔｅ
ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｍｏｄｅｌ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｂｙ　ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　０．１５％ ＣＣｌ４ｉｎ　ｍｉｃｅ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍＴｅｔｒａｓｔｉｇｍａ　ｐｌａｎｉｃａｕｌｅ（Ｈｏｏｋ．ｆ．）Ｇａｇｎｅｐ　ｏｎ　ｓｅｒｕｍ　ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ（ＡＳＴ）ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｏｎ　ａｌ－
ａｎｉｎｅ　ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ（ＡＬＴ）ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｏｎ　ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　Ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ）ｃｏｎ－
ｔｅｎｔ　ｉｎ　ｌｉｖｅｒ　ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ，ａｎｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｄｅｘｅｓ　ｗｅｒｅ　ｔｅｓｔｅｄ．Ａ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｍｉｃｅ　ｌｉｖｅｒ
ｔｉｓｓｕｅｓ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｔｅｔｒａｓｔｉｇｍａ　ｐｌａｎｉｃａｕｌｅ　ｃｏｕｌｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｒｅｓｉｓｔ　ｔｈｅ
ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｏｆ　ＡＬＴ　ａｎｄ　ＡＳＴ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ａｃｕｔｅ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ＣＣｌ４，ａｎｄ　ｄｏｗｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｌｉｖ－
ｅｒ　ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ，ａｎｄ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ＳＯＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｅｃｔｉｏｎ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｃｏｕｌｄ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ
ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅｓ．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｔｅｔｒａｓｔｉｇｍａ　ｐｌａｎｉｃａｕｌｅ　ｈａｓ　ｒｅｍａｒｋ－
ｂａｌｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｇａｉｎｓｔ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ．
