全 文 ：2008年 6月 第 10卷 第 6期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Jun.2008 Vol.10 No.6
■ [基金项目 ] 2006年度广东药学院新药研发基金项目(xy06-01)
[通讯作者 ] ＊林元藻 , E-mail:linxy@163.com。
余甘子抗疲劳 、抗缺氧作用实验研究■
崔炳权1 , 黄伟侨 2 , 林元藻1＊
(1.广东药学院生物化学与分子生物学教研室 , 广东 广州 510006;
2.广州中山大学附属第一医院药学部 , 广东 广州 510080)
[摘要 ] 目的:研究余甘子的抗疲劳 、 抗缺氧作用及其机制。方法:用不同剂量余甘子水提取物给正常小鼠
连续灌胃 30d, 测定其负重游泳时间 、 抗缺氧时间;检测运动小鼠血中血红蛋白 、 乳酸 、 尿素氮 、 肝糖原含量及乳
酸脱氢酶活性。结果:余甘子水提取物能延长小鼠的抗缺氧时间和游泳时间;显著提高小鼠血中血红蛋白含量 、 乳
酸脱氢酶活性和肝糖原含量;显著降低血中乳酸 、 尿素氮含量。结论:余甘子具有显著的抗疲劳 、 抗缺氧功效。
[关键词 ] 余甘子;抗疲劳;抗缺氧
余甘子又名山油柑 、油甘子 、 余甘果等 , 为大
戟科叶下珠属植物余甘子(PhylanthusemblicaL.,
PEL)的成熟果实 , 广泛分布在广东 、 福建 、 台湾 、
贵州 、 湖南 、广西 、 四川 、 浙江和云南等省区。余
甘子性味甘 、 酸 、 涩 、 凉。归肺 、 胃经 。其功能与
主治为清热凉血 , 消食健胃 , 生津止咳。用于血热
血瘀 , 消化不良 , 腹胀 , 咳嗽 , 喉痛 , 口干 [ 1] 。明
《本草纲目》 曾记载:“余甘子果 , 主补益气 , 久服
轻身 , 延年益寿 ”。对余甘子药理作用的研究报道
很少 , 本实验研究了余甘子的抗疲劳 、抗缺氧作用 ,
旨在为研究余甘子的药理作用机制提供资料 , 为余
甘子的食用和药用价值的开发提供实验依据。
1 材料
1.1试药
余甘子采购自四川盐源县 , 经广东药学院中药
学院药用植物与中药鉴定学教研室李书渊教授鉴定
为大戟科叶下珠属植物余甘子的成熟果实。余甘子
水提取物:将余甘子晾干 , 取适量余甘子 , 常规水
煎 2次 , 过滤后混合并浓缩成 1g生药·mL-1的水煎
液 , 4℃保存备用 。试验中用蒸馏水将水煎液配成不
同浓度 。血乳酸 、 血尿素氮 、 肝糖原 、 血红蛋白 、
血乳酸脱氢酶活性测定采用南京建成生物研究所生
产的试剂盒 。
1.2仪器
小鼠游泳缸(自制 ,规格 50cm×40cm×30cm),
721分光光度计(上海精密科学仪器有限公司), 广
口瓶(250mL)。
1.3动物
实验动物:昆明种清洁级小鼠 , 雌雄兼用 , 体
重为(20±2)g, 由广州市白云区穗北实验动物养
殖场提供。
2 方法
取 200只小鼠 , 随机分为 4组:对照组及余甘
子水提取物大 、中 、 小剂量组 。对照组每只小鼠每
天灌胃蒸馏水 0.5mL, 余甘子水提取物高 、 中 、 低
剂量组小鼠分别按 0.5, 0.3, 0.1g· kg-1剂量 , 每
只每天灌胃 0.5mL相应浓度余甘子水提取物 , 连续
30d。小鼠每次灌胃前断食 2h, 每天灌胃 1次 , 基
础饲料自由摄食 , 2d换水 1次。
2.1抗疲劳实验 [ 2, 3]
2.1.1游泳实验 小鼠连续灌胃给药 30d后 , 从每
组随机抽出 10只 , 在末次灌胃 1h后 , 负重体重
5%(保险丝), 放入自制游泳缸游泳 , 水深 25cm,
水温 25℃, 记录游泳开始到小鼠游泳疲劳而沉入水
中 8s不能浮起为止的时间 , 为游泳时间 。
2.1.2血红蛋白及血清中乳酸 、乳酸脱氢酶测定
小鼠连续灌胃给药 30d后 , 分别从低 、 中 、 高剂量
组和空白对照组中随机取出 10只 , 于末次灌胃 1h
后 , 负重体重 2%放入游泳缸游泳 30min后取出 ,
