全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2011，26(2)∶189 ～ 190
水，ig给药(qd × 3 d)。末次给药 60 min 时，分别 ip
10 μL·g －1 0． 6%冰醋酸，观察并纪录给予醋酸后 15
min内的扭体次数，并计算镇痛百分率。取♀小鼠，
在室温 21 ± 1 ℃、热板温度 55 ± 0． 5 ℃的条件下，逐
个置于热板仪上，小鼠自放在热板上至出现舔后足
所需时间(s)作为该鼠的痛阈值，弃去反应过于敏
感(3 s出现痛反应)和反应过于迟钝(30 s 内无痛
反应)的小鼠。将合格的 50 只小鼠同法分组给药。
末次给药后 60 min时测定小鼠的痛阈值，如 60 s仍
无反应，将小鼠取出，以免烫伤，其痛阈值按 60 s 计
算(表 2)。结果显示:给药组均有抑制冰醋酸所致
小鼠躯体疼痛作用的趋势，阳性对照组及半灌木千
斤拔高剂量组与空白对照组有显著差异。表明半灌
木千斤拔具有一定的镇痛作用。给药组均有抑制
表 2 对小鼠冰醋酸致痛、热板致痛的影响(n =10，珔x ± s)
组别
剂量 /
g·kg －1
扭体反应
次数
镇痛率 /
%
给药后痛阈 /
s
空白对照 － 14． 8 ± 10． 3 － 17． 97 ± 6． 65
颅通定 0． 04 4． 6 ± 5． 66* 68． 92 34． 61 ± 11． 97＊＊
半灌木千斤拔 5 12． 4 ± 6． 92 16． 22 29． 03 ± 11． 68*
10 10． 4 ± 8． 82 29． 73 26． 44 ± 17． 58
20 6． 8 ± 4． 8* 54． 05 30． 6 ± 13． 04*
与空白对照组比:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
55 ℃热板刺激诱导的小鼠疼痛作用的趋势，阳性对
照组与空白对照组有显著差异，半灌木千斤拔低、高
剂量组与空白对照组有显著差异。提示半灌木千斤
拔具有一定的镇痛作用。
1． 2． 3 统计学处理 所有数据结果均采用
SPSS10． 0 软件进行统计学分析，数据均用均 珋x ± s
表示，组间差异采用 t检验进行统计处理。
2 讨论
实验结果显示:半灌木千斤拔能抑制二甲苯诱
发的小鼠耳廓肿胀，能抑制冰醋酸所致小鼠躯体疼
痛及 55 ℃热板刺激诱导的小鼠疼痛反应，表明其具
有一定的抗炎和镇痛作用。
参考文献:
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收稿日期:2010 － 06 － 03
作者简介:曹瑞珍(1965—) ，女，硕士，副教授，从事蒙药抗衰老药物的研究工作。Email:cao － 0825@ 163． com
地锦草总黄酮对衰老小鼠组织端粒酶表达的影响
曹瑞珍，魏永春，张国文，孙立杰
(内蒙古民族大学生命科学学院，内蒙古 通辽 028043)
摘要:目的 观察地锦草总黄酮对衰老小鼠睾丸生精细胞端粒酶表达的影响。方法 用 D －半乳糖连续 ip建立衰老小鼠模
型，并 ig给予地锦草总黄酮(TFEH) ;分别采用定量 ELISA法、硫代巴比妥酸法及黄嘌呤氧化酶法检测睾丸和脑组织中的端粒
酶、丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果 TFEH可明显提高衰老小鼠睾丸、脑组织端粒酶的含量和
SOD的活性，降低 MDA的含量，用药组与衰老模型组比较有明显差异(P ＜ 0． 05)。结论 地锦草总黄酮可明显提高衰老小
鼠睾丸、脑组织的抗氧化能力和端粒酶的含量，具有延缓睾丸、脑组织细胞衰老的作用。
关键词:地锦草总黄酮;端粒酶;衰老;抗氧化
中图分类号:R96 文献标志码:B 文章编号:1006 － 0103(2011)02 － 0189 － 02
地锦草具有清热解毒、燥黄水、活血等功效，主
要含槲皮素、山奈素等黄酮类化合物及其苷［1］。大
量的研究报道实验动物或人类组织细胞在衰老过程
中端粒酶活性的变化［2］，但单味中药对端粒酶活性
影响的研究则较少。在课题组前期研究的基础上，
作者研究了地锦草总黄酮(TFEH)对 D －半乳糖衰
老模型小鼠组织中端粒酶的影响。
1 实验部分
1． 1 动物与试药
24 只 ♂纯系昆明种小鼠［吉林大学白求恩医
学院动物实验中心，许可证号:SCXK(吉)2007 －
0003］，体重 22 ± 2 g。地锦草(内蒙古民族大学附
属医院蒙药制剂室) ;MDA、SOD 试剂盒(南京建成
生物工程研究所) ;端粒酶活性检测试剂盒(美国
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2011.02.026
Biopcr)。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 药物的配制与小鼠的分组 取 100 g 地锦
草粗粉(20 目) ，加 600 mL 75%乙醇，浸泡 12 h，回
