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地锦草提取物及其有效部位化学成分的初步研究



全 文 :总含量的 83.70%,如表 1所示。饱和脂肪酸以庚酸(0.38%)、
棕榈酸 (5.12%)为主;不饱和脂肪酸以 9 -十六碳烯酸
(0.27%)、9 -十八碳烯酸(23.57%)、 9, 12 -十八碳二烯酸
(14.52%)、9, 17-十八碳二烯酸(5.14%)为主要成分;桃仁的
脂溶性成分还包括酯类 、萜类化合物等。其中 , 以 α-姜黄酮
(0.32%)、 9 -十八烯酸 -2 -羟基 -1 -羟基甲基乙酯
(1.47%)、1, 2 -二苯甲酸二丁基酯 (0.14%)、 β -倍水芹烯
(3.32%)、α-姜黄烯 (1.98%)、α-姜烯(1.36%)、生育酚
(1.15%)、维生素 E(0.09%)为主要成分。
4 讨论
本次实验从桃仁和山桃仁样品中所鉴定出 46个化合物 , 其
中脂肪酸的含量最高 , 占总含量的 49.0%。其中不饱和脂肪酸
以 9-十六碳烯酸(0.27%)、9 -十八碳烯酸(23.57%)、 9, 12-
十八碳二烯酸(14.52%)、9, 17-十八碳二烯酸(5.14%)的总含
量高达 43.5%。 研究表明 , 不饱和脂肪酸具有抗氧化 、抗自由
基 、抗肿瘤 、增强免疫的作用 , 可以明显的降低高密度脂蛋白血清
胆固醇的作用 , 进而减少高血压 、心脏病及中风等疾病的发病
率 [ 4] 。 TakouKosuge从桃仁中分离的三油酸甘油酯经研究发现
具有优良的抗凝血活性 , 凝血时间延长率为 37% [ 5] 。本次实验
检测到甘油 、油酸 、亚油酸等。与报道基本相符合 ,对探索桃仁的
有效成分或者指标性成分有着积极意义。另外 , 脂溶性成分 α-
姜黄酮(0.20%)、α-姜黄烯(1.90%)、α-姜烯(1.02%)也有
降低血浆总胆固醇 、β -脂蛋白和甘油三酯的作用 [ 6] 。 研究表
明 , 桃仁的主要化学成分还有苷类如甲基 -α-呋喃果糖苷 , 甲
基 -β -D-吡喃葡萄糖苷 [ 7] 、氨基酸类 、甾醇类 、苦杏仁酶和蛋
白质 [ 8] 。
桃仁和山桃仁石油醚部位中共有 33个相同的成分 , 但各成
分的含量有差异。在共有成分中含量较多的为棕榈酸 、9-十六
碳烯酸 、9-十八碳烯酸 、9, 12-十八碳二烯酸 、9, 17 -碳二烯酸 ,
其特征性比较明显 , 属脂肪酸类。且在功效上均与桃仁活血化淤
的功效有一定内在的联系 , 可以考虑将以上几种化合物作为桃仁
特征性成分群。对此需要进行更加深入的研究 , 收集足够多 、有
代表性的样本 ,包括不同品种 、产地 、采收时节的样品 ,运用 GC-
MS方法 ,分析样本的共性 ,在此基础上 , 对不同品种或产地的个性
展开分析 ,以探求个性的差异。并且选择优化的色谱条件 , 确定适
宜的色谱柱 ,以特征指标成分群出峰相对保留时间以及相对含量
的稳定性作为参考 ,建立桃仁的 GC-MS指纹图谱 , 作为桃仁质量
控制的方法之一 ,从而有助于桃仁质量控制评价系统的建立。
参考文献:
[ 1 ]  国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2010:260.
[ 2 ]  张廷模.中药学 [ M] .北京:高等教育出版社 , 2002:265.
[ 3 ]  胡 锐 ,李宝莉.多不饱和脂肪酸对心血管系统的作用及机制 [ J] .
西北药学杂志, 2008, 23(2):118.
[ 4 ]  DouglasG.Hayes.Efectoftemperatureprogrammingontheperfor-
manceofureainclusioncompound-basedfreefatyacidfractionation
[J].JournaloftheAmericanOilChemistsSociety, 2006, 83(3):253.
[ 5 ]   RobertW, JohnRS.Chainseparationofmonounsaturatedfatyacid
methylestembyargentationthinlayerchromatography[ J].Journalof
chromatographyA, 2001, 905(1):251.
