全 文 ：收稿日期:2008-12-29;　修订日期:2009-05-20
基金项目:海南省自然科学基金(No.808144)
作者简介:王天山(1979-),男(汉族),海南澄迈人 ,现任海南师范大学化
学与化工学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事天然产物化学研究工作.
＊通讯作者简介:陈光英(1971-), 女(汉族),四川射洪人 , 现任海南师范
大学化学与化工学院教授 ,博士学位 ,主要从事天然产物化学研究工作.
海南假韶子叶子中脂溶性木栓烷型三萜化合物
王天山 1 ,陈光英1＊ ,钟琼芯 2 ,纪明慧1 ,李天略 1
(1.海南省热带药用植物化学重点实验室·海南师范大学化学与化工学院 ,海南 海口　571158;
2.海南师范大学生命科学学院 ,海南 海口　571158)
摘要:目的 研究海南假韶子叶子中脂溶性浸膏的木栓烷型三萜类化合物。方法 采用反复常压硅胶柱色谱技术与重结
晶技术 , 对海南假韶叶子中石油醚提取浸膏进行分离纯化 , 得到 4种化合物。并采用现代波谱法结合理化分析对提纯的
单体化合物进行结构鉴定。结果 分离得到的单体化合物分别为:①粉蕊黄杨酮醇 , ②海棠果醇 , ③海棠果醛和④表木栓
醇。结论 该脂溶性提取浸膏主要为木栓烷型三萜化合物。
关键词:海南假韶子;　化学成分;　木栓烷 , 　三萜化合物
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2010)02-0322-01
LiposolubleFriedelaneTriterpenesfromtheLeavesofParanepheliumhainanensis
WANGTian-shan1 , CHENGuang-ying1＊ , ZHONGQiong-xin2 , JIMing-hui1 , LITian-lue1
(1.HainanProvincialKeyLabofTropicalMedicinalHerbChemistry, SchoolofChemistryandChemicalEngi-
neering, Haikou571158China;2.SchoolofLifeScience, HainanNormalUniversity, Haikou571158, China)
Abstract:ObjectiveToresearchthefriedelanetriterpenesfromthepetroleumetherextractoftheleavesofParanepheliumhain-
anensis.MethodsFourtriterpeneswereobtainedbysilicachromatographyandrecrystalizationfromthepetroleumetherextractof
theleavesofParanepheliumhainanensis, andthechemicalstructuresofthesetriterpeneswereidentifiedbymodernspectroscope
aswelasphysico-chemicalanalysis.ResultsThesecompoundswereidentifiedtobepachysonol(1), canophyllol(2), canophyl-
lal(3)and3β -friedelinol(4), respectively.ConclusionThechemicalconstituentsofthepetroleumetherextractarefriedelane
associatedtriterpenes.
Keywords:Paranepheliumhainanensis;　Chemicalconstituents;　Friedelane;　Triterpenes
　　海南岛是南药的生产基地 , 素有 “天然药库”的美称。海南
假韶子 PouranepheliunhainanensisH.S.Lo属于无患子科假韶子
属植物 [ 1] , 是海南岛特有的珍贵树种。 课题组致力于寻找海南
本土热带植物中具有药用价值的化合物和活性先导物 [ 2, 3] 。本
研究主要报道利用反复常压硅胶柱色谱技术和重结晶技术从海
南假韶子叶子石油醚提取浸膏中分离获得 4个木栓烷型三萜化
合物。利用现代波谱方法(红外光谱和核磁共振谱)结合理化性
质进行结构鉴定 , 分别为①粉蕊黄杨酮醇 , ②海棠果醇 , ③海棠果
醛和④表木栓醇。
1　药材与仪器
1.1　药材 海南假韶子 ,采自海南三亚 ,由海南师范大学生命科
学院钟琼芯副教授鉴定为海南假韶子 P.hainanensis, 其标本保
藏于海南省热带药用植物化学重点实验室。
1.2　仪器 核磁共振仪 , BrukerAV-400型;旋转蒸发仪:东京理
化 N1001型;红外光谱仪 , NicoletNexus670 FT-IR型;薄层色谱
板与柱色谱硅胶 , 青岛海洋化工厂。
2　方法与结果
将海南假韶子材料自然晾干后 , 取叶子 1.5 kg粉碎后得
到粉末 , 用 3 ×10 L乙醇(85%)加热回流 3 h, 浓缩得乙醇粗
浸膏 545 g;再将乙醇粗浸膏分散于 800 ml水中 , 用石油醚萃
