全 文 ：地锦草总黄酮对老化模型小鼠血清衰老指标的影响
曹瑞珍　张国文　佘集凯　乔　伟　薛　艳　(内蒙古民族大学生命科学学院 ,内蒙古　通辽　028041)
　　〔摘　要〕　目的　探讨地锦草总黄酮(TFEH)对老化模型小鼠的抗衰老作用机制。方法　D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠共 40d,分为正常对
照组 、模型组 、TFEH大 、小剂量组 ,检测各组小鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平变化。 结果　
TFEH能显著降低 D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠血清 MDA水平(P<0.01),能明显升高血清 SOD、GSH-Px活性(P<0.01)。结论　TFEH可通过
抗氧化作用而延缓衰老。
〔关键词〕　地锦草总黄酮;D-半乳糖;老化模型;抗氧化
〔中图分类号〕　R977.9;R339.3+8　　〔文献标识码〕　A　　〔文章编号〕　1005-9202(2008)06-0562-02
作者简介:曹瑞珍(1965-),女 ,硕士,副教授 ,主要研究蒙药抗衰老。
　　蒙药地锦草(TFEH)具有清热解毒 、燥黄水 、活血等多种功
效 〔1, 2〕 , 通过现代药理学研究证实地锦草主要含有槲皮素及其
甙 、山奈素及其甙等黄酮类化合物 〔3〕。本课题组前期研究了地
锦草药理学活性 , 发现在体外其水及乙醇提取物具有良好的抗
脂质过氧化等作用 〔4〕 , 在此基础上观察地锦草乙醇提取物对衰
老模型小鼠血清衰老指标的影响 ,进一步研究其在体内的抗氧
化作用及机制。
1　材料与方法
1.1　实验动物及分组　8 ～ 10 w龄昆明种雄性健康小鼠 40
只 , 体重(20±2)g,由锦州医学院实验动物中心提供。饲养环
境:温度 22 ～ 25℃, 湿度 70%。将 40只小鼠随机分为正常对照
组 、模型组 、TFEH大 、小剂量组 , 除正常对照组外 , 其余各组小
鼠每天皮下注射 D-半乳糖(D-gal)1 g/kg, 持续 40 d,正常对照
组小鼠每天皮下注射等量生理盐水。大 、小剂量组每天相应按
生药 0.25 g/ml、生药 0.125 g/mlTFEH灌胃 , 正常对照组及模
型组用等量生理盐水灌胃 , 连续 40 d。 实验结束时断头取血 ,
离心取血清 , 按试剂盒说明检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。
1.2　药品制备　地锦草购于内蒙古民族大学附属医院蒙药制
剂室。取地锦草粗粉(20目)150 g加 75%乙醇 900 ml, 浸泡
12 h,回流提取 1.5h,提取 3次 ,合并提取液 , 回收乙醇 ,加蒸馏
水溶解并定容至 400 ml,配成 1 ml含生药 0.375 g,黄酮含量为
16.7 mg/ml(经蒙医药学院蒙药分析化学教研室检测), 再 2∶1
稀释成生药 0.25 g/ml, 以此作为高剂量组的给药浓度。再配
制低剂量组的给药浓度生药 0.125 g/ml。
1.3　实验试剂 　D-gal, 上海试剂二厂产品;MDA、SOD及
GSH-Px测定试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品。
1.4　数据处理　实验数据均以 x±s表示 ,采用 t检验 。
2　结　果
　　模型组小鼠血清 MDA含量明显高于正常对照组(P<
0.01), SOD和 GSH-Px活性低于正常对照组(P<0.01), 表明
衰老模型组小鼠体内自由基代谢异常。 TFEH大 、小剂量组均
能明显降低衰老小鼠血清 MDA含量 ,并能提高 SOD和 GSH-Px
活性 , 与模型组比较差异具有显著性(均 P<0.01), 见表 1。
