全 文 ：糖负荷大鼠血糖升高 , 并且 具有醛糖还原
酶抑制活性 ( IC S。 为 3 . 6协官mL ) 、 佛清除活
性 ( S C S。 为 3 . 1“留m L ) 以及抑制 N O 生成
活性 ( IC , 。为 5 2砰g/ m L ) 。
36 5 中国五层龙中的抗糖尿病成分 〔 日 〕 /
吉川雅之…
由于泰国产 中国五层龙的 80 % 甲醇提
取物具有 Q 一葡糖昔酶抑制活性和抑制蔗糖
负荷大鼠血糖升高的作用 , 故对其活性成
分进行了筛选 。 在分离得到 已知活性成 分
s a l a e i n o l ( 6 ) 的同时 , 还分离到 5 种新的
木栓烷型三菇烯 。
中国五层龙的 80 % 甲醇提取物用水 -
乙酸 乙酷分配 , 得到水溶部分与 乙酸 乙酷
部分 。 具有 Q 一葡糖昔酶抑制活性的水溶 部
分上 N H 柱层析 , 并用 H P L C 反复分离纯
化 , 得到 s a l a e in o l ( 6 ) , 并进行了鉴定 。 乙
酸乙酷部分经正相 510 2 、 反相 O D S 柱层析
及 H P L C 反复分离纯化得到角鳖烯 ; 2 种乌
苏烷型 、 5 种齐墩果烯型 、 7 种木栓烷型 、
3 种醒 甲基化物 ( q u i n o n e m e ht id ) 型三菇
烯 ; 1 种 p一沉香吠喃型倍半菇 ; 3 种黄烷醇
及 1 种 木脂素 。 分离得到新的木栓烷型三
菇烯 c h i n e n s ig e n i n A 一 E ( l 一 5 ) , 用化学及
物理化学方法确定了化合物 l ~ 5 的化学结
构 。 另外还报告 了三菇成 分的醛糖还 原酶
抑制活性 。
类 , 因而推测其除含有与黄酮类化 合物生
物合成相关的查耳酮合成酶 ( C H )S 外 , 还
含有蔑合成酶 、 葱醒合成酶及多聚 乙酸合
成 酶等 。 因此对这些酶基 因进行克隆 , 并
进行了功能分析 。
方法与结果 : 将从掌叶大黄 ( hR ~
aP 加 a ut m ) 幼苗的叶和根 中提取 的 RN A 作
为模板 , 分别 RT 一 P C R 。 以 C H S 超 家族原
有序列为基础 , 用设计的简并 引物 ( 约为
6 0 0b p )
, 经 5 ’ 一及 3 ’~ RA c E 法得到 由全长约
1
.
s kb p 组成的数种 c D N A 克隆 。 其中从叶
中得到的 由 383 个氨基酸序列 组成 的编码
O灯 的克隆 , 尽管与源于其他植物的 C H S
有约 70 % 的同源性 , 但是 , C H S 超家族原
有的活性部位序列缺少 L Z`sF G D (另外 , 与
此有约 60 % 同源性的根的克隆含有这种序
列 ) 。 将这种克隆在大肠菌 中异种表达 , 以
香豆酞 C o A 与丙二酞 C O A 为底物探讨酶活
性 , 在得到 C L AL 的同时还得到了未知 的
反应生成物 。 目前 , 在确定这种生成物结
构的同时 , 正在对其他克隆进行功能分析 。
并且为了对用 D N A 探针的葱醒合成酶进行
克隆 , 正在构建 。 D N A 文库 。
3 6 9 大黄中多聚 乙酞合成酶的克隆与功能
分析 ( 1 ) 〔 日 〕 / 阿部育朗…
大黄 中含 有 大量 的茂 衍 生 物和 葱醒
3 7 0 日本蝮蛇中的 b l o m h o t i n 对肥大细胞
的激活作用 〔 日 〕 / 土井康弘…
b l o hnr
o t i n 是从 日本蝮蛇 ( A沙 s otr do n
ha 妙: b lo o h口价妇 毒汁中分离的由 1 个氨基
酸组成的新肤 。 bl ohm ot in 的衍生物 B H Z一 , ,
可增 强血管通透性 , 而且 【P he 勺B H Z 一 , ; 的
作用强于 B H Z一 ; 【, 本次探讨了其作用机制 。
方法 : ①增强 血管通透性 : 对 大 鼠静