流提取(1． 5 h × 3) ，合并提取液，回收乙醇，加蒸馏
水溶解并定容至 267 mL，配成含生药 0． 375 g·
mL －1、含黄酮 16． 7 mg·mL －1的溶液，再 2∶1 稀释成
0． 25 g·mL －1(生药) ，以此作为给药浓度。将 24 只
小鼠随机均分为正常对照组、衰老模型组、TFEH 治
疗组。对照组和模型组每次 ig 1 mL 蒸馏水;TFEH
组每天一次性活相应剂量地锦草提取液，相当于
0. 25 g·mL －1(生药) ;每天均给药 1 次，连续 8 周。
每次给药的同时，给予模型组和 TFEH 治疗组小鼠
ip D －半乳糖，每次 100 mg·kg －1，每周 5 次，连续 8
周，建立衰老模型;对照组 ip等量双蒸馏水。
1． 2． 2 测定方法 停药 1 d 后，处死小鼠，并快速
取出大脑和睾丸组织，在冰冷的生理盐水中漂洗，滤
纸拭干。以生理盐水、用组织匀浆器制成 10%组织
匀浆用于检测 MDA(硫代巴比妥酸法)、端粒酶的含
量，部分稀释成 1%的匀浆用于检测 SOD 的活性
(黄嘌呤氧化酶法 )和蛋白含量 (考马斯亮蓝显色
法) ，按试剂盒要求进行测定。端粒酶的含量检测
采用定量 ELISA 法，操作步骤按试剂盒说明书进
行，于酶标仪上于 450 nm 处测定吸光度，通过标准
曲线读取各样品 A 值对应的浓度，再除以蛋白含
量，以 nmol·g －1 protein 表示。结果显示:与正常对
照组相比，D －半乳糖致衰老模型小鼠的睾丸及脑
组织中端粒酶的含量及 SOD 的活性显著降低(P ＜
0． 05、P ＜ 0. 01) ，MDA 的含量明显升高(P ＜ 0． 05、
P ＜ 0. 01) ，D －半乳糖能引起睾丸及脑组织的氧化
损伤，进而加速衰老，引起衰老指标的改变。TFEH
能有效逆转 D －半乳糖诱导的变化，与模型组相比，
TFEH组小鼠睾丸及脑组织中端粒酶的含量及 SOD
的活性均有明显升高(P ＜ 0． 05、P ＜ 0． 01) ，而 MDA
的含量显著降低(P ＜ 0． 05、P ＜ 0． 01) (表 1)。
表 1 各组小鼠脑组织中端粒酶、MDA的含量及 SOD的活性比较(珔x ± s，n =8)
组别
SOD /U·mg －1
testis brain
MDA /nmol·mg －1
testis brain
端粒酶 /nmol·g － 1
testis brain
正常对照组 127． 92 ± 9． 27 178． 7 8 ± 18． 1 6 0． 58 ± 0． 035 1． 21 ± 0． 12 1． 36 ± 0． 25 1． 09 ± 0． 31
模型组 113． 48 ± 11． 48▲▲ 141． 27 ± 16． 78▲▲ 0． 62 ± 0． 043▲▲ 1． 55 ± 0． 45▲ 1． 17 ± 0． 28▲ 0． 91 ± 0． 23▲
TFEH组 122． 37 ± 10． 19* 155． 42 ± 19． 65▲▲＊ 0． 57 ± 0． 061* 1． 32 ± 0． 33* 1． 63 ± 0． 44* 1． 33 ± 0． 34▲＊＊
与正常对照组比较:▲P ＜ 0． 05，▲▲P ＜ 0． 01;与模型组比较:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
1． 2． 3 统计学处理 所有实验数据以 珋x ± s 表示，
采用 t检验进行统计处理。
2 讨论
SOD催化超氧阴离子自由基生成过氧化氢和
氧气，可减少自由基带来的氧化损伤［3］。随着年龄
增长，人体清除自由基的能力(如 SOD活性等)随之
下降;自由基引发脂质过氧化的终产物丙二醛
(MDA)逐渐增多，若未能及时补充抗氧化物(如抗
衰老中药、维生素等) ，细胞就开始损伤并产生疾
病;同时，老化是和端粒酶活性下降有关的，而端粒
酶是重要的延长端粒的因素，可通过反转录的方式
合成染色体末端 DNA的重复序列，从而维持端粒长
度的稳定［4］。研究表明:活性氧可通过基因表达和
转录控制端粒酶，使端粒酶的活性降低;反过来，端
粒酶也可对抗氧化应激反应［2］，二者在衰老过程中
均发挥着重要作用。
半乳糖在体内代谢过程中可以产生过量的超氧
阴离子自由基，从而引起过氧化效应，构成机体衰老
的启动因素［5］。D －半乳糖致衰老模型在一定程度
上体现了自然衰老的状态和机制。文中研究显示:
地锦草总黄酮(TFEH)能明显提高实验性衰老小鼠
脑及性腺组织的 SOD和端粒酶含量、降低脂质过氧
化产物 MDA水平，明显提高睾丸、脑组织的抗氧化
能力。地锦草的抗氧化作用及提高端粒酶的含量主
要与其有效成分有关，而地锦草延缓衰老的机制可
能与其有效成分黄酮类化合物可增加脑、性腺的端
粒酶和 SOD的表达有关。
参考文献:
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收稿日期:2010 － 05 － 15
091 华 西 药 学 杂 志 第 26 卷