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龙脷叶的质量分析·化学成分及药理作用研究进展



全 文 :龙脷叶的质量分析·化学成分及药理作用研究进展
梁柏照,李中尧,何英姿* (广西师范学院化学与材料科学学院,广西南宁 530001)
摘要 从龙脷叶的质量分析、化学成分、药理作用三个方面着手,对记载龙脷叶的相关书籍、近年来的文献报道进行系统地归纳、分析和
总结,以期对珍贵的龙脷叶资源进行合理的开发及利用提供进一步参考,为相关新型产品的开发提供依据。
关键词 龙脷叶;质量分析;化学成分;药理作用
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2016)21 -110 -03
Quality Analysis,Chemical Constituents and Pharmacological Effects of Sauropus spatulifolius Beille
LIANG Bo-zhao,LI Zhong-yao,HE Ying-zi* (College of Chemistry and Materials,Guangxi Teachers College,Nanning,Guangxi
530001)
Abstract Starting from the quality analysis,chemical components,pharmacologic effects of Sauropus spatulifolius Beille,related books re-
cording S. spatulifolius and literatures in recent years were summarized,analyzed and summarized,aiming at providing references for reasona-
ble development and use of S. spatulifolius,and offering basis for the development of new related products.
Key words Sauropus spatulifolius Beille;Quality analysis;Chemical compositions;Pharmacological effects
作者简介 梁柏照(1990 - ) ,男,广东江门人,硕士研究生,研究方向:
有机化学。* 通讯作者,教授,博士,从事生物有机化学
研究。
收稿日期 2016-05-31
龙脷叶系大戟科守宫木属植物[1],又名龙舌叶、龙味
叶[2]、龙利叶[3]、牛耳叶[4],主要分布在广东、广西等地。据
相关记载,龙脷叶性平、味甘,具有清热润肺[5]、止咳化痰[6]、
通便[4]等功效,主治肺炎[7]、哮喘及支气管炎[2]等上呼吸道
炎症。龙脷叶为广东和广西常见的药用植物之一,民间用于
清热润肺、化痰止咳,临床研究表明,龙脷叶还有减肥、抗氧
化、抗老化、降血压等作用。近年来,对龙脷叶化学成分的相
关报道较少,因此,该文对龙脷叶的质量分析、化学成分和药
理作用的相关文献报道进行整理,旨在为其药用成分分析提
供进一步的参考,为多种新型产品的开发提供依据。
1 质量分析研究
1. 1 生药学研究 龙脷叶其叶与根各自的主要显微特征
为:叶横切面显示叶表面气孔呈平轴式于下表皮,叶肉栅栏
呈柱状排列,散在较多的草酸钙簇晶,海绵组织疏松,主脉表
皮细胞内有 2至 3 列厚角组织,主脉维管束外韧型,木质部
呈放射状成行排列,韧皮部的薄壁细胞有草酸钙簇晶,偶有
非腺毛;根横切面显示木栓层有 5 ~10列细胞,形成层有 1 ~
2列细胞,皮层和木质层较宽,皮层中有淀粉粒,有簇晶,而韧
皮部较狭窄,射线明显。叶粉末以螺纹导管为主,有呈乳头
状的非腺毛,根粉末以网纹、孔纹及梯纹导管多见,淀粉粒
多。两者均有纤维,胞壁厚,腔窄,含簇晶多,伴有草酸钙簇
晶薄壁细胞[8 -9]。这些显微特征对龙脷叶的鉴别有一定的
实际意义。
1. 2 指纹图谱研究 目前,指纹图谱是中药质量控制的重
要手段之一,龙脷叶的指纹图谱已经有了初步探索。张
