全 文 ：收稿日期:2007-05-08;　修订日期:2007-09-10
作者简介:向轶波(1983-),男(汉族),重庆人 ,现为西南林学院资源学院
在读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事药用植物化学成分研究工作.
交让木果实的化学成分研究
向轶波 1, 2 , 何红平2 , 孔宁川 2 , 郝小江2 , 刘祥义 1
(1.西南林学院资源学院 ,云南 昆明　650224;
2.中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物可持续利用国家重点实验室 ,云南 昆明　650204)
摘要:目的 研究交让木果实的化学成分。方法 采用硅胶 , RP-18, SephadexLH-20柱层析对交让木果实的乙醇提取物进
行分离纯化 , 根据化学方法和波谱数据(ESIMS, 1D-NMR, 2D-NMR)对分离所得化合物进行结构鉴定。结果 共分得了 5
个化合物分别为 PaxdaphnineB(Ⅰ ), PaxdaphnineA(Ⅱ), Daphgracine(Ⅲ ), Daphgraciline(Ⅳ), Yuzurine(Ⅴ )。结论
化合物Ⅰ -Ⅴ均为虎皮楠生物碱 ,并且化合物Ⅰ , Ⅱ为首次从该种植物中分得。
关键词:交让木果实;　化学成分;　虎皮楠生物碱
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)02-0451-02
StudiesontheChemicalConstituentsofDaphniphyllumMacropodum
XIANGYi-bo1, 2 , HEHong-ping2 , KONGNing-chuan2 , HAOXiao-jiang2 , LIUXiang-yi1
(1.ColegeofResource, SouthwestForestryColege, YunnanKunming650224, China;2.StateKeyLaboratory
ofPhytochemistryandPlantResourcesinWestChina, YunnanKunmingInstituteofBotany, ChineseAcademy
ofScience, Kunming650204, China)
Abstract:ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofthefruitofDaphniphyllummacropodumMiq.MethodsThecrudeex-
tractwasextractedwith90% EtOH, isolatedandpurifiedonrepeatedlychromatographoversilicagel, RP-18, SephadexLH-
20 column.Theirchemicalstructureswereelucidatedbychemicalmethodsandspectraldata(ESIMS, 1D-NMR, 2D-NMR).
ResultsFivecompoundsareisolatedfromthefruitofDaphniphyllummacropodumMiq., andwereindentifiedasPaxdaphnineB
(Ⅰ ), PaxdaphnineA(Ⅱ), Daphgracine(Ⅲ ), Daphgraciline(Ⅳ), Yuzurine(Ⅴ )respectively.ConclusionThefivecom-
poundswereDaphniphyllumalkaloids, andcompoundⅠ andⅡarefoundfromDaphniphylummacropodumMiq.forthefirsttime.
Keywords:ThefruitofDaphniphylummacropodumMiq;　Chemicalconstituents;　Daphniphyllumalkaloids
　　交让木 Daphniphyllummacropodum Miq为虎皮楠科(Daph-
niphyllaceae)虎皮楠属(Daphniphyllum)植物 , 又名画眉珠 , 虎皮
楠 , 山黄树(湖北),豆腐头(广东), 枸色子 、枸血子 、水红朴(四
川)。交让木为常绿乔木 , 以果实 、叶和根在民间多作药用。生