[ 6 ]  张 氽 ,阚建全 ,陈宗道.硝酸银-硅胶纯化 α-亚麻酸的研究 [ J] .
离子交换与吸附 , 2005, 21(1):47.
[ 7 ]  RezankaT.Two-dimensionalseparationoffatyacidsbythin-layer
chromatographyonureaandsilvernitratesilicagelplates[ J] .Journalof
chromatographyA.1996, 727(1):147.
[ 8 ]  袁 丹 ,胡 爽 ,毕开顺 ,等.桃仁药材质量评价法的研究 [ J].中国
药学杂志 , 2003, 38(1):53.
收稿日期:2010-11-01; 修订日期:2011-02-24
基金项目:国家自然科学基金(No.81060370;30760308);国家科技支撑计划资助项目(No.2007BAI30B03)
作者简介:谢 奇(1982-),男(汉族),广西来宾人 ,现为新疆石河子大学硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事药理学教研工作.
*通讯作者简介:李治建(1982-),男(汉族),河南商丘人 ,现任新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所助理研究员 ,硕士学位 ,主要从事药理毒理学研究
工作.
地锦草提取物及其有效部位化学成分的初步研究
谢 奇 1 ,李治建2* ,斯拉甫·艾白 2, 3, 4 ,古力娜·达吾提4 ,周 露 1
(1.石河子大学药学院 ,新疆 石河子 832000; 
2.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所 ,新疆 乌鲁木齐 830049; 
3.新疆维吾尔医方剂学实验室 ,新疆 乌鲁木齐 830049; 
4.新疆维吾尔自治区维吾尔医医院 ,新疆 乌鲁木齐 830049)
摘要:目的 对地锦草提取物及其有效部位进行化学成分初步研究。方法 采用薄层色谱法 、沉淀反应或颜色反应对地锦
草水提液 、乙醇提取液 、石油醚提取液及地锦草有效部位进行化学成分系统预试 ,对其化学成分进行分析鉴别。结果 实
验表明 , 地锦草不同提取物和有效部位中黄酮及其苷 、糖及其苷类 、香豆素 、蒽醌类 、三萜 、甾体 、鞣质 、酚性成分 、有机酸
等反应均呈阳性结果。结论 该研究提示地锦草提取物和有效部位可能含有的化学成分的种类 , 为地锦草化学成分及其
开发利用提供了实验基础。
关键词:地锦草; 化学成分; 系统预试
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.08.006
中图分类号:R284.2  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2011)08-1814-03
PreliminaryStudyontheChemicalCompositionsofExtractandEffectiveFractioninEu-
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时珍国医国药 2011年第 22卷第 8期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.8
phorbiahumifusa
XIEQi1 ,LIZhi-jian2* , Silafu·AIBAI2, 3, 4 , Gulnar·DAWUTI4 ,ZHOULu1
(1.PharmaceuticalColegeofShiheziUniversity, Shihezi832000 , China;2.XinjiangInstituteofTraditional
UighurMedicine, Urumqi830049, China;3.KeyLaboratoryofTraditionalUyghurMedicinePrescriptionUru-
mqi830049 , China;4.UighurMedicineHospitalofAutonomousRegion, Urumqi830049, China)
Abstract:ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofEuphorbiahumifusa.MethodsUsedthemethodofsystematicpre-
testandTLCtoidentifytheethanolextract, waterextractandligroinextract.ResultsItshowedthatEuphorbiahumifusamight
containflavoneandtheirglycosides, carbohydratesandtheirglycosides, coumarin, anthraquinones, triterpene, steroids, tannin,
phenolsandorganicacids.ConclusionTheresearchshowsthekindsofthechemicalcompositionsofextractandeffectivefraction
intheEuphorbiahumifusaandtheresultsofpriliminarytestprovideevidenceforfurtherstudyofthechemicalcompositionsand
developingofEuphorbiahumifusa.