　　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：　Ｔｅｔｒａｓｔｉｇｍａ　ｐｌａｎｉｃａｕｌｅ（Ｈｏｏｋ．ｆ．）Ｇａｇｎｅｐ；ｃａｒｂｏｎ　ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅ；ａｃｕｔｅ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ
　　 扁担藤 ［Ｔｅｔｒａｓｔｉｇｍａ　ｐｌａｎｉｃａｕｌｅ （Ｈｏｏｋ．ｆ．） Ｇａｇｎｅｐ）］，别名大芦藤、铁带藤、过江扁龙、扁骨风、腰
—７１—
第３８卷　第１期　　　　　　　　　　右江民族医学院学报　　　　　　　　　　　Ｖｏｌ．３８Ｎｏ．１
２０１６年２月　　　　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｙｏｕｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ　　　　Ｆｅｂ．２０１６
①
②
基金项目：右江民族医学院自治区级大学生创新训练计划项目资助（２０１４１０５９９０４８），中医药公共卫生专项“国家基本药物
所需中药原料资源调查和监测项目”（财社［２０１１］７６号）及中医药行业科研专项“我国代表性区域特色中药资源保护利用”
（２０１２０７００２）
通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｘｈｙｕａｎｈｅ＠１６３．ｃｏｍ
带藤、羊带风。为葡萄科崖爬藤属植物，据《中药大辞
典》记载：本品具有祛风除湿、舒经活络作用，可用于风
湿骨痛、腰肌劳损、咳嗽、半身不遂等［１］。我们前期研
究表明：扁担藤乙酸乙酯提取物对 ＯＨ·的清除能力
强于对照品抗坏血酸和茶多酚，具有较好的抗氧化能
力［２］。但对其抗肝损伤方面的研究尚未开展。因此我
们对扁担藤的醇提物进行抗ＣＣｌ４ 所致小鼠急性肝损
伤研究，旨在对其进一步开发和临床应用提供一定的
理论依据。
１　材料与方法
１．１　材料
１．１．１　药物　扁担藤，采自广西百色右江区，经本校
生物教研室黄元河老师鉴定，实验用其茎。
１．１．２　动物　ＳＰＦ级昆明种小鼠，雌雄不限，由右江
民族医学院实验动物中心提供，动物生产许可证号：
ＳＣＸＫ（桂）２０１４－００１０。
１．１．３　试剂　天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）试剂盒、丙氨
酸转氨酶（ＡＬＴ）试剂盒、丙二醛（ＭＤＡ）试剂盒、超氧
化物歧化酶（ＳＯＤ）试剂盒均购自于南京建成生物工程
研 究 所，批 号 ２０１４０７１６、２０１４０７０２、２０１４０７１３、
２０１４０７１１；四氯化碳（ＣＣｌ４）（分析纯），广东西陇化工
厂，批号２０１４０５２９；联苯双酯滴丸，浙江医药股份有限
公司新昌制药厂生产，批号１４０１１３；花生油为食用油。
１．１．４　仪器　ＵＶ－２４０１紫外分光光度计（日本津岛
公司），ＦＡ－２００７型电子分析天平，ＲＥ－５２ＡＡ旋转
蒸发仪（上海亚荣仪器厂），ＬＤ４－８低速离心机（北京
医用离心机厂），ＰＲＯ２００手持、台式两用均质器（美国
ＰＲＯ公司），ＢＡ３１０Ｄｉｇｉｔａｌ数码显微镜（麦克奥迪实
业集团有限公司）。
１．２　方法
１．２．１　扁担藤醇提物制备　扁担藤生药干燥粉碎
３２４ｇ，加１．２Ｌ石油醚连续回流脱脂２次，每次１ｈ；
脱脂后的药物干重３００ｇ，用７５％乙醇回流提取２次，
每次２ｈ，减压抽滤，取滤液；滤液用ＲＥ－５２ＡＡ旋转
蒸发仪浓缩至无明显蒸发，浓缩液放入烘箱烘干得浸
膏７．８５ｇ。
１．２．２　扁担藤各剂量组混悬液制备　取适量浸膏和
蒸馏水，配置成高（１５ｇ·ｋｇ－１）、中（１０ｇ·ｋｇ－１）、低
（５ｇ·ｋｇ－１）受试液，于４℃冷藏备用。
１．２．３　动物造模与给药　将６０只昆明种小鼠随机平
分为６组，分别为正常对照组，模型组，联苯双脂组
（０．１２ｇ·ｋｇ－１），扁担藤醇提物高剂量组（１５ｇ·