于海拔 600 ～ 1900 m的阴湿山坡 、溪谷及阔叶林中 , 分布于长江
流域以南云南 、四川 、贵州 、广西 、广东 、湖南 、湖北 、江西 、浙江 、安
徽及中国台湾等省区。具有治疗疮疖肿毒 , 哮喘 、咳嗽 、风湿 、炎
症 、感冒发热 、肝脾肿大 、骨折 、毒蛇咬伤之功效;叶煎水喷洒 ,可
杀灭蚜虫 [ 1, 2] 。
虎皮楠属植物特别代谢产生一类具有复杂的多环结构的生
物碱 , 被称为虎皮楠生物碱(Daphniphylumalkaloids)。从生物遗
传学和全合成的角度来看 , 虎皮楠生物碱具有很大的研究价
值 [ 3, 4] 。根据最近关于交让木中虎皮楠生物碱的报道 , 5个结构
新颖的虎皮楠生物碱被郭跃伟等从交让木的茎叶中分离得
到 [ 5, 6] 。本文报道了首次从交让木果实中分得 5个虎皮楠生物
碱 , 分别为 PaxdaphnineB (Ⅰ ), PaxdaphnineA(Ⅱ ), Daph-
gracine(Ⅲ), Daphgraciline(Ⅳ), Yuzurine(Ⅴ)。
1　材料与仪器
1.1　药材 样品于 2005-11采于江西庐山 ,由中国科学院昆明植
物研究所龚洵研究员鉴定为 DaphniphylummacropodumMiq.的果
实。
1.2　仪器 BUCHIR-3000型旋转蒸发仪;比旋度用 J-20C旋
光仪器测定;红外光谱采用 KBr压片以 IR-450型红外光谱仪器
测定;核磁共振谱用 DRX500型核磁共振仪测定 , TMS为内标;质
谱 EI-MS用 Finnigan-4510型质谱仪测定。
1.3 　试剂与材料 柱层析用硅胶(100 ～ 200目 , 200 ～ 300目 ,
300 ～ 400目)或硅胶 H(10 ～ 40μm)及薄层层析板均为青岛海洋
化工厂生产。 RP-18, SephadexLH-20为 Pharmacia公司产品。
薄层层析通过碘化铋钾显色剂显色。层析用溶剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　提取与分离 交让木果实(20kg), 粉碎后经 90%的乙醇回
流提取 3次 , 过滤 ,回收乙醇 , 将浓缩的提取物悬浮于 4 L水中 ,
用饱和酒石酸调 pH值至 3,用石油醚脱脂 3次 , 再用氯仿萃取一
次得非碱部分。将水层用氨水(NH3H2O)调 pH值至 9, 用氯仿
萃取 5次 , 回收氯仿得总碱(47 g)。该部分经多次硅胶柱层析 ,
SephadexLH-20凝胶层析 , RP-18反相柱层析后 ,分离得到化合物
Ⅰ (22 mg), Ⅱ(6mg), Ⅲ(7mg), Ⅳ(8mg), Ⅴ (15 mg)。
2.2　结构鉴定
2.2.1　化合物Ⅰ 无色针晶(丙酮)。 [ α] 23.6D + 33.33 (c0.00,
CH3OH);postiveESIMS:m/z:346 [ M + H] +;IR(KBr)νmax
cm-1:3385 (moderate), 2933, 2873, 1730, 1444, 1367, 1189,
1162, 1041, 864;HRESIm/z346.2378 [ M+H] +, calcd.forC21H32NO3 346.2382;由分子式可推测化合物 Ⅰ 占有 7个不饱和
度;1HNMR, 13CNMR和 HMBC(CDCl3)数据见表 1。化合物 Ⅰ
与文献报道 PaxdaphnineB[ 7]波谱数据一致 , 故鉴定化合物 Ⅰ 为
PaxdaphnineB,结构式为:
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008 VOL.19 NO.2 时珍国医国药 2008年第 19卷第 2期
表 1　化合物Ⅰ的 1HNMR(400MHz), 13CNMR(100MHz)和 HMBC(500 MHz)光谱数据(CDCl3)
NO. δC δH HMBC(H※C) NO. δC δH HMBC(H※C)
2 69.6 s 13 35.2 t 1.98 (dd, 15.6, 9.2) 14, 5, 8, 2, 9, 22
2.65 (d, 15.6) 14, 5, 8, 2, 9, 22
3 29.1 t 1.75 (m) 5, 8, 2 14 43.1 d 2.98 (dt, 2.4, 9.2) 15, 9, 22
1.62 (m) 18, 4, 6, 5, 2
4 33.3 t 1.59 (m) 3, 6, 5, 2, 21 15 57.0 d 3.43 (m) 16, 14, 10, 9, 22,
