全 文 :西北林学院学报 2004, 19( 2): 75~ 76
Journal of No r thw est Fo r estry Univ e rsity
铺地锦的组织培养和快速繁殖
张朝阳 , 许桂芳
(湖南省怀化职业技术学院 ,湖南 怀化 418000)
摘 要: 采用铺地锦的腋芽作外植体进行组培和快繁研究。 结果表明 ,用 MS+ BA0. 5 mg·
L
- 1
+ N AA0. 05 mg· L- 1是较为理想的分化培养基 ,繁殖系数为 5左右 ,而生根培养用 1 /
2M S+ IBA0. 6 mg· L- 1生根效果较好。在炼苗中 ,移栽基质以珍珠岩+ 泥炭 ( 1∶ 1)可促进小
苗后期生长。
关键词:铺地锦 ;组培 ;植株再生 ;炼苗
中图分类号: S682. 19 文献标识码: A 文章编号: 1001-7461( 2002) 04-0075-02
Tissu Culture and Rapid Propagation of Melastona dodecandrum
ZHANG Zhao-yang, XU Gui-f ang
( Huaihua Vocational and Technical Col lege, Huaihua , Hunan 418000,China )
Abstract: In this test , axi llary buds o f Melastoma dodecandrum were collected as explants studied on tis-
sue culture and rapid propaga tion. The results show ed tha t dif ferentia tion index of propaga tion was 5 in
the enrichment medium of M S+ BA0. 5 mg· L- 1+ N AA0. 05 mg· L- 1 , while the roo tting index reached
94. 6% in roo tting medium o f 1 /2M S+ 0. 6 mg · L- 1 IBA, plantlets f rom test tube g rew better on the
g row th medium perlite+ peat ( 1∶ 1) than on o ther components in acclima tiza tion stag e.
Key words: Melastoma dodecandrum ; tissue culture; rapid propagation; acclimatization
铺地锦 (Melastoma dodecandrum )是野牡丹科
野牡丹属灌木 ,别名为山地稔、地枇杷。铺地锦植株
低矮 ,高仅 10 cm左右 [ 1] ,叶浓密贴地 ,覆盖效果好 ,
花、叶、果终年都呈现出变化不定的颜色 ,长年开花 ,
观赏价值高 ,终年不枯 ,是一种极为优良的地被植
物 ,日本已从我国引入并开始推广。 在我国 ,铺地锦
主要分布于热带或亚热带地区 ,目前处于野生状态 ,
其功能和作用尚未得到充分利用 ,尚未有观赏和绿
化方面的研究或开发报道。 铺地锦在自然条件下主
要靠种子繁殖 ,但其结实率较低 ,种子收集困难 ,扦
插成活率只有 30%左右。 目前 ,有关铺地锦的研究
仅在形态和观赏特性方面 [ 2] ,马国华等进行了有关
野牡丹属植物的组培和植株的再生3 ] ,但对于铺地
锦的组培外植体不定芽诱导、继代增殖扩繁、生根培
养及组培苗移栽等一系列技术缺乏深入研究 ,为此
对铺地锦的离体快速繁殖技术进行了探讨。
1 材料与方法
1. 1 材料处理
供试材料为铺地锦枝条 ,用自来水冲洗后 ,先用
75%酒精溶液浸泡 30 s,再置于 0. 1%升汞溶液中
消毒 6~ 9 min,然后用无菌水冲洗 4~ 5次 ,再剪成
1. 0~ 1. 5 cm左右带腋芽的茎段 ,在制备好的培养
基上接种 ,接种后 ,在暗处存放 2 d,然后放置培养室
培养 [4 ]。
1. 2 培养条件
1. 2. 1 分化培养基的选择 以 MS为基本培养基 ,
分别设置 6-BA 0. 5、 1. 0、 1. 5、 2. 0 mg· L- 1 , N AA
0. 01、 0. 05、 0. 1、 0. 5 mg· L- 1各 4种浓度 ,共 16个
组合。筛选分化培养基中 BA和 NAA最佳组合 , 3
收稿日期: 2003-08-11
基金项目:湖南省怀化职业技术学院科研基金资助
作者简介:张朝阳 ( 1969-) ,男 ,湖南新邵人 ,高级讲师 ,主要从事园林植物及园林设计的科研与教学工作 .