取得到石油醚提取浸膏 130 g。采用反复柱色谱技术和重结
晶技术从石油醚提取浸膏分离得到化合物① ～ ④。 其化学结
构见图 1。
图 1　化合物①～ ④的化学结构
2.1　化合物① 11 mg, 无色针状晶体(石油醚 /醋酸乙酯)。 TLC
遇浓 H2SO4显黄绿色 , Liegermann-Burchard反应呈阳性 , 推测为
甾体或三萜类化合物。IR(KBr):3 405(OH), 2 967, 2 869, 1 715
(CO), 1 458, 1 389, 1 073 cm-1;1H-NMR(400 MHz, CDCl3)δH(ppm):0.73(3H, s, H-24)0.87(3H, s, H-25)0.88(3H, d, J=
6.4Hz, H-23)0.96(3H, s, H-30)1.00(3H, s, H-29)1.01(3H,
s, H-26)1.05(3H, s, H-27), 1.18(3H, s, H-28), 1.75(1H, m,
H-1β), 1.96(1H, m, H-1α), 2.24(1H, m, H-2β), 2.30(1H,
m, H-2α), 2.39(1H, q, H-4)4.31(1H, t, J=6.8Hz, H-16)。
与文献 IR和 1H-NMR数据对照基本一致 , 故鉴定为粉蕊黄杨酮
醇 [ 4] 。
2.2　化合物② 13 mg, 无色针状晶体(石油醚 /醋酸乙酯)。 TLC
遇浓 H2SO4显黄绿色 , Liegermann-Burchard反应显阳性 , 推测为
甾体或三萜类化合物。IR(KBr):3 545(OH), 2 931, 2 866, 1 706
(CO), 1 465, 1 388 , 1 053, 791, 747cm-1;1H-NMR(400 MHz,
CDCl3)δH(ppm):0.72(3H, s, H-24)0.87(3H, s, H-25)0.88(3H, d, J=7.2Hz, H-23)0.91(3H, s, H-27)0.98(3H, s, H-
·322·
时珍国医国药 2010年第 21卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.2
26)0.99(3H, s, H-29)1.13(3H, s, H-30), 2.24(1H, m, H-
2β), 2.30(1H, m, H-2α), 2.39(1H, q, H-4), 3.63(3H, s, H-
28)。与文献 IR和 1H-NMR数据对照一致 , 故鉴定为海棠果
醇 [ 5] 。
2.3　化合物③ 5 mg, 无色针状晶体(石油醚 /醋酸乙酯)。 TLC
遇浓 H2SO4显黄绿色 , Liegermann-Burchard反应显阳性 ,推测为
甾体或三萜类化合物。 IR(KBr):2 927, 2 869, 1 715(CO),
1 459, 1 389cm-1;1H-NMR(400 MHz, CDCl3)δH(ppm):0.67(3H, s), 0.72(3H, s), 0.86 (3H, s), 0.87 (3H, d, J=6.7Hz, H-
23), 0.95(H, s), 0.99(3H, s), 1.07(3H, s), 9.48(H, s, H-28)。
与文献 IR和 1H-NMR数据对照一致 ,故鉴定为海棠果醛 [ 6] 。
2.4　化合物④ 8 mg, 无色针状晶体(石油醚 /醋酸乙酯)。 TLC
遇浓 H2SO4显黄绿色 , Liegermann-Burchard反应显阳性 ,推测为
甾体或三萜类化合物。 IR(KBr):3 444(OH), 2 927, 1 459,
1 389, 1 074, 799 cm-1;1H-NMR(400 MHz, CDCl3)δH(ppm):
0.86(3H, s, H-25), 0.93(3H, d, J=6.4Hz, H-23), 0.95(3H, s,
H-29), 0.96 (3H, s, H-26), 0.99 (3H, s, H-27), 0.99(3H, s,
H-30), 1.00 (3H, s, H-24), 1.17(3H, s, H-28), 3.73(1H, q,
H-3)。与文献 IR和 1H-NMR数据对照一致 , 故鉴定为表木栓
醇 [ 7] 。
3　讨论
本实验首次研究了海南假韶子叶子的石油醚提取浸膏中的
化学成分 , 从该提取浸膏中分离得到 4种化合物 ,经波谱鉴定 ,分
别为①粉蕊黄杨酮醇 , ②海棠果醇 , ③海棠果醛和④表木栓醇。
这 4种化合物均属于木栓烷型三萜化合物。这些三萜化合物具
有广泛的药用价值 ,具有抗肿瘤 、抗炎等活性 [ 4 , 8 , 9] 。
参考文献:
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收稿日期:2009-05-24;　修订日期:2009-06-30　
基金项目:国家科技基础性工作专项重点项目子课题(No.SB2007FY0200);云南中医学院科学研究基金项目(No.200811)
作者简介:刘小莉(1977-),女(汉族),山东烟台人 ,现任云南中医学院中药学院讲师 ,在读博士研究生,硕士学位 ,主要从事中药资源保护研究工作.