1.50 (m) 3, 6, 5, 8, 2, 21
5 50.9 s 16 29.4 t 1.20 (m) 17, 14, 15
1.88 (m) 17, 14, 15, 9, 10
6 43.1 d 1.74 (m, overlap) 11, 12, 7, 5, 8 17 43.0 t 2.36 (m) 16, 15, 10, 9
2.68 (m) 15, 10, 9
7 44.8 t 3.19 (dd, 15.2, 5.6) 12, 6 18 28.2 t 1.55 (m) 20, 3, 820,
2.88 (d, 15.2) 12, 6, 5, 2 1.03 (m) 3, 2, 8
8 58.6 s - - 20 9.2 q 0.90 (t, 7.2) 18, 2
9 144.6 s - - 21 68.7 t 3.98 (d, 12.4) 4, 6, 5, 84,
3.87 (d, 12.4) 6, 5, 8
10 136.7 s - - 22 177.5 s - -
11 26.2 t 2.38 (m) 12, 10, 9, 17 23 51.5q 3.67 (s) 22
2.13 (br.d, 15.6) 12, 17, 10, 9
12 26.9 t 1.48 (m) 11, 10
2.46 (m) 11, 7
2.2.2　化合物Ⅱ 无色胶状物。 postiveESIMS:m/z:358 [ M +
H] +;从 1HNMR, 13CNMR, DEPT和 ESIMS推测分子式为 C22H31
NO3;由分子式可推测化合物 Ⅱ占有 7个不饱和度。1HNMR(400MHz, CDCl3)d(inppm):3.82 (1H, d, 14.4, H-1a), 3.95 (1H,
d, 14.4, H-1b), 2.56 (1H, m, H-3a), 2.03 (1H, m, H-3b),
1.69 (1H, m, H-4a), 1.75 (1H, m, H-4b), 2.19 (1H, m, H-
6), 3.18 (1H, d, 14.4, H-7a), 3.98(1H, m, H-7b), 2.11
(1H, m, H-11a), 1.92 (1H, m, H-11b), 1.49(1H, m, H-
12a), 2.31(1H, m, H-12b), 1.63(1H, m, H-13a), 2.45(1H,
m, H-13b), 3.26 (1H, m, H-14), 2.75 (1H, dd, 8.8, 17.5, H
-15), 1.55 (1H, m, H-16a), 1.72 (1H, m, H-16b), 1.48
(1H, m, H-17a), 1.77 (1H, m, H-17b), 1.95 (1H, m, H-
18a), 1.62(1H, m, H-18b), 1.38 (3H, t, 6.0, H-20), 4.03
(1H, d, 8.4, H-21a), 4.23(1H, d, 8.4, H-21b), 3.68 (3H, s,
OMe);13CNMR(100 MHz, CDCl3)d(inppm):66.0 (t, C-1),
81.8 (s, C-2), 30.4 (t, C-3), 35.9 (t, C-4), 49.3 (s, C-
5), 39.6 (d, C-6), 55.1 (t, C-7), 61.4(s, C-8), 64.9 (s,
C-9), 85.3 (s, C-10), 31.4 (t, C-11), 28.2 (t, C-12),
28.5 (t, C-13), 46.8 (d, C-14), 55.1(d, C-15), 26.7(t, C
-16), 41.8 (t, C-17), 26.9 (t, C-18), 9.9 (q, C-20),
68.4 (t, C-21), 172.6(s, C-22), 51.7(q, OMe)。化合物Ⅰ
与文献报道 PaxdaphnineA[ 7]波谱数据一致 , 故鉴定化合物Ⅱ为
PaxdaphnineA, 结构式为:
2.2.3　化合物 Ⅲ 无色固体。 postiveESIMS:m/z:402 [ M +
H] +;从 1HNMR, 13CNMR, DEPT和 ESIMS推测分子式为 C24H35NO4;由分子式可推测化合物Ⅱ占有 8个不饱和度。 1HNMR(500MHz, CDCl3)d(inppm):0.85 (3H, d, 6), 0.93 (3H, d, 6), 2.12(3H, sNMe), 3.70(3H, s, OMe);13CNMR(125 MHz, CDCl3)d