表 1　地锦草总黄酮对 D-gal致衰小鼠血清 MDA、
SOD和 GSH-Px的影响(x±s, n=10)
组别 MDA(nmol/ml) SOD(U/ml) GSH-PX(U/ml)
正常对照组 4.71 ±1.49 310.38±103.42 298.57 ±60.03
模型组 7.39 ±1.691) 219.08±59.751) 217.43 ±55.431)
低 TFEH组 5.52 ±1.212) 297.12±56.462) 279.38 ±49.762)
高 TFEH组 4.93 ±0.892) 302.24±46.432) 282.65 ±72.322)
　与正常对照组比较:1)P<0.01;与模型组比较:2)P<0.01
3　讨　论
　　D-gal可由半乳糖氧化酶催化生成醛糖和过氧化氢 , 产生
超氧阴离子自由基。 D-gal早衰模型动物衰老指标的变化与人
体衰老指标改变规律基本一致 。因此 D-gal的长期作用相当于
生命过程中产生的自由基引起的衰老作用 , D-gal的衰老反应
接近或相当于自然衰老 〔5〕。即防御自由基的抗氧化剂或酶类
物质如 SOD、GSH-Px下降 , 使过氧化脂质逐渐增多;此变化与
本实验结果一致。
　　化合物中的酚羟基是抗脂质过氧化作用的功能基团 , 地锦
草所含黄酮类化合物槲皮素及其甙 、山奈素及其甙等 ,含有酚
羟基结构基团 , 能明显提高血液中 SOD和GSH-Px的活性 , 降低
过氧化脂质含量。本实验结果显示大 、小剂量 TFEH均可明显
提高血清 SOD和 GSH-Px活性并降低血清 MDA含量。 提示
TFEH可通过补充外源性抗氧化物质或促进机体产生内源性抗
氧化物质 , 清除自由基 ,抑制脂质过氧化损伤 ,延缓衰老。
4　参考文献
1　中国医学百科全书编辑委员会.中国医学百科全书· 蒙医学〔M〕.
上海:上海科技出版社 , 1992:120.
2　马清钧.常用中药现代研究与临床 〔M〕.天津:天津科技翻译出版
社 , 1995:320.
3　孔令义 ,王汉波 , 柳润辉 .地锦草化学成分的研究 〔J〕.中草药 ,
2001;32(2):107.
4　曹瑞玲.大戟科植物地锦草的药效学研究探讨〔J〕.中医药学刊 ,
·562· 中国老年学杂志 2008年 3月第 28卷
2003;21(6):892.
5　华　东 , 苏云明 , 刘春华 , 等 .健脑益寿胶囊对衰老模型小鼠血清
SOD及GSH-Px的影响〔J〕.中医药学报 , 2005;34(4):38-9.
〔2007-04-03收稿　 2007-06-25修回〕
(编辑　袁左鸣)
蜂胶黄酮对衰老模型小鼠脑组织抗氧化作用的影响
张　悦　赵　蕾　凌春莹　张鹏霞 1　(哈尔滨医科大学大庆校区 ,黑龙江　大庆　163319)
　　〔摘　要〕　目的　研究蜂胶黄酮对 D-半乳糖致衰老小鼠神经细胞抗氧化作用。方法　以 D-半乳糖侧腹部注射小鼠 ,同时连续灌服蜂胶黄酮
25d,分别检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)以及过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果　蜂胶黄酮可使衰老模型小鼠脑组
织中 SOD、CAT活性明显增高 ,和衰老模型组相比具有显著差异(P<0.01);使脑组织 MDA明显降低 , 和衰老模型组相比具有显著差异(P<0.01)。
结论　蜂胶黄酮可有效地提高脑组织中抗氧化酶的活性 ,有效地增强小鼠机体抗氧化能力。
〔关键词〕　蜂胶黄酮;衰老模型小鼠;抗氧化
〔中图分类号〕　R-332　　〔文献标识码〕　A　　〔文章编号〕　1005-9202(2008)06-0563-02
基金项目:黑龙江省卫生厅科研项目(2006318)
1　佳木斯大学基础医学院
通讯作者:张鹏霞(1967-)女 ,硕士生导师 , 教授 , 主要从事抗衰老药物
研究。