Keywords:Euphorbiahumifusa; Chemicalcomponent; Systematicpretest
  地锦草 EuphorbiahumifusaWild.系大戟科大戟属植物 , 维语
称为夏塔热其尼(Xiahatereqini)、雅丽蔓(Yalmankulake), 为一年
生匍匐草本 , 分布遍及全国 [ 1] 。地锦草全草均可入药。药理学
研究表明地锦草具有多种生理活性 , 具有抗真菌 、抗炎 、抗氧化 、
抗过敏 、免疫调节 、保肝 、止血等多种作用 [ 2 ~ 5] 。其化学成分主要
有黄酮 、三萜 、香豆素 、甾醇 、鞣质及酚酸类等化合物 [ 6] , 但未见
对其化学成分系统试验的研究报道。本文通过试管预试法和薄
层色谱法 , 研究了地锦草提取物和有效部位化学成分的主要类
别 , 为其进一步研究开发提供科学依据。
1  材料与仪器
1.1  材料与试剂 干燥地锦草 EuphorbiahumifusaWild.全草 ,由
新疆维吾尔自治区维吾尔医医院制剂中心提供 ,经新疆维吾尔自
治区维吾尔医医院制剂中心艾尼瓦尔副主任药师鉴定为大戟科
地锦草全草。地锦草有效部位 , 由新疆维吾尔自治区维吾尔医药
研究所自制(批号 20100825)。没食子酸(Gallicacid)对照品 ,由
中国药品生物制品检定所提供(批号 110831-200803)。薄层层
析用硅胶 G254,青岛海洋化工厂分厂提供(批号 20080902)。甲
酸 、石油醚等试剂均为分析纯。
1.2 仪器 LSY型电热恒温水浴锅(北京市医疗设备厂);SHB
-Ⅲ型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);RE-
52型旋转蒸发器(巩义市予华仪器有限公司);JM2102型电子天
平(余姚纪铭称重校验设备有限公司);WFH-203B型三用紫外
分析仪(上海精科实业有限公司)。
2 方法与结果
2.1  地锦草药材不同提取液的制备
2.1.1 水供试液制备 取地锦草 7 g,压碎后置于带塞圆底烧瓶
中 , 加入蒸馏水 105ml, 浸渍 24 h后 , 进行加热回流提取 1 h,滤
过 , 再向药渣中加入蒸馏水 200ml,进行加热回流提取 1 h, 滤过 ,
合并滤液 , 即得热水供试液(A)。
2.1.2  40%乙醇供试液制备 取地锦草 5 g,压碎后置于带塞圆
底烧瓶中 , 加入 40%乙醇 100ml, 浸渍 1h,再 80℃水浴加热回流
提取 1 h,滤过 ,将滤液用旋转蒸发仪浓缩 , 浓缩液即为 40%醇供
试液(B)。
2.1.3  70%乙醇供试液的制备 取地锦草 2 g,压碎后置于带塞
圆底烧瓶中 , 加入70%乙醇 40 ml,浸渍 1 h, 再沸水浴回流提取 1
h,滤过 , 将滤液倒入干锅后置于水浴上浓缩 , 浓缩液即为 70%醇
供试液(C)。
2.1.4 95%乙醇供试液的制备 取地锦草 2 g, 压碎后置于带塞
圆底烧瓶中 , 加入 95%乙醇 40 ml, 浸渍 1 h, 再 60℃水浴回流提
取 1 h, 滤过 , 将滤液倒入干锅后置于水浴上浓缩 , 浓缩液即为
95%醇供试液(D)。
2.1.5 酸水供试液制备 取地锦草 2.5 g, 压碎后置于圆底烧瓶
中 , 加入 5%盐酸和 70%乙醇各 25 ml,加热回流提取 2 h, 滤过 ,
滤液即为酸水供试液(E)。
2.1.6 石油醚供试液制备 [ 7] 取地锦草 2.5 g,压碎后置于圆底
烧瓶中 , 加入沸程为 60 ~ 90℃的石油醚 50 ml, 水浴加热(沸腾后
调节温度保持微沸状态即可)回流提取 2 h, 滤过 , 将滤液用倒入
干锅后置于水浴上浓缩 ,浓缩液即为石油醚供试液(F)。
2.2  地锦草有效部位不同提取液的制备
2.2.1 水供试液制备 取地锦草有效部位 7 g,置于带塞圆底烧
瓶中 , 加入蒸馏水 105 ml, 浸渍 24 h后 , 进行加热回流提取 1 h,
滤过 , 即得热水供试液(G)。
2.2.2 40%乙醇供试液制备 取地锦草有效部位 5 g, 置于圆底
烧瓶中 ,加入 40%乙醇 100 ml, 待溶解后 , 再 80℃水浴加热回流