玲[10]采用高效液相色谱法研究龙脷叶的叶,以乙酸乙酯为
溶剂利用超声波进行提取,并对其提取物进行分析,建立了
龙脷叶的叶乙酸乙酯提取物指纹图谱分析方法。采用高效
液相色谱法,选取 phenomenex - C18 色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm,5 μm) ,柱温为25 ℃,乙腈 -0. 5%冰醋酸为流动相,
流速为 1 mL /min,进样量为 20 μL,在波长 275 nm下进行检
查,分析时间为 75 min。通过对 10批龙脷叶HPLC色谱图的
统计分析,采用相对保留时间标定了 15 个共有峰。王莹[11]
采用高效液相色谱法研究龙脷叶的根,以 95%乙醇为溶剂利
用超声波进行提取,并对其提取物进行分析,建立了龙脷叶
的根 95%乙醇提取物指纹图谱分析方法。采用高效液相色
谱法,选取伊利特 Hypersil ODS2(5 μm,4. 6 mm × 150 mm) ,
柱温为 25 ℃,水—乙腈为流动相,流速为 0. 8 ~1 mL /min,进
样量为 15 μL,在波长 270 nm 下进行检查,分析时间为
110 min。通过对 10批龙脷叶 HPLC 色谱图的统计分析,采
用相对保留时间标定了 13 个共有峰。以上两种方法由于未
能对指纹图谱特征共有色谱峰进行归属,各色谱峰对应功
效、药理不清,未能做到谱效关系对应。何鹏等[12]采用高效
液相色谱法测定龙脷叶中山柰酚 -3 - O - 龙胆二糖苷的含
量,结果显示山柰酚 - 3 - O - 龙胆二糖苷在 0. 110 8 ~
1. 108 0 μg 与峰面积线性关系良好(r = 1. 000) ,平均加样回
收率为 103. 3%,RSD 为 1. 2%(n = 6) ,该方法操作较为简
易,可信度高,可用于龙脷叶的质量控制。
2 化学成分研究
2. 1 化学成分的初步研究 在对龙脷叶进行研究的初期,
因为该植物内所含化合物未知,所以对其进行化学成分的预
试验,分析其可能含有的化学成分,从而为龙脷叶的进一步
研究提供科学依据。有学者分别对龙脷叶的叶部位与根部
位的水提液、乙醇提取液、石油醚提取液的化学反应进行鉴
别,结果显示:龙脷叶其叶部位含有氨基酸、多肽、蛋白质、
糖、多糖、苷类、皂苷、鞣质、有机酸、生物碱、香豆素、内酯、挥
发油及油脂的可能性较大,龙脷叶其根部位可能含有氨基
酸、多肽、蛋白质、糖、多糖、苷类、皂苷、有机酸、黄酮类、生物
碱、香豆素与内酯等化学成分[13 -14]。虽然对龙脷叶进行了
化学成分的初步探究,但其中所含的具体化合物仍需要进行
分离鉴定。
2. 2 化学成分的系统分离 目前,龙脷叶确切的有效成分
责任编辑 卢瑶 责任校对 况玲玲安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2016,44(21):110 - 112
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.21.037
尚不明确,还需进行进一步研究。近年来,国内报道了一些
利用常用分离手段对龙脷叶化学成分分析研究的报道。如
张玲[10]对龙脷叶 95%乙醇浸膏的叶石油醚部位采用硅胶吸
附色谱法和反复重结晶等分离手段进行了分离纯化,分离得
到了 5个单体化合物,并经过结构鉴定分别为:β -谷甾醇、
正十八醇、豆甾醇、β -谷甾醇酸酸酯、cyclohomonervilol;刘丽
红[15]对龙脷叶干燥全草 75%乙醇浸膏的乙酸乙酯相中提取
分离并鉴定了 6个单体化合物,分别为:butyl 3,6 - andydro -
2 - deoxy - β - D - arabino - hexofuranose、methyl 3,6 -
andydro -2 - deoxy - β - L - arabino - hexofuranose、butyl 3,6
- andydro -2 - deoxy - α - D - arabino - hexofuranose、3,6 -
andydro - 2 - deoxy - α - D - arabino - hexofuranose、3,6 -
andydro -2 - deoxy - β - D - arabino - hexofuranose、邻苯二甲