(inppm):16.2 (q), 16.8 (q), 21.4 (t), 25.8 (t), 27.7 (t),
27.8(t), 29.6(t), 32.8 (d), 35.9 (s), 38.9 (d), 42.0 (t),
43.0(t), 46.0(q), 46.3(s), 50.8 (q), 55.9 (t), 61.7 (t),
62.8(t), 97.7 (s), 115.8 (s), 149.7 (s), 153.9 (s), 167.0
(s), 169.1 (s)。化合物Ⅲ与文献报道 Daphgracine[ 8]波谱数据一
致 ,故鉴定化合物Ⅲ为 Daphgracine, 结构式为:
2.2.4　化合物Ⅳ 无色固体。 postiveESIMS:m/z:388 [ M +
H] +;从 1HNMR, 13CNMR, DEPT和 ESIMS推测分子式为 C23H33NO4;由分子式可推测化合物 Ⅱ占有 8个不饱和度。 1H NMR(500MHz, CDCl3)d(inppm):0.81 (3H, t, 7.5), 2.02 (3H, s,NMe), 3.58 (3H, s, OMe);13CNMR(125 MHz, CDCl3)d(in
ppm):7.4 (q), 21.5(t), 25.8 (t), 27.4 (t), 27.8 (t), 29.7
(t), 32.8(d), 35.7 (t), 35.9 (s), 42.0 (t), 43.0 (t), 46.0
(q), 46.4(s), 50.8 (q), 55.9 (t), 61.7 (t), 62.8 (t), 96.2
(s), 115.7 (s), 149.7(s), 153.9 (s), 167.0(s), 169.1(s)。
化合物Ⅳ与文献报道 Daphgraciline[ 8]波谱数据一致 ,故鉴定化合
物Ⅳ为 Daphgraciline,结构式为:
2.2.5　化合物 Ⅴ 无色固体。 postiveESIMS:m/z:404[ M +
H] +;从 1HNMR, 13CNMR, DEPT和 ESIMS推测分子式为 C
24
H
37NO
4
;由分子式可推测化合物 Ⅱ占有 7个不饱和度。 1H NMR
(400MHz, CDCl3)d(inppm):0.85 (3H, t, 7.2), 2.14 (3H, s,
NMe), 3.16 (3H, s, OMe), 3.64 (3H, s, OMe);13CNMR(100
MHz, CDCl3)d(inppm):7.7 (q), 22.3 (t), 27.2 (t), 27.4
(t), 27.6(t), 27.9 (t), 28.7 (t), 32.8(d), 36.3(d), 39.7
(t), 42.4 (t);42.5 (d), 46.5(s), 46.7(q), 47.1 (q), 51.0
(q), 54.7(d), 56.2 (t), 61.7 (t), 62.8 (t), 98.9 (s), 133.
1(s), 146.0 (s), 175.3 (s)。化合物Ⅴ与文献报道 Yuzurine[ 9]
波谱数据一致 , 并与 Yuzurine的薄层具有相同的 Rf值 , 故鉴定化
合物Ⅴ为 Yuzurine,结构式为:
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2008 VOL.19 NO.2　
3　讨论
交让木果实乙醇提取物氯仿萃取总碱部分经硅胶柱层析 ,
RP-18反相柱层析 , SephadexLH-20层析 , 分离得到 5个单体
化合物 , 通过理化性质 ,波谱解析 , 文献检索等方法确定了化合物
Ⅰ ～Ⅴ均为虎皮楠生物碱 , 分别为:PaxdaphnineB(Ⅰ ), Pax-
daphnineA(Ⅱ), Daphgracine(Ⅲ), Daphgraciline(Ⅳ), Yuzurine
(Ⅴ)。其中化合物Ⅰ和化合物Ⅱ为首次从该种植物中分得。本
研究为进一步开发利用虎皮楠属植物提供了理论依据。
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收稿日期:2007-02-05;　修订日期:2007-07-19
作者简介:钟镜金(1948-),男(汉族),广东四会人 ,现任广州中医药大学
中药学院副教授 ,主要从事中药分析研究工作.