＊通讯作者简介:钱子刚(1962-),男(汉族),浙江镇海人 ,现任云南中医学院中药学院教授 ,博士学位,主要从事中药资源开发与利用方面的研究工作.
药用植物胡黄连 ISSR-PCR反应体系的建立与优化
刘小莉 1, 2 , 普春霞 1 , 杨耀文 1 , 钱子刚1＊
(1.云南中医学院 ·中药学院 ,云南 昆明　650500;　2.云南大学生命科学学院 ,云南 昆明　650091)
摘要:目的 优选胡黄连稳定的 ISSR-RCR反应体系。方法 采用 4因素(dNTRs、Mg2+、Taq酶 、引物)4水平的正交实验
和单因子梯度优化相结合的方法。结果 适于胡黄连的 25μlISSR-PCR反应体系中各因素最佳浓度分别为 10×bufer
2.5μl, dNTPs150μmol/L, Mg2+1.5mmol/L, Taq酶 1U, 引物 0.5 μmol/L, DNA20ng或 10×bufer2.5μl, dNTPs150μmol/
L, Mg2+2 mmol/L, Taq酶 0.5 U,引物 0.4 μmol/L, DNA20 ng。结论 对于胡黄连 ISSR-RCR试验 , 一次正交实验完全可
以建立起满足要求的 PCR体系。
关键词:胡黄连;　正交实验;　单因子;　ISSR-PCR
中图分类号:S567;R2-03　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2010)02-0323-03
EstablishmentandOptimizationofISSRPCRReactionSystemforMedicinalPlantNeopi-
crorhizascrophulariflora
LIUXiao-li1, 2 , PUChun-xia1 , YANGYao-wen1 , QIANZi-gang1＊
(1.DepartmentofChineseMateriaMedica, YunnanColegeofTraditionalChineseMedicine, Kunming,
650500, China;2.ColegeofLifeScience, YunnanUniversity, Kunming, 650091China)
Abstract:ObjectiveTooptimizethestableISSRreactionsystemforNeopicrorhizascrophulariflora.MethodsConcentrationof
dNTPs, Mg2+, TaqDNApolymeraseandprimerswerestudiedbyorthogonalexperimentcombinedwithsinglefactorexperiment.
ResultsTheoptimalISSR-PCRreactionsystem(25μl)wasasfolows:10×bufer2.5 μl, dNTPs150 μmol/L, Mg2+1.5mmol/
L, TaqDNApolymerase1U, primers0.5 μmol/L, DNA 20 ngor10×buffer2.5 μl, dNTPs150 μmol/L, Mg2+ 2mmol/L, Taq
DNApolymerase0.5U, primers0.4μmol/L, DNA20 ng.ConclusionForNeopicrorhizascrophulariiflora, oneorthogonalexperi-
mentcanestablishsatisfactoryPCRsystem.
Keywords:Neopicrorhizascrophulariflora;　Orthogonalexperiment;　Singlefactorexperiment;　ISSR-PCR
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.2 时珍国医国药 2010年第 21卷第 2期