休息 15min立即采用摘眼球法取血 , 血液分为 2份:
一份加肝素抗凝制备全血 , 按照试剂盒的方法测定
血红蛋白(Hb), 另一份分离出血清 , 按照试剂盒的
方法测定血清中的乳酸 、 血清乳酸脱氢酶活性 , 酶
活性单位用 U· mL-1表示。
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DOI :10.13313/j.issn.1673-4890.2008.06.014
2008年 6月 第 10卷 第 6期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Jun.2008 Vol.10 No.6
2.1.3血清尿素氮含量测定 小鼠连续灌胃给药 30d
后 , 分别从低 、 中 、 高剂量组和空白对照组随机取
出 10只 , 于末次给药 1h后 , 无负重游泳 90min结
束后 , 摘眼球取血采取小鼠血液 , 分离血清 , 按照
试剂盒的方法测定血清尿素氮含量。
2.1.4肝糖原含量的测定 小鼠连续灌胃给药 30d
后 , 每组取 10只于末次灌胃 1h后处死 , 立即取出
肝脏 , 以生理盐水冲洗干净并用滤纸吸干 , 准确称
取肝脏组织 , 按照试剂盒说明书的方法测定实验小
鼠的肝糖原含量 。
2.2密闭缺氧实验[ 3, 4]
小鼠连续灌胃给药 30d, 于末次给药 1h后 , 将
每组 10只小鼠分别放入盛有 15g钠石灰的 150mL广
口瓶内 (每瓶只放 1只小鼠), 用凡士林涂抹瓶口 ,
盖严 , 使之不漏气 , 立即计时 , 直至小鼠呼吸停止 ,
记录小鼠在密闭广口瓶内的存活时间 。
2.3数据处理
实验结果以( x±s)表示 , 用 spss11软件进行统
计分析比较 , 采用单因素方差分析检验其显著性。
3 结果
3.1余甘子水提取物对实验小鼠游泳时间和抗缺氧
能力的影晌
结果见表 1。
表 1 余甘子水提取物对实验小鼠游泳时间和抗缺氧能力的影晌
组别 抗缺氧时间 /min Hb含量 /g·L-1 游泳时间 /min
对照组 31.82±2.94 10.28±3.42 10.21±2.16
低剂量组 40.31±3.14＊ 11.74±3.07＊ 11.47±1.98
中剂量组 47.62±3.68＊＊ 12.53±4.11＊ 13.26±2.07＊
高剂量组 53.88±4.05＊＊ 13.45±3.68＊ 17.83±2.45＊＊
注:与对照组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
从表 1小鼠的负重游泳实验结果可看出 , 与对
照组相比 , 中 、 高剂量余甘子水提取物能显著增加
小鼠的游泳时间 (P<0.05), 低剂量余甘子水提取
物也能增加小鼠的游泳时间 , 但无统计学意义(P>
0.05)。
表 1结果显示 , 余甘子水提取物能显著提高小
鼠的抗缺氧能力 。与对照比较 , 低剂量余甘子水提
取物能显著增加小鼠的抗缺氧时间(P<0.05), 而
中 、高剂量余甘子水提取物对小鼠抗缺氧时间影响
极其显著(P<0.01), 具量-效关系 。与对照比较 ,
余甘子水提取物能显著增加小鼠血中 Hb含量(P<
0.05), 但试药组间无显著性差异(P>0.05)。
3.2余甘子水提取物对实验小鼠抗疲劳生化指标的
影晌
结果见表 2。
表 2 余甘子水提取物对实验小鼠抗疲劳生化指标的影晌
组别 乳酸含量/mmol·L-1
尿素氮含量
/mmol·L-1
肝糖原含量
/mg·g-1
LDH活性
/U·mL-1
对照组 5.83±1.21 12.43±2.43 16.36±3.14 4.13±0.57
低剂量组 4.72±0.89＊ 11.38±2.01 18.87±3.46＊ 5.62±0.63＊
中剂量组 4.39±1.04＊ 10.02±1.87＊ 20.64±2.99＊＊ 6.57±0.54＊＊
高剂量组 3.84±1.17＊ 8.49±2.26＊＊ 21.35±3.23＊＊ 7.34±0.45＊＊
