全 文 ：中图分类号:R996　　文献标识码:A　　文章编号:1002-3127(2005)04-0295-02 ·实验研究·
网状五层龙热水提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用
宫德正 ,耿成燕 ,姜丽萍 ,李秋娟 ,仲来福
(大学医科大学中日合作医药科学研究所 ,辽宁 大连 116027)
关键词:网状五层龙热水提取物;四氯化碳;肝保护
基金项目:日中替代医疗食品研究基金资助(030901)
作者简介:宫德正(1965-),男 ,学士 ,研究方向:肝细胞保护。
通讯作者:仲来福 ,男 ,教授 ,博士生导师 ,研究方向:肝脏毒理学。
　　网状五层龙(salacia reticulata)产于斯里兰卡和印
度的南部 ,自古以来便被当地人们作为草药来防治一
些疾病 ,民间常用于保肝 、风湿病 、镇痛 、皮肤病 、淋病 、
闭经 、抗炎和糖尿病等[ 1 ,2] ,近年还发现网状五层龙根 、
茎部提取物中含有可竞争抑制小肠黏膜刷状缘内α-
葡糖苷酶的抑制剂 ,从而延迟蔗糖 、麦芽糖和淀粉等多
糖分解为单糖并经肠道吸收 ,降低餐后高血糖和缓解
胰高血糖症[ 3] 。但是网状五层龙其他的传统作用还没
有得到科学证实 ,为此我们采用网状五层龙热水提取
物(hot water extract from Salacia reticulata , SRHW)对四
氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用进行了
研究 。
1　材料与方法
1.1　受试物　SRHW ,系棕红色粉末 ,由日本松浦药业
株式会社提供。临用前以质量浓度为 5%的阿拉伯树
胶配制成质量浓度为 0.2%、0.4%和 0.8%的 SRHW
混悬液 ,灌胃给药(ig),容量为 25 ml/kg 体重 。
1.2　试剂与仪器 　CCl4 分析纯 ,南京化学试剂厂产
品 ,7060型自动生化分析仪 ,日本日立公司产品。
1.3　动物及处理　SPF 级昆明种小鼠 60只 ,体重 18
～ 22 g ,雌雄各半 ,由大连医科大学实验动物中心提
供。用前检疫 1周 。随机分为 6组 ,每组 10只 ,分别
为:对照组 , ig 给予 5%阿拉伯树胶 ,容量 25 ml/kg 体
重;仅 ig SRHW (2.0 g/kg 体重)组 ,仅腹腔注射(ip)
CCl4 组;另 3组用 SRHW 预处理后 1 h , ip CCl4 ,SRHW
的剂量分别为 0.5 、1.0和 2.0 g/kg 体重。各组实验动
物实验前禁食 12 h ,不禁水。
1.4　急性肝损伤模型的制备　将 CCl4 与玉米油混
合 ,配成体积分数为 2%的 CCl4 溶液。以 25 ml/kg 体
重 ,一次性给小鼠腹腔注射(ip),24 h 后由内眦静脉取
血 ,处死动物后剖取肝组织。
1.5　检测指标　离心分离血清 。用自动生化分析仪
测定丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活
力。采用 TBA比色法 ,测定肝组织中丙二醛(MDA)含
量。
在肝右叶切取小块组织 ,立即用体积分数为 10%
的甲醛固定 ,石蜡包埋 ,制片 ,HE染色。肝小叶组织形
态可区分为两部分 ,即基本正常或轻度脂变带与坏死
(并重度脂变)带 。利用目镜测微仪测量带宽 ,每只小
鼠的 2类区带各随机测10处 ,求每组小鼠肝小叶基本
正常或轻度脂变带与坏死带各自的平均值与在肝小叶
中所占宽度的百分比 。
1.6　统计学方法　数据以 x ±s 表示 ,用 t 检验比较
组间差异 。
2　结果
2.1　SRHW对 CCl4处理小鼠血清ALT 、AST 水平的影
响　结果如表 1所示 。仅给予 CCl4 组动物的 ALT 和
AST 水平显著高于对照组和仅给予SRHW(2.0 g/kg 体
重)组(P<0.01),表明 CCl4 破坏肝细胞 ,使转氨酶逸
入血液 。对照组和仅给予 SRHW(2.0 g/kg 体重)组之
间比较 ,ALT和 AST 水平差异无显著性(P >0.05),表
明SRHW本身对肝细胞无损伤作用 。SRHW预处理 1
h后 ,给予 CCl4 组 ,其 ALT 和 AST 水平显著低于仅给
予CCl4 组(P <0.05或 P<0.01),且呈剂量依赖关系 。
表明SRHW有防护肝细胞并减轻 CCl4 对肝细胞的损
伤。
2.2　SRHW对 CCl4 所致小鼠肝组织 MDA含量的影响
　结果如表 2。仅给予 CCl4 组的MDA含量明显高于
对照组 ,其差异有显著性(P <0.01);SRHW 预处理组
的MDA水平明显低于 CCl4 损伤组 ,2组间差异有显著
性(P <0.05 , P <0.01),且有剂量依赖关系。表明
SRHW具有显著的抗脂质过氧化作用。
·295·毒理学杂志 2005年 12月第 19卷第 4期　J Toxicol December 2005 Vol.19　No.4
DOI :10.16421/j.cnki.1002-3127.2005.04.016
表 1　SRHW对 CCl4 处理小鼠血清 ALT、AST水平的影响( x±s)
组别 SRHW(g kg体重)
ALT
(U L)
AST
(U L)
SRHW 2.0 41.2±10.05 124.3±32.39
CCl4(0.5 ml kg) 0.0 12 804±5 374## 14 868±7 634##