ｋｇ－１）、中剂量组（１０ｇ·ｋｇ－１）和低剂量组（５ｇ·
ｋｇ－１）。各组均定时给药灌胃，连续７ｄ，其中正常对
照组、模型组给予同容量的生理盐水。于末次给药后
１ｈ，正常对照组腹腔注射生理盐水２０ｍｌ·ｋｇ－１，其余
各组均腹腔注射０．１５％ ＣＣｌ４ 溶液２０ｍｌ·ｋｇ－１。注
射２０ｈ后，断椎处死小白鼠，取血液和肝脏。
１．２．４　生化指标检测　断椎处死小白鼠前，摘眼球取
血，所得血液在离心机以３　５００ｒ／ｍｉｎ，离心２０ｍｉｎ分
离血清。血清按试剂盒说明检测其天冬氨酸转氨酶
（ＡＳＴ）、丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）两项指标。摘眼球取血
后，立即处死取小鼠肝脏，称重记录后，取一部分加生
理盐水，用组织匀浆器，制备成１０％肝匀浆，并按试剂
盒说明检测其丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）
和蛋白含量三项指标。
１．２．５　肝脏指数　肝脏指数＝肝质量（ｇ）／体重（ｇ）
×１００％。
１．２．６　形态病理切片分析　小鼠肝脏称重后取一小
块（１０ｍｍ×５ｍｍ）组织用１０％甲醛溶液固定，蜡包埋
制片，ＨＥ染色，在光学显微镜下进行组织学观察。
１．２．７　统计学方法　各组实验数据均以（珚ｘ±ｓ）表示，
采用统计软件ＳＰＳＳ　１９．０进行单因素方差分析，两两
比较采用ＬＳＤ法，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
２　结果
２．１　扁担藤醇提物对急性肝损伤小鼠血清生化指标
的影响　如表１所示，与正常对照组比较，ＣＣｌ４ 模型
组能使血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ显著升高（Ｐ＜０．０１），说明
本次造模成功；与模型组比较，联苯双酯组、扁担藤各
剂量组均能使血清中 ＡＬＴ、ＡＳＴ 显著降低（Ｐ ＜
０．０１），且扁担藤各剂量组降低小鼠血清 ＡＬＴ、ＡＳＴ
水平，明显呈剂量依赖效应。
表１　扁担藤对ＣＣｌ４ 肝损伤小鼠血清
生化指标的影响　（珚ｘ±ｓ）
组别 数量
剂量
（ｇ·ｋｇ－１）
ＡＬＴ
（Ｕ·Ｌ－１）
ＡＳＴ
（Ｕ·Ｌ－１）
正常对照组 １０ － １５４．３６±４４．７２　 ２３．９７±１１．３６
模型组 １０ － ２９０．４２±３１．４７ａ ３３２．５１±５９．３２ａ
联苯双酯组 １０　 ０．１２　 ８１．９８±４．０７ｂ　 １５１．９２±６．２６ｂ
扁担藤高剂量组 １０　 １５　 ７４．６３±５．２７ｂ　 １５２．５４±６．６１ｂ
扁担藤中剂量组 １０　 １０　 ８８．９６±５．４６ｂ　 １８７．９７±８．１９ｂ
扁担藤低剂量组 １０　 ５　 ９７．０１±４．４９ｂ　 ２１８．４４±８．３７ｂ
　注：与正常对照组比较，ａ：Ｐ＜０．０１；与模型组比较，ｂ：Ｐ＜
０．０１
２．２　扁担藤醇提物对急性肝损伤小鼠肝脏生化指标
的影响　与正常对照组相比，模型组的 ＭＤＡ水平明
显升高而ＳＯＤ活性则明显降低；而扁担藤高、中剂量
组及联苯双脂组与模型组相比，ＭＤＡ和ＳＯＤ活性差
异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。与正常对照组相比，模
型组的肝指数显示升高；而与模型组相比，联苯双脂组
及扁担藤高、中剂量组肝指数明显降低，差异有统计学
意义（Ｐ＜０．０１），且显示一定的剂量依赖性。见表２。
—８１—
２０１６年　　　　　　　　　　　　　右江民族医学院学报　　　　　　　　　　　　　　第１期
表２　扁担藤对ＣＣｌ４ 肝损伤小鼠肝脏匀浆生化指标的影响　（珚ｘ±ｓ）
组别
数
量
剂量
（ｇ·ｋｇ－１）
ＭＤＡ
（Ｕ·Ｌ－１）
ＳＯＤ
（Ｕ·Ｌ－１）
肝指数
（％）
正常对照组 １０ － ６．５２±１．２５　 ５３７．７７±１００．４３　 ４．８６±０．５０
模型组 １０ － １３．３３±４．２９ａ １８９．３３±８２．９９ａ ５．５７±０．６６ａ
联苯双酯组 １０　 ０．１２　 ８．０６±１．５９ｃ　 ４１６．１８±８８．４０ｃ　 ４．８７±０．４１ｃ