次重复 ,每重复接种 10瓶。 各培养基组合均加入蔗
糖 3% ~ 4% ,琼脂 8~ 10 g· L- 1 , p H值 5. 8。
1. 2. 2 生根培养基的选择 以 1 /2M S为基本培养
基 ,设置 IBA0. 2、 0. 4、 0. 6、 0. 8、 1. 0 mg· L- 1 5种
浓度水平 , 3次重复 ,每重复接种 10瓶。培养基均加
入蔗糖 1. 5%~ 2% ,琼脂 6~ 8 g· L- 1 , pH值 5. 8。
1. 3 继代培养
新接外植体约 10~ 20 d萌发成苗 ,苗高 2~ 3
cm时 ,将小苗剪成 0. 5 cm长带芽茎段 ,放入上述培
养基中继代增殖培养。
1. 4 生根培养
小苗高 3 cm左右时 ,从基部剪下 ,接种于生根
培养基上 ,进行生根培养。
培养室温度 ( 26士 2)℃ ,光照强度 1 500 lx ,光
照时间 11~ 12 h /d。
1. 5 小苗移栽
小苗生根培养根长 1. 5~ 2. 0 cm时 ,移栽前 7 d
组培苗带瓶移入大棚炼苗 (中午强光时遮荫 ) ,移栽
前 3 d用 50%可湿性多菌灵 800倍液喷浇灭菌 ,幼
苗种植基质有 2种: ( 1)蛭石+ 珍珠岩 ; ( 2)泥炭+ 珍
珠岩 ,比例均为 1∶ 1。每种种植基质栽植 1 000株。
2 结果与分析
2. 1 BA和 NAA组合对铺地锦分化出苗的影响
以 MS作基本培养基 , 4种浓度 BA和 4种浓度
NAA组合 ,结果表明 (表 1) ,芽的增殖分化主要取决
于 BA的浓度 ,在 6-BA为 2. 0 mg· L- 1时 ,虽然嫩
梢长度最小 ,但繁殖系数达最大。 结合芽的形成和嫩
梢生长情况 ,可以看出 , 6-BA1. 5~ 2. 0+ N AA0. 05
~ 0. 5效果最佳。
表 1 BA和 N AA组合对铺地锦分化出苗的影响
Table 1 Induction results o f Melastoma dodecandrum explants induced by differ ent
concentr ation ho rmones
6-BA浓度 /mg· L- 1 N AA浓度 /mg· L- 1
0. 01 0. 05 0. 1 0. 5
0. 5 4 /1. 07 5 /1. 37 5 /1. 01 6 /0. 82
1. 0 6 /0. 81 4 /1. 13 8 /0. 85 6 /1. 10
1. 5 7 /0. 65 9 /0. 41 8 /0. 52 8 /0. 76
2. 0 9 /0. 42 8 /0. 45 8 /0. 61 9 /0. 59
注: 繁殖系数指一个外植体经一代培养后形成的嫩梢个数 ;表中数字为繁殖系数 /嫩梢生长量 ( cm)。
2. 2 IBA对生根的影响
以 1 /2M S作基本培养基 , 5种浓度 IBA条件下
的培养结果表明 (表 2) ,开始生根天数随 IBA浓度
加大而缩短 , IBA浓度为 0. 2~ 0. 6 mg· L- 1时 ,随
浓度加大 ,生根率、每株根数增加 ,但超过 0. 6 mg·
L
- 1时 ,生根率下降 ,且多形成粗大根 ,产生愈伤组
织或从愈伤组织上再生根。 试验条件下 ,以 0. 6 mg
· L- 1 ,生根较快 ,根系生长正常 ,根数较多。
表 2 不同浓度的 IBA对生根的影响
Table2 Effects of differ ent IBA concentra tion lev els on the ro o t induction
IBA/mg· L- 1 生根率 /% 株均根数 /条 平均根长 /cm 开始生根天数 /d
0. 2 16. 5 0. 2 0. 5 12
0. 4 72. 4 2. 1 0. 9 9
0. 6 94. 6 3. 3 2. 4 9
0. 8 90. 2 3. 5 1. 9 8
1. 0 90. 1 3. 1 1. 5 8
2. 3 小苗移栽
已生根小苗约经 15 d,待根长达 1. 5~ 2. 0 cm
时 ,对生长健壮的试管苗进行炼苗移栽。移栽后浇一
次定根水 ,以后保持基质见干见湿 ,温度保持在
20℃左右 ,初期适当遮荫。 移栽后 ,约半个月的缓苗
期内叶片发红、失绿 ,随后转绿 ,植株发出新根 ,开始
正常生长。试验所用的 2种混合基质对炼苗成活率