提取 1 h,滤过 , 将滤液用旋转蒸发仪浓缩 , 浓缩液即为 40%醇供
试液(H)。
2.2.3 70%乙醇供试液的制备 取地锦草有效部位 2 g, 置于圆
底烧瓶中 ,加入 70%乙醇 40 ml,待溶解后 , 再沸水浴回流提取 1
h,滤过 ,将滤液置于干锅在水浴上浓缩 , 浓缩液即为 70%醇供试
液(I)。
2.2.4  95%乙醇供试液的制备 取地锦草有效部位 2g, 置于圆
底烧瓶中 , 加入 95%乙醇 40 ml,待溶解后 , 再 60℃水浴回流提取
1 h, 滤过 ,将滤液置于干锅在水浴上浓缩 , 浓缩液即为 95%醇供
试液(J)。
2.2.5 酸水供试液制备 取地锦草有效部位 1.5g, 置于圆底烧
瓶中 , 加入 5%盐酸和 70%乙醇各 15 ml, 加热回流提取 1 h, 滤
过 , 滤液即为酸水供试液(K)。
2.2.6 石油醚供试液制备 取地锦草有效部位 1.0 g, 置于圆底
烧瓶中 , 加入沸程为 60 ~ 90℃的石油醚 20 ml, 水浴加热(沸腾后
调节温度保持微沸状态即可)回流提取 1 h, 滤过 , 将滤液置于干
锅在水浴上浓缩 ,浓缩液即为石油醚供试液(L)。
2.3  试管预试法 向盛有样品供试液的试管中加入相关的检测
试剂 , 根据反应现象(颜色 、沉淀等)来判断某种化学成分在地锦
草中是否存在。如为阳性反应以 “ +”表示 , 阴性反应以 “ -”表
示。结果见表 1 ~ 2。
2.4 薄层色谱法 取地锦草有效部位 0.5 g, 加甲醇 5 ml,超声
处理 15min,滤过 , 滤液作为供试品溶液。取没食子酸对照品 5
mg,加 5 ml甲醇定容到 5ml容量瓶 ,制成每 1 mg· ml-1的溶液
作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录 VIB)试验 [ 8] , 吸取上述
三种溶液各 2 μl,分别点于同一硅胶 GF254薄层板上 , 以三氯甲
烷 -甲酸乙酯 -甲酸(5∶5∶1)为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾干 , 置
于紫外灯(254 nm)下检视。供试品色谱中 , 在与对照品色谱相
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.8 时珍国医国药 2011年第 22卷第 8期
应的位置上 , 显相同颜色的斑点。结果见图 1。
表 1 地锦草提取物及其有效部位化学成分的试管预试结果
成分类别 供试液 试剂或反应名称 正反应现象 结果
三萜 B冰醋酸 -乙酰氯反应 呈淡红色或紫红色 B(+)H(+)
H氯仿 -浓硫酸反应 氯仿层呈红色或蓝色 ,硫酸层有绿色荧光
B(+)
H(+)
甾体 F 三氯醋酸反应 试液呈红色 F(+)L(+)
L醋酐 -浓硫酸反应 呈黄-红-紫-蓝-污绿等颜色变化 ,最后褪色
F(+)
L(+)
蒽醌 C 碱性试液 加NaOH溶液后呈红色 ,酸化后红色又消失
C(+)
I(+)
I 醋酸镁试验 试液呈红色 C(+)I(+)
盐酸 -镁粉反应 试液显红色 D(+)J(+)
黄酮及其苷 D 三氯化铝反应 生成黄色络合物 D(+)J(+)
J 醋酸铅沉淀反应 加饱和醋酸铅有沉淀 ,取上清液加碱性醋酸铅 ,有沉淀生成
D(+)
J(+)
异羟肟酸铁反应 试液呈红色 B(+)H(+)
香豆素 B 重氮化反应 试液呈红色 B(+)H(+)
H 荧光反应 紫外灯下呈蓝色荧光 ,氨蒸后荧光颜色改变
B(+)
H(+)
有机酸 A pH试验 pH<7.0显酸性 A(+)G G(+)
表 2 地锦草提取液及其有效部位化学成分的试管预试结果
成分类别 供试液 试剂或反应名称 正反应现象 结果
酚性成分 AG 三氯化铁反应 呈现显绿 、蓝绿或暗紫色
A(+)
G(+)
E
K 重氮化反应 显红色
E(+)
K(+)
糖及其苷类 A 水解反应 产生絮状沉淀 A(+)G(+)
G Fehling反应 产生黄色 、砖红或棕色沉淀 A(+)G(+)
B
H Molish反应 出现紫红色环