注:与对照组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
由表 2可知 , 与对照组相比 , 余甘子水提取
物能显著降低小鼠血中乳酸含量 (P<0.05),
但组间比较无统计学意义 ;余甘子水提取物能
降低血中尿素氮含量 , 特别是中 、 高剂量影响
显著;余甘子水提取物能显著增加肝糖原含量 ,
显著提高 LDH活性 , 但中 、 高剂量组间无显著
性差异 。
4 讨论
疲劳是机体在一定环境条件下由于长时间或过
于繁重 、紧张的劳动(包括脑力和体力)而引起的工
作效率暂时明显降低的一种生理心理现象 , 疲劳的
发生是多因素作用的结果[ 4] 。运动性疲劳是机体生
理过程不能维持其机能在一特定水平上和(或)不能
维持预定的运动强度 。剧烈运动后机体处于缺氧状
态 , 体内蓄积大量的致疲劳物质 , 主要是乳酸 、 血
氨和血尿素氮。这 3种物质的消除能使机体迅速恢
复体能 , 消除不适感 。糖原是运动能量的重要来源 ,
糖原的储存量可直接影响机体的运动能力 , 提高糖
原储备量有助于提高耐力和运动能力 , 有利于抵抗
疲劳的产生 。长时间紧张运动中体力的衰竭总是和
肌糖原的耗竭同时发生 , 肌糖原耗竭的同时 , 为维
持血糖水平肝糖原储备将减少 , 受试物能增加肝糖
原储备或(和)减少运动时肝糖原的消耗来提供更多
能量 , 因此肝糖原的含量能说明疲劳发生的快慢或
程度 [ 5] 。运动耐力的提高是抗疲劳能力增强的最有
力表现 , 游泳时间的长短可以反映运动疲劳的
程度 [ 6] 。
实验结果表明 , 余甘子水提取物能显著降低运
动小鼠血中乳酸和尿素氮的含量 , 显著提高 LDH活
性和肝糖原的储量 , 显著延长小鼠的负重游泳时间 ,
表现出明显的抗疲劳功效 , 可能的机制是余甘子水
提取物通过提高 LDH的活性迅速清除血中乳酸 , 加
强糖异生过程 , 将乳酸转变为葡萄糖或肝糖原;同
时调节并加强蛋白质 、 糖代谢 , 使其产生的中间代
谢物(酮酸 、谷氨酸等)能迅速利用血氨和血尿素氮
而抗疲劳。
小鼠在密闭容器中的存活时间反映了其抗缺氧
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2008年 6月 第 10卷 第 6期 中国现代中药 ModernChineseMedicine Jun.2008 Vol.10 No.6
的能力 。实验表明 , 余甘子水提取物能显著提高小
鼠血中 Hb的含量 , 但无量-效关系;显著延长小鼠
的存活时间 , 并表现出明显的量 -效关系 , 这说明余
甘子水提取物通过增加小鼠血中 Hb的含量而提高
其抗缺氧能力并不是唯一的途径 , 还存在其他的途
径 , 可能的机制是余甘子水提取物能明显降低小鼠
整体耗氧量 , 增加红细胞中 2, 3-二磷酸甘油酸
(BPG)含量 。BPG是人类和哺乳动物红细胞内糖酵
解旁路的中间代谢物 , 是调节 Hb与氧合能力的主
要小分子物质 , 其含量增高有利于外周毛细血管中
氧合血红蛋白(HbO2)释放更多的氧 , 供组织需氧
代谢消耗 , 在病理情况下 , BPG也是机体缺氧造血
的主要代偿因素之一 [ 7] 。此外 , 机体耐力与耐缺氧
能力密切相关 , 耐缺氧时间越长 , 耗氧量越低 , 反
映机体组织对氧的利用率越高 , 有利于体内能量的
节省 , 可以提高体力和脑力的活力效能[ 6] 。这也可
能是余甘子水提取物抗疲劳的机制之一 。以上实验
结果和分析表明 , 余甘子具有显著的抗疲劳 、 抗缺
氧功效 。
本实验对余甘子的抗疲劳 、 抗缺氧作用进行了
初步的研究 , 目的为研究余甘子的药理作用机制提
供资料 , 为余甘子的食用和药用价值的开发提供实
验依据 。
参考文献
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2002, 23(11):1201-1202.