酸二丁酯;沈小静[16]从龙脷叶 90%乙醇浸膏的氯仿相中分
离并鉴定了两个化合物,分别是 β -谷甾醇、谷甾醇 - 3 - O
-葡萄糖苷,从乙酸乙酯相中分离并鉴定邻苯二甲酸二丁
酯,从正丁醇相中分离并鉴定了 3个化合物,分别是山奈酚、
腺苷和尿苷;汪小根等[17]采用水蒸气蒸馏法提取龙脷叶挥
发油,气质联用分离出 30个峰,鉴定出 16 种成分,占总峰面
积的 87. 17%,占挥发油分离成的 53. 3%,其主要成分为棕榈
酸、合金欢基丙酮等。
3 药理研究
3. 1 止咳祛痰作用 痰火咳嗽是生活中常见的一种呼吸道
疾病,剧烈咳嗽可使肺泡壁弹性减弱,最终可导致肺泡破裂。
目前,由于针对痰火咳嗽的西药大多有副作用大、治标不治
本等缺陷,研究龙脷叶的止咳祛痰作用,进而为从龙脷叶中
找到天然无副作用的药用成分显得尤为重要。国内对此有
一些文献报道,如汪小根等[17]从龙脷叶挥发油中鉴定出的
合金欢基丙酮等成分具有平喘镇咳的作用,可治疗小儿肺炎
及扁桃体炎[18],与龙脷叶的清肺热、化痰止咳等功效相一
致;何鹏等[12]研究发现龙脷叶中的黄酮苷成分山奈酚 - 3 -
O -龙蛋二糖苷具有抗炎、止咳、抗溃疡等功效。
丁聪等[19]利用氨水刺激小鼠的方法研究龙脷叶的止咳
祛痰作用,研究表明:龙脷叶水体物高、中、低剂量均能抑制
由氨水引起的小鼠咳嗽,其中中剂量(10 g /kg)、高剂量
(15 g /kg)效果显著,3个剂量均能显著增强小鼠喉管的酚红
分泌量,说明其有较好的祛痰效果。沈小静[16]将龙脷叶90%
乙醇提取浸膏用不同极性有机溶剂萃取,并分别对每个组分
做小鼠止咳实验,结果表明:氯仿高浓度组、乙酸乙酯(低、高
浓度)组、正丁醇(低、高浓度)组在止咳方面效果突出。
3. 2 抗炎镇痛作用 目前,市面上的抗炎镇痛药大部分为
非甾体抗炎镇痛药(NSAIDs) ,不同种类的 NSAIDs作用机制
相同:药物通过抑制环氧化酶的活性,从而起到抑制体内花
生四烯酸生成前列环素、前列腺素和血栓素等作用,而前列
环素、前列腺素和血栓素等能够调节细胞代谢,而且与炎症、
过敏反应和心血管疾病等病理过程有关,对人体起着重要作
用。NSAIDs除抑制前列腺素等的合成外,还可抑制炎症过
程中缓激肽的释放等,对机体产生不利影响。因此,NSAIDs
除了有抗炎止痛作用外,还同时导致许多相应的副作用,使
得研究龙脷叶的抗炎镇痛作用具有重要意义。
丘琴等[20]采用二甲苯(急性炎症致炎剂)诱导小鼠耳肿
胀,龙脷叶根水提液做抗炎实验发现根水提液达到某一浓度
时有明显抑制作用,并且能明显抑制棉球诱导的大鼠肉芽肿
的形成,抑制醋酸对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响,研究
表明其抗炎作用机制与影响血管通透性有关。甄汉深等[21]
研究表明,龙脷叶水提液可明显抑制由二甲苯导致的小鼠耳
廓肿胀、角叉菜胶(急性炎症致炎剂)导致的大鼠足跖肿胀及
小鼠肉芽肿的增生,龙脷叶水提液对炎症渗出和肿胀有抑制
作用;在对小鼠做扭体反应试验中发现,龙脷叶水提液对化
学刺激引起的疼痛有明显抑制作用,但没有外周镇痛和中枢
性镇痛作用。
3. 3 抑菌作用 植物在抵御病害时自身会产生某种具有抑
菌作用的活性物质,该活性物质常常因为毒副作用小而受到
药物研究者的重视。有文献报道,龙脷叶叶的提取液对金黄
色葡萄球菌和血液性链球菌有抑制作用,但是确切的抑菌活
性还不能确定。黄燕等[22]用龙脷叶 50%乙醇提取液 6种供
试菌:金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌耐药株、大肠杆菌、
铜绿假单胞菌、伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌进行抑
菌试验,发现其对 6 种供试菌均有较好的抑制作用,测得
MIC值为 31. 3 ~62. 5 mg /mL,并且对龙脷叶醇提物进行多种
溶剂萃取得到不同部位提取物,分别进行抑菌试验发现,正
丁醇部位活性较好,测得 MIC值分别为:对金黄色葡萄球菌、
金黄 色 葡 萄 球 菌 耐 药 株 及 大 肠 杆 菌 的 MIC 值 为
15. 6 mg /mL,对伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌及铜绿