没有明显差异 ,但对小苗后期生长速率有影响。珍珠
岩十泥炭和珍珠岩十蛭石的平均苗高分别为 5. 6
cm和 4. 8 cm ( 40 d后 ) ,即珍珠岩+ 泥炭基质更能
促进小苗后期生长 ,加速成苗。
3 结论
MS+ 6-BA1. 5~ 2. 0 mg· L- 1+ N AA0. 05~
0. 5 mg· L- 1+ 蔗糖 3%+ 琼脂 8 g· L- 1 , p H5. 8是
铺地锦茎段培养较为理想的分化培养基。继代培养
天数约 20 d,繁殖系数为 8~ 9,嫩梢生长正常。
(下转第 97页 )
76 西北林学院学报 19卷
传导率有所下降 ,与无螨叶片的测定结果相比较 ,差
异极显著。处理Ⅰ 和Ⅱ气孔传导率比对照分别下降
了 26%和 31% ,但二者之间差异不显著。
表 2 不同处理苹果叶片光合生理参数
Table 2 Physiolog ical pa rame ters of apple leaves unde r different treatm ents
处理 叶绿素含量
/mg· g-1
光合强度
/μmol· m-2· s-1
蒸腾强度
/mol· m-2· s-1
气孔传导率
/mol· m-2· s-1
无螨叶片 6. 731A 5. 910 0Aa 5. 823 6a 0. 143 4Aa
Ⅰ 4. 515B 3. 184 0Bb 5. 101 1a 0. 106 6Bb
Ⅱ 3. 091C 2. 926 0Bb 4. 982 7a 0. 099 3Bb
注:大、小写字母分别代表差异显著系数 P= 0. 05和 P= 0. 01。
3 结论与讨论
用专用瓦楞纸诱虫带可诱杀越冬螨 ,对翌年发
生数量有明显的抑制作用。盛发期晚出现 20 d,且持
续时间较短 ,与常规防治相近。 7~ 8月诱杀区叶平
均螨量及 8月底落叶率与对照区差异极显著 ,而与
常规防治区差异不显著 ,说明瓦楞纸诱集带对二斑
叶螨具有较理想的物理防除作用。
二斑叶螨吸食为害对苹果叶片生理有明显影
响。 果园内常规防治区叶片的叶绿素含量下降
33% ,诱杀区下降 54% ;光合强度分别下降 46. 1%
和 50. 5% ;气孔传导率分别下降 26%和 31% ;蒸腾
强度分别下降 12. 4%和 14. 4% 。说明用瓦楞纸诱杀
法可显著降低二斑叶螨基数 ,但仍有少部分螨对叶
片造成一定危害。因此 ,在螨发高峰期 ,补喷 1~ 2次
杀螨剂 ,会取得更好的防效。
试验对二斑叶螨发生数量的控制作用及残余螨
对苹果叶片生理的影响仅作了初步探讨 ,对诱集带
的材质、结构和加工工艺及田间应用技术尚需作深
入研究。
参考文献:
[1 ] 秦玉川 ,蔡宁华 ,胡敦孝 ,等 . 山楂叶螨与苹果全爪螨混合为害
对苹果叶片及果实的影响 [ J ].植物保护学报 , 1990, 17 ( 4):
347-353.
[ 2] 坂神泰辅 . ひと目でわかる· 果树の病害虫 (第 3卷 ) [M ].日
本国农业水产省果树试验厂盛岗支厂 , 1995. 51-53
[ 3 ] 工藤 健一 . ナミハダニの防除对策 [ J ]. リンゴの病害虫研
究 , 1994( 2): 34-36.
(上接第 76页 )
在 1 /2M S+ IBA0. 6 mg· L- 1+ 蔗糖 2%+ 琼
脂 7 g· L- 1 , pH5. 8的培养基上 ,铺地锦试管苗生
根效果较好 ,生根率可达 94. 6% ,根系发达 ,植株生
长旺盛。
在炼苗中 ,选择珍珠岩+ 泥炭 ( 1∶ 1)配方可加
速其后期生长 ,利于试管苗的成活及生长 ,以便尽早
成苗。
参考文献:
[1 ] 中国科学院中国植物编辑委员会 . 中国植物志 (第五十三卷第
一分册 ) [M ] .北京:科学出版社 , 1984.
[ 2 ] 夏汉平 ,刘世忠 ,敖惠修 . 介绍两种优良的 “铺地”植物 [ J ].中
国园林 , 2002( 4): 78-80.
[3 ] 马国华 ,林有润 ,简曙光 ,等 . 野牡丹和地稔的组织培养及植株
再生 [ J] .植物生理学通讯 , 2000, 36( 3): 233-234.
[4 ] 韦三立 . 花卉组织培养 [M ].北京:中国林业出版社 , 2001.
97第 2期 杜志辉等 诱集带诱杀对苹果二斑叶螨发生为害的控制效果