高效液相色谱法测定骨康口服液
中补骨脂素和异补骨脂素的含量
钟镜金 , 黄晓其 ,龙彦纲 , 曾惠芳 , 苏子仁
(广州中医药大学 ,广东 广州　510405)
摘要:目的 建立骨康口服液中有效成分的含量测定方法。方法 采用 HPLC法测定骨康口服液中有效成分含量。结果
补骨脂素和异补骨脂素两种成分均达到良好分离 ,在测定范围内线性良好 , 回收率均在 99% ～ 101%之间。结论 所建立
的定量方法简便可行 、重复性好 , 可作为骨康口服液的质量监控。
关键词:骨康口服液;　补骨脂素;　异补骨脂素;　高效液相色谱法
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)02-0453-02
DeterminationofPsoralenandIsopsoraleninGukangOralLiquidbyHPLC
ZHONGJing-jin, HUANGXiao-qi, LONGYan-gang, ZENGHui-fang, SUZi-ren
(GuangzhouUniversityofChineseMedicineandMateriaMedica, Guangzhou510405, China)
Abstract:ObjectiveToestablishamethodofHPLCfordeterminingpsoralenandisopsoraleninGukangOralLiquid.Methods
TheeffectivecomponentsinGukangOralLiquidweredeterminedbyHPLC.ResultsTheresolutionandthelinearitywerefine
withtherateofrecoveryofpsoralen99.96%, RSD=1.16%;therecoveryrateofisopsoralenwas100.09%, RSD=0.60%.Con-
clusionThequantitativemethodfordeterminingtheingredientsofGukangOralLiquidissimple, feasibleandrepeatable, and
canbeusedforqualitycontrolofGukangOralLiquid.
Keywords:GukangOralLiquid;　Psoralen;　Isopsoralen;　HPLC
　　骨康口服液由补骨脂 、淫羊藿 、肉苁蓉 、白芍 、黄芪等 10味药
材组成 , 具有补肾壮骨 ,活血通络 , 健脾益气的功效 , 临床上主要
用于治疗妇女更年期引起的骨质疏松症。骨康口服液复方共煎 ,
有利于补骨脂素与异补骨脂素的煎出 [ 1, 2] , 故采用水提醇沉工艺
制备 [ 3] 。鉴于补骨脂素 、异补骨脂素可相互转化 [ 4 , 2] , 原标准采
用 TLCS法测定补骨脂素 、异补骨脂素两者的总量 [ 5] 。但 TLCS
法变异大 , 故选用 HPLC法同时测定骨康口服液中补骨脂素与异
补骨脂素的含量。现将研究结果报道如下:
1　仪器与试药
DIONEXSUMMIT高效液相色谱仪 (PDA-100 检测器 、
STH585柱温箱 、P680 HPLC泵 、ASI-100自动进样器), Chrome-
leon色谱工作站;补骨脂素(供含量测定用 , 110739-200309)、异
补骨脂素(供含量测定用 , 110738-200410), 均由中国药品生物
制品检定所提供;骨康口服液 (批号:20061009, 20061012,
20061015),由广州中医药大学新药开发研究中心提供;乙腈为色
谱纯(Merck, 1192230)其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 色谱柱:PhenomenexlunaC
18
柱(250 mm×4.60
mm, 5 μm);流动相:以乙腈为流动相 A, 以 0.1%冰醋酸为流动
相 B, 按表 1中的规定进行梯度洗脱;检测波长:246 nm;流速:
1.0 ml· min-1;柱温:25℃;进样量:10 μl;理论塔板数均不低于
3 000。
2.2　溶液的制备
2.2.1　对照品溶液的制备 精密称取补骨脂素 、异补骨脂素对
照品适量 , 分别置 25 ml量瓶中 , 加甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇
匀 , 以此作为对照品贮备液。精密吸取上述各对照品贮备液适
量 , 加甲醇制成每毫升含补骨脂素 35 μg, 异补骨脂素 44μg的混
合溶液 ,摇匀即得。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008 VOL.19 NO.2 时珍国医国药 2008年第 19卷第 2期