扁担藤高剂量组 １０　 １５　 ８．１６±１．５８ｃ　 ５３３．２８±１２７．２９ｃ　 ４．７１±０．３６ｃ
扁担藤中剂量组 １０　 １０　 １０．６７±２．００ｂ　 ３６８．５８±１１０．７９ｃ　 ４．５９±０．５２ｃ
扁担藤低剂量组 １０　 ５　 １１．７２±２．１３　 ３０８．８１±１１６．０３ｂ　 ５．４８±０．５２
　注：与正常对照组比较，ａ：Ｐ＜０．０１；与模型组比较，ｂ：Ｐ＜０．０５，ｃ：Ｐ＜０．０１
２．３　扁担藤醇提物对小鼠肝损伤的观察　在光学显
微镜下，ＣＣｌ４ 模型组小鼠肝小叶结构混乱，肝索排列
紊乱，细胞界限模糊，其中多见块状炎症细胞浸润，点
状组织坏死，中央静脉淤血和细胞水肿样变性；与模型
组比较，扁担藤各剂量组、联苯双脂组均对以上肝组织
损伤有明显改善作用。
３　讨论
ＣＣｌ４ 是一种对肝细胞有严重毒性作用的化学物
质［３］，其作用机制为ＣＣｌ４ 在肝内导致肝微粒体细胞色
素Ｐ４５０分解活化，生成三氯甲基自由基和氯自由基，
导致肝微粒体的脂质过氧化，自由基增加，使得质膜磷
脂分子过氧化，增加细胞膜通透性，使肝细胞内大量转
氨酶ＡＴＬ和ＡＳＴ进入血液中；同时当肝细胞持续受
到自由基攻击时，ＳＯＤ过度消耗而表现为活性降低，
失去了对自由基启动脂质过氧化反应的抑制，导致
ＭＤＡ大量产生，破坏细胞膜，致细胞破裂，变性坏
死［４－５］。因此自由基和活性氧化物是引起肝损伤的重
要因素之一，故清除自由基是抗肝损伤的重要途径［５］。
本次结果亦显示扁担藤醇提物能够显著降低ＣＣｌ４ 肝
损伤小鼠血清ＡＬＴ和 ＡＳＴ的活性，能显著增加血清
ＳＯＤ并减少血清 ＭＤＡ 含量，前期我们研究发现扁担
藤就有较高的抗氧化活性［２］，说明扁担藤醇提物对
ＣＣｌ４ 急性肝损伤小鼠的保护作用与其抗氧化密切相
关，这为我们进一步研究扁担藤的有效成分奠定基础。
参考文献：
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护作用研究［Ｊ］．时珍国医国药，２００９，２０（３）：６５７－６５８．
［４］　闫冰，丁安伟，张丽．二至丸提取物对小鼠四氯化碳急性
肝损伤的保护作用［Ｊ］．中国中药杂志，２０１０，３５（２２）：３０８０
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［５］　周军，张福华．桑黄酮对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤
保护作用［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１３，１９（１５）：２６９－
２７２．
收稿日期：２０１５－１０－１９；修回日期：２０１５－１２－２８
（上接第１３页）
究半夏泻心汤根治Ｈｐ　ＭＤＲ的作用机制，为研制和应
用半夏泻心汤系列产品提供有力的实验依据。
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Ｔｅｓｔｓ　ｆｏｒ　Ｂａｃｔｅｒｉａ　Ｔｈａｔ　Ｇｒｏｗ　Ａｅｒｏｂｉｃａｌｙ；Ａｐｐｒｏｖｅ
Ｓｔａｎｄａｒｄ－Ｎｉｎｔｈ　Ｅｄｉｔｉｏｎ［Ｓ］．ＣＬＳＩ　ｄｏｃｕｍｅｎｔ　Ｍ０７－Ａ９．
Ｗａｙｎｅ，ＰＡ：Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｓｔａｎｄａｒｄｓ　Ｉｎｓｔｉｔｕ－
ｔｅ，２０１２．
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发病关系及防治研究［Ｊ］．中国中西医结合杂志，１９９２，１２
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［８］　毛亮，李中宇．李中宇教授应用半夏泻心汤治疗胃脘痛经
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收稿日期：２０１５－１１－２３；修回日期：２０１５－１２－３１
—９１—
２０１６年　　　　　　　　　　　　　右江民族医学院学报　　　　　　　　　　　　　　第１期