免费文献传递   相关文献

超声提取南蛇藤根中扁蒴藤素的工艺研究



全 文 :收稿日期:2014-05-22
作者简介:李泽华(1977-),女,主管药师,主要从事医院药学研究;Tel:13660055332,E-mail:lizehuasy@ 126. com。
* 通讯作者:王定勇,Tel:020-39352213,E-mail:wdingyong@ 163. com。
超声提取南蛇藤根中扁蒴藤素的工艺研究
李泽华1,刘林生2,徐祖疆3,王定勇3*
(1. 广东省人民医院(广东省医学科学院)药学部,广东 广州 510080;2. 广东省佛山市中医院药学部,广东
佛山 528000;3. 广东药学院药科学院,广东 广州 510006)
摘要 目的:优选超声提取南蛇藤根中扁蒴藤素的工艺。方法:通过单因素试验考察提取时间、超声功率、料
液比、提取温度对扁蒴藤素提取率的影响。结果:超声提取法的最佳工艺条件为:提取时间 50 min,超声功率 70 W,
液料比 20∶ 1,提取温度 30 ℃。在此条件下扁蒴藤素的提取率为 3. 82%。结论:优选得到的最佳提取工艺简便、高
效和节能,具有一定的应用价值。
关键词 超声提取;南蛇藤根;扁蒴藤素
中图分类号:R286. 2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2015)05-1076-02
DOI:10. 13863 / j. issn1001-4454. 2015. 05. 049
南蛇藤 Celastrus orbiculatus Thumb. 系卫矛科南
蛇藤属植物,又名过山风、降龙草等。茎、根和叶均
可入药,具有祛风湿、活血脉、消肿等功效,常用于治
疗风湿性关节炎、腰腿疼痛等〔1〕。扁蒴藤素是一种
醌甲基三萜类化合物,具有广谱抗炎、抗氧化、抗肿
瘤等多种药理活性〔2-5〕。研究发现,南蛇藤根中扁蒴
藤素的含量较高〔6〕,并对从南蛇藤根中获取高纯度
扁蒴藤素的工艺进行了报道〔7〕。本文以南蛇藤根
为材料,采用超声提取法研究扁蒴藤素的提取工艺。
现报道如下。
1 仪器与材料
实验用南蛇藤根采自广东省阳春市,由广东药
学院李书渊教授鉴定为卫矛科南蛇藤属植物南蛇藤
Celastrus orbiculatus Thumb. 的根,药材留样保存于
广东药学院药科学院天然药物化学教研室。扁蒴藤
素对照品购自广州来普达克生物技术有限公司(质
量分数为 98. 5%,批号:20120925)。水为超纯水,
色谱用甲醇为色谱纯,无水乙醇等其他试剂均为分
析纯。美国 Waters 超高效液相色谱(UPLC)Accu-
ricy系统(PDA检测器);AY120 电子分析天平(Shi-
madzu 公司);Millipore 0. 45 μm 滤膜;KQ-300VDE
型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
2 方法
2. 1 超声提取 取一定量干燥的南蛇藤根,粉碎
至 60 目,准确称取 2 g粉末于 250 mL 圆底烧瓶中,
加入一定浓度的乙醇提取液,按照一定的超声提取
时间、功率和温度进行提取,提取完毕后,过滤,将滤
液浓缩,定容至 100 mL,备用。
2. 2 扁蒴藤素含量的测定方法
2. 2. 1 色谱条件:色谱柱为 Waters Acquity UPLC
BEH C18(100 mm × 2. 1 mm,1. 7 μm);流动相为甲
醇-0. 1%磷酸水(88 ∶ 12);流速 0. 25 mL /min;检测
波长 424 nm;柱温 30 ℃;进样量 2 μL;经 0. 2 μm滤
膜过滤并超声脱气。
2. 2. 2 标准曲线的绘制:精密称取扁蒴藤素的对
照品 5 mg,加无水乙醇分别制成浓度为 2、10、20、
40、60、80、100 μg /mL的溶液,即得。以峰面积 Y为
纵坐标,进样量 X 横坐标,进行线性回归,得扁蒴藤
素的回归方程为 Y = 2395. 3X - 1905. 2,r = 0. 9999。
表明扁蒴藤素在 2 ~ 100 μg /mL 浓度范围内与峰面
积呈良好的线性关系。
2. 2. 3 样品中扁蒴藤素含量的测定:南蛇藤根供
试液经 0. 2 μm 微孔滤膜滤过,进样检测。测得峰