假单胞菌的 MIC值为 7. 81 mg /mL。
3. 4 抗过敏作用 咳喘的发生多为过敏反应,为吸入特异
性抗原与 IgE结合而引起肥大细胞和嗜碱性粒细胞颗粒,从
而释放出致哮喘、胸闷、咳嗽等过敏症状的组织胺等物质。
林慧等[23]建立了大鼠被动皮肤过敏及豚鼠过敏性支气管痉
挛的哮喘实验模型,考查龙脷叶水煎提取液的药效,研究表
明高剂量龙脷叶水煎提取液能抑制卵蛋白引起的大鼠皮肤
过敏反应,同时能缓解致敏豚鼠产生的支气管痉挛,使发生
休克的潜伏期延长且能起到缓解过敏性休克作用。
3. 5 抗 HBeAg作用 乙肝 e抗原简称 HbeAg,其阳性伴随
乙肝表面抗原阳性,乙肝核心抗体阳性,即通常所说的乙肝
大三阳,而大三阳具有高度传染性,病毒在体内急剧复制,使
病情恶化。如果是急性乙肝感染期,乙肝 e抗原在血清中存
在周期一般为 3 ~ 6 周,此时使用抗 HbeAg 药物可控制病情
恶化。徐燕萍等[24]使用 ELISA技术分别对 250 种中草药水
提物进行了抗 HbeAg实验,实验分别用 5 种剂量(0. 3、0. 6、
1. 2、2. 5、5. 0 mg /100 μL)的药物、3 种不同接触时间(立即、
1 h、2 h)与 2种不同浓度(10. 92、14. 26 P /N比值)HbeAg的
10项 P /N比值对中草药进行药效综合评价,研究发现龙脷
叶水提物有较好的抗 HbeAg作用。
4 结语
综上所述,结合本草以及现代文献报道,龙脷叶多用于
11144 卷 21 期 梁柏照等 龙脷叶的质量分析·化学成分及药理作用研究进展
止咳祛痰、清热平喘,相关研究也表明该疗效明显。而痰火
咳嗽、哮喘是生活中常见疾病,所以研究龙脷叶,从中提取有
效的化学成分,对其进行合成,对人类的健康有重大意义。
由所查文献显示,大戟科植物大多具有抗肿瘤作用,而龙脷
叶是否也具有抗肿瘤作用尚未知,以及其他方面的药效作用
还需要进一步深入研究。目前尚未见有文献对龙脷叶化学
成分进行具体系统的研究,因此,还需要深入地研究和开发
其药效、机制、确切的活性成分,以期为其药用价值及其临床
用药的安全、有效提供科学依据。
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6 -9.
(上接第 87页)
表 4 最优提取条件重复试验结果
Table 4 Test results of the optimal extraction conditions
项目
Item
腐植酸提取液质量
Wight of BHAs
extracting solution
g
提取液腐植酸含量
BHAs content
in extracting
solution ∥%
碱提步骤提取率 ω1
Extraction rate in
alkali-extraction
step ∥%
腐植酸成品重量
Weight of BHAs
finished product
g
成品腐植酸含量
Content of BHAs
finished product
%
腐植酸提取率 ω2
Extraction rate
of BHAs
%
平行试验 1 Parallel test 1 558. 4 3. 79 88. 48 15. 3 76. 98 49. 24
平行试验 2 Parallel test 2 554. 6 3. 81 89. 46 15. 6 76. 62 49. 97
3 结论
以糠醛生产排放的废弃物糠醛渣为原料,经过微生物好
氧发酵腐熟得到发酵糠醛渣,采用碱提酸析法从中提取生化
腐植酸(BHA)。设计了 4因素 4水平正交试验,考察固液比
(发酵糠醛渣与水的质量比)、碱液浓度、提取温度、提取时间
对生化腐植酸提取率的影响,再通过加酸调节 pH,使腐植酸
提取液中的腐植酸凝胶析出,固液分离烘干后得到成品生化
腐植酸。结果表明,腐植酸最佳提取工艺条件:碱提步骤固
液比 1∶ 8,碱液浓度 8%,提取时间 2. 5 h,提取温度 70 ℃,酸
析步骤 pH 2. 5。得到腐植酸含量为 76%的固体生化腐植酸
成品,其提取率为 49%。
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