作者简介:张　悦(1965-),女 ,硕士 , 副教授 ,主要从事中西医结合抗衰
老研究。
　　蜂胶黄酮是蜂胶中所含的主要有效成分之一 ,具有很大的
研究与开发潜力 〔1〕。但对蜂胶黄酮抗氧化研究大多围绕着对
鼠肝脏损伤的保护作用等方面 〔2〕 , 对脑组织抗氧化作用国内外
研究较少。本实验旨在观察蜂胶黄酮对 D-半乳糖致衰小鼠抗
氧化能力的影响 , 为更好地利用蜂胶提供科学的理论依据。
1　材料与方法
1.1　材料　蜂胶黄酮由黑龙江中医药大学生化教研室采用醇
提取 , 黑龙江省中药研究所鉴定并测定含量 , 稀释成黄酮含量
为 15mg/ml使用。 D-半乳糖购于 Sigma公司 ,超氧化物歧化酶
(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)测定试剂盒及双缩
脲蛋白标准试剂盒 , 购自南京建成生物工程研究所。紫外可见
分光光度计(WF2800-D3A)为北京第二光学仪器厂 , 高速冷冻
离心机(D-37520型)为德国 HERAEUS公司产品。
1.2　方法
1.2.1　分组　昆明种 4月龄健康小白鼠 30只 , 体重(30 ±
2)g, 雌雄各半 ,常规喂养 6 d, 随机分为空白对照组(A)、D-半
乳糖衰老模型(B)组和蜂胶黄酮(C)组 , 每组 10只 ,另 16月龄
同品系小鼠 10只作为正常老年对照组。实验小鼠均由黑龙江
中医药大学实验动物中心提供。
1.2.2　衰老动物模型的建立　B组和 C组每天用 D-半乳糖
100mg/kg颈背部皮下注射连续 30 d, A组皮下注射等剂量生
理盐水 , 自由进食水。造模同时 C组灌胃蜂胶黄酮 300 mg/kg,
A组及 B组灌服等量生理盐水 , 早晚各 1次 , 连续给药 25 d,于
末次给药 24h处死动物。取出脑组织 , 在冰水浴中分别制成
10%的脑组织匀浆进行各项指标测定。
1.2.3　生化指标测定　双缩脲法测定脑组织蛋白含量 , SOD
活性测定采用黄嘌呤氧化酶法 , CAT测定参照试剂盒说明 ,
MDA含量测定采用硫代巴比妥酸(TBA)法。
1.3　统计学处理　采用 SPSS11.0软件进行齐性检验并作方
差分析。
2　结　果
　　蜂胶黄酮对小鼠脑组织中 SOD、CAT和 MDA活性的影响
　见表 1。衰老模型组抗氧化酶 SOD和 CAT活性降低 ,蜂胶黄
酮明显升高小鼠脑组织的 SOD和 CAT活性。 衰老模型组
MDA含量增加 , 蜂胶黄酮明显降低小鼠脑组织的 MDA含量。
表 1　蜂胶黄酮对衰老模型小鼠脑组织中 SOD、
CAT及 MDA活性的影响(x±s, n=10)
组别 SOD(nU/mg) CAT(U/mg) MDA(nmol/mg)
A组 15.92±2.07 4.374±1.609 7 0.987 2±0.132 3
B组 9.020±3.651) 1.065±0.436 81) 1.407 2±0.189 81)
C组 15.16±2.172) 4.203±0.446 92) 1.017 0±0.168 02)
　与 A组比较:1)P<0.01,与 B组比较:2)P<0.01
3　讨　论
　　有研究表明 , 老年人及衰老动物的心脏 、脑等组织中有大
量脂褐质存在 , 且随年龄的增加而增加。 此外帕金森病患者脑
组织黑质区也可见 MDA、脂褐质的增加。 MDA作为脂褐质形
成过程中的中间产物 ,其含量能间接反映机体内自由基的产生
情况和机体组织细胞的脂质过氧化程度。因此一般认为 , MDA
可以作为评价衰老的指标之一 〔3〕。本研究也表明 ,蜂胶黄酮可
以抑制 D-半乳糖衰老模型小鼠 MDA含量的升高。
　　SOD是机体内清除自由基的重要抗氧化酶之一 〔4〕。它可
作为体内抗氧化系统的一种主要酶类 ,其活性随着年龄增长而
减弱 , 是衰老的重要指标之一。 SOD主要有 Cu, Zn-SOD、Mn-
·563·张　悦等　蜂胶黄酮对衰老模型小鼠脑组织抗氧化作用的影响　第 6期