面积代入回归方程中计算,得出南蛇藤中扁蒴藤素
的含量。
3 结果
3. 1 提取时间对扁蒴藤素提取率的影响 称取南
蛇藤根粉末 2 g,置于圆底烧瓶中超声提取,设定提
取时间分别为 20、30、40、50、60 min,其余条件为超
声功率 100 W,液料比为 20∶ 1,提取温度 30℃,无水
乙醇作溶剂。实验结果见图 1,表明当提取时间为
50 min时,提取效果最好。
3. 2 超声功率对扁蒴藤素提取率的影响 称取南
蛇藤根粉末 2 g,置于圆底烧瓶中超声提取,设定超
声功率分别为 50、60、70、80、90、100 W,其余条件为
提取时间为 30 min,液料比为 20∶ 1,提取温度 30℃,
无水乙醇作溶剂。实验结果见图 2,表明当提取功
率为 70 W时,提取效果最好。
·6701· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 5 期 2015 年 5 月
3. 3 液料比对扁蒴藤素提取率的影响 称取南蛇
藤根粉末 2 g,置于圆底烧瓶中超声提取,设定液料
比分别为 5∶ 1、10∶ 1、20∶ 1、30∶ 1、40∶ 1,其余条件为
提取时间为 30 min,超声功率 100 W,提取温度为 30
℃,无水乙醇作溶剂。实验结果见图 3,表明当液料
比为 20∶ 1 时,提取效果最好。
3. 4 提取温度对扁蒴藤素提取率的影响 称取南
蛇藤根粉末 2 g,置于圆底烧瓶中超声提取,设定提
取温度分别为 20、30、40、50、60 ℃,其余条件为提取
时间为 30 min,超声功率 100 W,液料比为 20∶ 1,无
水乙醇作溶剂。实验结果见图 4,表明当提取温度
为时 30 ℃,提取效果最好。
图 1 提取时间对南蛇藤根中扁蒴藤素提取率的影响
图 2 超声功率对南蛇藤根中扁蒴藤素提取率的影响
图 3 料液比对南蛇藤根中扁蒴藤素提取率的影响
图 4 提取温度对南蛇藤根中扁蒴藤素提取率的影响
4 讨论
本文采用超声提取南蛇藤根中的扁蒴藤素,以
单因素试验考察了各因素对扁蒴藤素提取率的影
响,确定了最佳提取工艺条件为:以无水乙醇为提取
溶剂,提取时间为 50 min,超声功率为 70 W,液料比
为 20∶ 1,提取温度为 30 ℃,提取率为 3. 82%。与传
统煎煮法提取相比大大缩短了提取时间,提高了提
取效率,为超声提取应用于大生产提供了参考,有一
定应用前景。
参 考 文 献
[1]江苏新医学院 . 中药大辞典[M].下册 . 上海:上海科
学技术出版社,2000:1563-1564.
[2] Chang FR,Hayashi K,Chen IH,et al. Antitumor agents
228. Five new agarofurans,reissantins A-E,and cytotoxic
principles from Reissantia buchananii[J]. J Nat Prod,
2003,66(11):1416-1420.
[3]惠斌,吴勇杰,王鸿,等 . 扁蒴藤素对急性实验性炎症的
作用及其机制研究[J]. 中国药理学通报,2003,19
(16):656-659.
[4] Wu CC,Chan ML,Chen WY,et al. Pristimerin induces
caspase-dependent apoptosis in MDA-MB-231 cells via di-
rect effects on mitochondria[J]. Mol Cancer Ther,2005,4
(8) :1277-1285.
[5]陈长瑞,李文广,吴勇杰,等 . 扁蒴藤素的抗氧化与抗肿
瘤作用[J].中药药理与临床,2002,18(5):20-21.
[6]刘慧玲,冯玉静,陈定双,等 . 南蛇藤根皮的化学成分研
究[J].中成药,2010,32(7):1169-1172.
[7]冯玉静,王定勇,陈铭祥 . 南蛇藤中扁蒴藤素提取分离
工艺研究[J].广东药学院,2009,25(2):137-140.
·7701·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 38 卷第 5 期 2015 年 5 月