全 文 ：（总 ） 广西中医药 2016年 6月第 39卷第 3期
两个产地的倒地铃中差不多，其中
柳州产地为 8.53%、南宁产地为
6.96%；药理实验证明，甲氧基肉桂
酸乙酯具有抗促癌活性，可在肿瘤
发生的启始阶段和促进阶段分别
发挥阻抑作用，具有化学防癌的功
效，是一种安全性强、防癌效果好
的天然化合物［11］。
叶绿醇的含量在两个产地的
倒地铃中分别为 5.90%（柳州）、
4.16%（南宁），叶绿醇简称“叶醇”，
亦称“植物醇”，是植物叶绿素分子
上一个支链，属于链状双萜类物
质，是一种含有多支链的脂肪醇。
叶绿醇及其代谢产物在调控机体
糖脂代谢和脂肪细胞分化聚酯方
面具有重要作用，可通过上调肝脏
中脂肪酸氧化的基因表达水平，从
而减少肝脏中的脂肪累积，对肝脏
糖脂代谢有一定调节作用［12-13］。
本研究结果可为倒地铃的质
量标准制定及进一步开发利用提
供科学依据，对该植物资源的综合
开发利用具有参考价值。
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2011，133（2）：743-750.
（2016-04-22 收稿/编辑 陈明伟）
龙脷叶 Sauropus spatuli folius
Beille为大戟科植物，主要分布在
广西、广东、福建等地，具有清肺
热、抗菌、止咳作用，壮族民间常用
于治疗急性支气管炎、上呼吸道感
染、支气管哮喘，是临床常用的壮
药［1］。龙脷叶含有皂苷、甾体类、
氨基酸和脂肪酸等成分［2-3］。氨基
酸是一种重要生物活性物质［4］，其
中组氨酸、苏氨酸的缺乏可使小鼠
对伤寒沙门氏菌的易感性增高，赖
氨酸缺乏可使小鼠炭疽芽胞杆菌
的抵抗力下降，而皮下注射半胱氨
酸可增强动物的某些非特异性免
疫功能及增强对可产气荚膜梭状
芽胞杆菌、葡萄糖球菌毒素的抵抗
力［5］。氨基酸是龙脷叶的抗菌活
性成分，目前对龙脷叶中氨基酸成
分的研究尚未见报道。本实验对龙
脷叶中 L-谷氨酸、精氨酸、脯氨
酸、亮氨酸进行薄层色谱分析，并
采用全自动氨基酸分析仪测定龙
脷叶中氨基酸的含量，旨为进一步
研究龙脷叶的活性成分提供实验
基础。
1 实验材料
1.1 仪器 L-8800型全自动氨基
酸分析仪（日立）；BP211D型电子
天平（德国赛多利斯公司）；CD-
UPT型超纯水机（成都超纯科技有
限公司）；KQ5200B 型超声提取仪
（昆山市超声仪器有限公司）；
DHG-9240A 型电热恒温干燥箱
（上海齐欣科学仪器有限公司）；
FW135型中草药粉碎机（天津市泰
斯特仪器有限公司）。
1.2 试药 L-谷氨酸对照品（批
号：111576-200201，供鉴定用）；精
氨酸对照品 （批号：140685 -
201305，供含量测定用）；脯氨酸对
照品（批号：111659-200301，供鉴
定用）；亮氨酸对照品（批号：
110876-200204，供鉴定用）；龙
脷叶对照药材（批号：121623 -
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（总 ）广西中医药 2016年 6月第 39卷第 3期
龙脷叶中氨基酸的成分分析
谭建宁 马雯芳 李耀华 广西中医药大学 530001 南宁市明秀东路 179号
摘 要 目的：对龙脷叶中氨基酸成分进行分析。方法：采用 TLC法对龙脷叶中 L-谷氨酸、精氨酸、脯氨
酸、亮氨酸进行薄层色谱分析；采用日立 L-8800型全自动氨基酸分析仪分析龙脷叶中 18种氨基酸。结果：龙脷
叶中游离氨基酸薄层鉴别分离度好，专属性强；龙脷叶中氨基酸总量达 16.32%，其中谷氨酸含量最高（2.31%），
蛋氨酸含量最低（0.06%）。结论：本法简便可行，结果准确，重复性好，可用于龙脷叶的质量研究。
关键词 龙脷叶；氨基酸；TLC；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1003-0719（2016）03-0076-03
基金项目：广西自然科学基金项目（编号：2013GXNSFAA019171）；广西中医药民族医药继承创新工程壮瑶医药研究与开发项目（编
号：GZZY13-10）
201001，供鉴定用）；十二烷基硫酸
钠（SDS）、正丁醇、正己烷及其余试
剂均为分析纯，水为纯净水。
1.3 药材 龙脷叶于 2014 年 10
月购自玉林药材批发市场，经广西
中医药研究院严克俭助理研究员
鉴定为大戟科植物龙脷叶 Sauro－
pus spatuli folius Beille 的干燥叶。
5 批龙脷叶产地分别为广西靖西
（批号：141001、141002），玉林（批
号：141004）和梧州（批号：141003、
141005）。
2 实验方法
2.1 对照品溶液的制备 分别取
L-谷氨酸、脯氨酸、精氨酸、亮氨
酸对照品适量，精密称定，加水制
成每 1 ml 含 0.50 mg 的溶液，作
为龙脷叶薄层色谱对照品溶液。
再分别取以上各氨基酸对照品
0.03～0.09 g，精密称定，置同一个
500 ml 量瓶中，加水至刻度，摇
匀，备用。临用时精密吸取 2.0 ml
置 10 ml量瓶中，加水至刻度，摇
匀，即得。作为氨基酸成分分析的
对照品溶液。