(收稿日期 2007-10-10)
ExperimentalStudyoftheAnti-FatigueandAnti-HypoxiaFunctionofPhylanthusemblicaL.inMice
CuiBingquan1 , HuangWeiqiao2 , LinYuanzao1
(1.DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology, GuangdongPharmaceuticalUniversity,
GuangzhouGuangdong510006, China;2.DepartmentofPharmacyoftheFirstAfiliatedHospital,
SunYat-SenUniversity, GuangzhouGuangdong510080, China)
[ Abstract] Objective:Tostudytheanti-fatigueandanti-hypoxiafunctionofPhylanthusemblicaL.(PEL)
anditspossiblemechanism.Methods:AftermicewereadministratedintragastricalywithdiferentdosesofPELwa-
ter-extractsfor30days, swimmingendurancetestwasconducted, anti-hypoxiatime, physicalandbiochemicaldata
weredetermined.Results:PELwater-extractscanprolongthedurationofloaded-swimmingandanti-hypoxiatimeof
mice, significantlydecreasethecontentsofbloodlacticacid, bloodurinenitrogen, andincreasethecontentsofhepat-
icglycogenandbloodhemoglobin, significantlyimprovedtheactivityofbloodlactatedehydrogenase(LDH).Con-
clusion:PELwater-extractscanobviouslyincreasetheanti-fatigueandanti-hypoxiaabilityofmice.
[ Keywords] PhylanthusemblicaL.;Anti-fatigue;Anti-hypoxia
信息天地 十一项人参产品国家标准进行专家论证
受国家中医药管理局政策法规司委托 , 中国中药协会与全国中药标准化技术委员会 (筹)近日在京召开会
议 , 组织专家对 11项人参产品国家标准进行了审议和论证。
与会专家认为:人参产品种类较多 , 为了使标准制定更加清晰简练 , 便于推行 , 应对人参产品进行科学的分
类;对标准中涉及的名词术语进行规范;各标准之间要相互协调 , 形成体系;同时建议进一步广泛征求意见 , 定
稿前再次召开专家会议 , 充分论证 、 严格审查 、 慎重发布。与会专家同时对 11项标准逐一提出了具体修改意见 ,
建议野山参作为国家一级保护濒危药材品种 , 不宜作为商品进入流通 , 因此不宜针对其制定标准 , 但为区别于野
山参 、 促进相关产业发展 , 建议将模拟自然生态环境中生长 20年以上 、 具有野山参特征的人参产品定义为 “埜
(“野 ” 的异体字)山参 ” , 并针对 “埜山参 ” 制定分等质量标准。
本次讨论的 11项标准是国家标准委 2006年立项研究 , 由吉林人参研究院 、 国家参茸产品监督检验中心 、 吉
林省参茸办公室负责起草 , 目前正在向有关方面征求意见。
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