SRHW+CCl4 0.5 8 868±4 827## 9 438±6 126##
SRHW+CCl4 1.0 7 969±2 024＊## 9 194±3 403＊##
SRHW+CCl4 2.0 6 770±2 442＊＊## 5 988±2 574＊＊##
对照 0.0 41.4±9.920 123.3±73.74
　　与对照组比较 , ##P<0.01;与 CCl4 组比较 , ＊P<0.05 , ＊＊P <0.01;n =
10 。
表2　SRHW对 CCl4 处理小鼠肝组织MDA 含量的影响( x±s)
组别 n SRHW(g kg)
MDA
(nmol ml)
SRHW 10 2 3.85±0.58
CCl4 10 0 7.11±0.81##
SRHW+CCl4 10 0.5 6.32±0.30＊
SRHW+CCl4 10 1.0 5.15±0.31＊＊
SRHW+CCl4 10 2.0 4.55±0.56＊＊
对照 10 0 3.90±0.39
　　与对照组比较 , ##P<0.01;与 CCl4 组比较 , ＊P<0.05 , ＊＊P <
0.01。
2.3　SRHW 对 CCl4 所致小鼠肝组织病理学改变的影
响　对照组肝小叶基本正常或有轻度肝细胞水肿;仅
给予 SRHW 组肝小叶也基本正常。给予 CCl4 各组肝
细胞基本正常或轻度脂变带均位于肝小叶周边 ,围绕
汇管区;而坏死(并重度脂变)带位于肝小叶中央 ,围绕
中央静脉 。测量结果如表 3所示 。坏死(并重度脂变)
带宽度平均值与占肝小叶宽度的百分数在仅给予 CCl4
组为 112μm 与59.07%,SRHW 0.5 g/kg 体重预处理+
CCl4组为 96.2 μm 与 51.92%,SRHW 1.0 g/kg 体重预
处理+CCl4 组为 40.9 μm与 21.76%,SRHW 2.0 g/kg
体重预处理 +CCl4 组为 45.9 μm 与 22.52%。表明
SRHW能保护肝组织免受CCl4 损伤 。
3　讨论
SRHW可显著降低 CCl4 染毒小鼠血清 ALT ,AST
活力和肝组织 MDA含量 ,并有剂量依赖关系 。SRHW
还可缩小肝组织的坏死面积。提示 SRHW 具有明显
保护 CCl4引起的小鼠急性化学性肝损伤的作用 ,其机
　　
表 3　SRHW对 CCl4 所致小鼠肝脏组织病理学的影响( x±s)
组别
基本正常和
轻度脂变带
宽度(μm)
基本正常和
轻度脂变带
宽度占肝小叶
宽度(%)
坏死并重度
脂变带宽度
(μm)
坏死并重度
脂变带宽度
占肝小叶
宽度(%)
CCl4
(0.5 ml kg)
77.6±43.35
　
40.93
　
112.0±52.31
　
59.07
　
SRHW
(0.5g kg)
+CCl4
89.1±22.34
　
　
48.08
　
　
96.2±29.19
　
　
51.92
　
　
SRHW
(1.0 g kg)
+CCl4
147.1±75.0＊
　
　
78.24
　
　
40.9±31.08＊＊
　
　
21.76
　
　
SRHW
(2.0 g kg)
+CCl4
157.9±66.8＊＊
　
　
77.48
　
　
45.9±41.97＊＊
　
　
22.50
　
　
　　与 CCl4 组比较 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01;n=10。
制可能与抗脂质过氧化有关。
　　目前肝炎发病严重 ,开发有效的保肝药物已成为
国内外医药学者探讨和研究的重要课题 。动物实验结
果表明 ,网状五层龙热水提取物可显著减轻 CCl4 引起
的小鼠急性化学性肝损伤的作用 ,起到了保肝作用。
因此本实验为开发网状五层龙热水提取物作为保肝的
药物或替代医疗食品提供确切的实验证据。该产品的
保肝作用机制尚待进一步研究 ,根据实验结果初步分
析 ,其作用机制可能是通过抗自由基损伤来实现保肝
作用 。
(本文组织学检查和测量由病理学张众教授完成 , 特此致
谢。)
参考文献:
[ 1 ] 　Jayaweera DMA.Medicinal Plants Used in Ceylon Part
1.Colombo:National Science Council of Sri Lanka.1981.77.
[ 2 ] 　Ganapathy PM.Indian Medicinal Plants.In:Warrier PK , Nambiar
VPK , Ramankutty C , ed.Orient Longman.Hyderabad.1993.47-48.
[ 3 ] 　Yoshikawa M , Toshiyuki M , Shimada H , et al.Salcinol , Potent
Antidiabetic With Unique Thiosugar Sulfonium Sulfate Structure
From The Ayurvedic Traditional Medicine Salacia reticulata In
Sri Lanka And India.Tetrahedron Let , 1997 , 38:8367-8370.
(收稿日期:2004-09-13)
·296· 毒理学杂志 2005年 12月第 19卷第 4期　J Toxicol December 2005 Vol.19　No.4