B(+)
H(+)
碘化汞钾 白色沉淀 A(-)G(-)
生物碱类 A 硅钨酸试剂 浅黄或灰白色沉淀 A(-)G(-)
G 碘化铋钾 浅黄或橙红色沉淀 A(-)G(-)
碘 -碘化钾 产生红棕色沉淀 A(-)G(-)
泡沫试验 振摇后产生持久性泡沫 ,且不因加热而消失
A(-)
G(-)
皂苷类 A醋酐 -浓硫酸反应 产生黄 -红 -紫 -蓝等颜色变化 ,最后褪色
A(-)
G(-)
G氯仿 -浓硫酸反应 氯仿层显红色或蓝色 ,硫酸层有绿色荧光
A(-)
G(-)
鞣质 A 沉淀蛋白反应 产生沉淀 A(+)G(+)
G 三氯化铁反应 呈现蓝黑 、绿黑色反应或沉淀
A(+)
G(+)
a-供试品溶液    b-没食子酸对照品
图 1 地锦草有效部位有机酸类薄层色谱图
3 讨论
系统预试法 ,即在未知情况下对植物中可能含有的各类成分
进行比较全面系统的定性检查。本试验采用植物化学成分系统
预试法 , 对地锦草提取物及其有效部位进行了化学成分研究 , 结
果表明 ,其含有黄酮及其苷 、糖类及其苷 、香豆素 、蒽醌 、三萜 、甾
体类 、鞣质 、酚性成分 、有机酸等化学成分。由于有机酸类成分预
试结果 pH为弱酸性 , 为了进一步验证 , 我们对其进行了薄层色
谱检查 。由图 1可知 , 供试品色谱中 , 在与对照品色谱相应的位
置上 , 显相同颜色的斑点。结果提示 ,地锦草有效部位中可能含
有机酸类成分。
维药地锦草是夏塔热方剂中的君药 , 其抗真菌作用明显 [ 9] 。
多项研究表明 , 地锦草提取物及其有效部位对浅部致病真菌有较
强的抑制作用 ,其中对红色毛癣菌(T.rubrum)和石膏样毛癣菌
(T.mentagrophytes)最敏感 [ 10];但其抗真菌作用的物质基础还不
清楚。因此 , 对地锦草化学成分进行深入研究具有非常大的科研
价值和社会价值。本文对地锦草提取物及其有效部位化学成分
进行了初步研究 ,为后续结合生物活性分离单体并对其进行结构
解析等研究工作奠定了一定的基础 ,可为寻找新型抗真菌先导化
合物提供线索。
参考文献:
[ 1 ]  买买提明·沙比尔 ,乌兰 ,阿尔甫 ,等.维吾尔药材标准 ,上册 [ S] .
乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社 , 1993:99.
[ 2 ]  斯拉甫 ,哈木拉提 ,努尔买买提.夏塔热片合用夏塔热软膏的抗真
菌消炎作用研究 [ J] .中草药 , 2000, 31(7):538.
[ 3 ]  李治建 ,斯拉甫·艾白 ,古丽娜·达吾提 ,等.地锦草不同提取部位
抗皮肤癣菌作用研究 [ J].石河子大学学报 , 2008, 26(6):735.
[ 4 ]  李治建 ,斯拉甫·艾白 ,古丽娜·达吾提 ,等.地锦草提取物对皮肤
癣菌麦角甾醇生物合成的影响 [ J].医药导报 , 2009, 28(7):830.
[ 5 ]  马朝斌.“复方地锦草汤 ”治疗慢性特发性血小板减少症 35例 [ J] .
江苏中医药 , 2004, 25(11):31.
[ 6 ]  柳润辉 ,孔令义.地锦草脂溶性成分研究 [ J] .天然产物研究与开
发 , 2005, 17(4):437.
[ 7 ]  李国胜 ,樊金拴.巴山冷杉化学成分的初步研究 [ J] .西北林学院学
报 , 2005, 20(3):142.
[ 8 ]  国家药典委员会.中国药典 , l部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005,附录 31.
[ 9 ]  古丽娜·达吾提 ,尤丽吐孜 ,艾则孜·亚森 , 等.维药地锦草软膏的
体外抗真菌及其研究 [ J].中药药理与临床 , 2007, 23(5):178.
[ 10] 李治建 ,古丽娜·达吾提 ,斯拉甫· 艾白.地锦草提取物体外抗真
菌作用研究 [ J] .时珍国医国药 , 2008, 19(12):2958.
·1816·
时珍国医国药 2011年第 22卷第 8期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.8