2.2 对照药材溶液的制备 取龙
脷叶对照药材 1.0 g，精密称定，置
于 50 ml具塞锥形瓶中，加入适量
水，超声提取 40 min，滤过，滤液蒸
干，加水定容至 5 ml，作为龙脷叶
对照药材溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取龙脷
叶粉末（过 20 目筛）1.0 g，精密称
定，置于 50 ml具塞锥形瓶中，以
水为溶剂，超声提取 40 min，滤过，
滤液蒸干，加水定容至 5 ml，作为
龙脷叶薄层色谱供试品溶液。另取
龙脷叶药材适量，于 65 ℃干燥至
恒重后进行常规酸水解处理。精密
称定药材粗粉（过 100目筛）0.4 g，
置水解管中，精密加入 6 mol/L
HCl溶液 20 ml，抽真空状态下封
管，置于 110 ℃烘箱中水解 24 h，
取出，冷却，滤过，精密量取滤液 1 ml
蒸干。残留物用去离子水溶解，再
蒸干，反复进行 2次，最后残留物
用去离子水溶解定容至 25 ml，用
0.45 μm滤膜滤过，取续滤液，即
得。作为氨基酸成分分析的供试品
溶液。
2.4 10%微乳液的制备 取十二
烷基硫酸钠（SDS）、正丁醇、正己烷
和水，按3.0∶14.0∶2.0∶2.2的比例混
匀，即得。
2.5 龙脷叶的薄层色谱分析 参
照薄层色谱法［6］试验，分别精密
吸取供试品溶液、氨基酸对照品
溶液、龙脷叶对照药材溶液各 10 μl，
分别点于同一硅胶G薄层板（20 cm×
20 cm），以 10%微乳液为展开剂展
开，取出，晾干，喷以 2%茚三酮乙
醇试液（临用配制），电吹风热风吹
至斑点显色清晰。
2.6 氨基酸成分分析 ［7-8］ 采用
日立 L-8800型全自动氨基酸分析
仪。分析柱：阳离子交换树脂柱
（4.6 mm×60 mm，3 μm）；分析时
间：45 min；缓冲液流速：0.4 ml/min
（缓冲液泵压力 8～11.5 Pa），茚三
酮流速：0.3 ml/min（茚三酮泵压力
0.9～1.2 kPa）；缓冲液改变次数 5
次；柱温：56 ℃ ；氮气压力：20 kPa；
供试品和对照品溶液进样量均为
20 μl。
3 结 果
3.1 龙脷叶中游离氨基酸薄层色
谱分析结果 见图 1。供试品色谱
中，在与对照品色谱相应的位置
上，显相同颜色斑点。
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（总 ） 广西中医药 2016年 6月第 39卷第 3期
1 L-谷氨酸 2 亮氨酸 3 精氨酸
4 脯氨酸 5 龙脷叶对照药材
6～10 供试品（批号：141001～141005）
图 1 龙脷叶中游离氨基酸 TLC图
3.2 龙脷叶中氨基酸成分的分析
结果 按照 2.6项测定条件，对龙
脷叶中 18种基础氨基酸进行分析
测定，结果见表 1。
4 讨 论
龙 脷 叶 中 含 有 蛋 氨 酸
（0.06%）、缬氨酸（1.07%）、苏氨酸
（0.82%）、异亮氨酸（0.84%）、苯丙
氨酸（1.07%）、亮氨酸（1.58%）、赖
氨酸（0.62%）等 7种人体必需氨基
酸，含有组氨酸（0.27%）、胱氨酸
（0.08%）、络氨酸（0.58%）、精氨酸
（1.29%）等 4种半必需氨基酸。龙
脷叶总氨基酸总量达 16.32%，表
明龙脷叶具有较高的药用和食用
价值。
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（2016-05-03 收稿/编辑 陈明伟）
表 1 龙脷叶中 18种基础氨基酸的测定结果
序号 氨基酸种类 含量（%） 序号 氨基酸种类 含量（%）
1 门冬氨酸（Asp） 1.73 10 蛋氨酸（Met） 0.06
2 苏氨酸（Thr） 0.82 11 异亮氨酸（Ile） 0.84
3 丝氨酸（Ser） 0.83 12 亮氨酸（Leu） 1.58
4 谷氨酸（Glu） 2.31 13 络氨酸（Tyr） 0.58
5 脯氨酸（Pro） 1.05 14 苯丙氨酸（Phe） 1.07
6 甘氨酸（Gly） 1.05 15 赖氨酸（Lys） 0.62
7 丙氨酸（Ala） 1.07 16 氨（NH3） 0.44
8 胱氨酸（Gys） 0.08 17 组氨酸（His） 0.27
9 缬氨酸（Val） 1.07 18 精氨酸（Arg） 1.29
合计 氨基酸总量（%） 16.32
色谱以微乳系统作为展开剂，可以
有效克服由于氨基酸成分水溶性
强、极性大造成斑点拖尾的缺点。
在预试验中，本课题组对龙脷叶中
氨基酸的薄层色谱展开系统进行
筛选，分别考察了正丁醇∶冰醋酸∶
水（4 ∶1 ∶1）、氯仿 ∶甲醇 ∶水（7 ∶3 ∶1）、
10%微乳液、30%微乳液、60%微乳
液等多种不同展开系统，其中以
10%微乳液的分离效果最好，斑
点集中清晰，比移值适中，专属
性强。
氨基酸是构成生物体蛋白质
分子的基本单位，与生物的生命活
动密切相关，尤与人类健康有着紧
密的关系。本研究采用全自动氨基
酸分析仪分析测定了龙脷叶中 18
种基础氨基酸的含量，为龙脷叶的
质量评价和营养评价提供初步的
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