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黄槿叶片挥发油和脂肪酸成分的GC-MS分析



全 文 :第 9 期
收稿日期:2010-09-17
基金项目:广东省自然科学基金项目(06029124)
作者简介:李晓菲(1985-),女,甘肃武威人,在读硕士研究生,主要从事植物保护及天然产物化学研究,(电话)18998721717(电子信箱)
lixiaofei198532@163.com;通讯作者,宋文东,教授,博士,博士生导师,(电话)0759-2396163(电子信箱)songwd60@163.com。
第 50 卷第 9期
2011 年 5 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 50 No.9
May.,2011
黄槿(Hibiscus tiliaceus)为半红树植物,又名海
麻、糕仔树(台湾),属于锦葵科木槿属[1,2],是优良的
海岸潮间带防护林树种,其根系发达,植株高可达
7~10 m,单叶,互生,叶柄长 3.8 cm,叶脉 7~9 条,叶
近圆形或卵形,花期全年,叶、根具有止咳、清热解
毒和消肿的功效 [3],现广泛分布于我国广西、广东、
海南、福建、台湾以及日本、印度、马来西亚等地 [4]。
目前,黄槿化学成分的研究报道有,Li 等[5]从中国海
南的黄槿心材中分离得到 1 个新的木栓烷型三萜
和 8 个已知的三萜类化合物;Rosa 等 [6]通过对黄槿
花的甲醇、 乙酸乙酯提取物进行气质联用分析,得
出提取物大多是豆甾醇类化合物;冯超等 [7]采用正
相硅胶柱色谱、 反相硅胶柱色谱等分离纯化手段,
分离得到 11 个化合物, 并通过波谱技术鉴定了各
个化合物的结构;王忠昭[8]采用薄层层析、硅胶柱层
析以及波谱技术等手段,从黄槿中分离并鉴定了 21
个化合物。 关于红树林植物黄槿树叶挥发油和脂肪
酸的研究尚未见报道,试验对采自湛江特呈岛红树
林区的半红树植物黄槿叶片挥发油及脂肪酸成分
进行了 GC-MS 分析,并确定了各组分的相对含量,
以期为黄槿叶片化学成分的系统研究提供科学依
据,为红树林资源的开发利用提供一定的理论支持。
黄槿叶片挥发油和脂肪酸成分的 GC-MS分析
李晓菲 1a,秦培文 1a,纪丽丽 2,胡世伟 1b,宋文东 1c,李世杰 1b
(1.广东海洋大学,a.农学院;b.食品科技学院;c.理学院,广东 湛江 524088;2.东华大学环境工程学院,上海 200051)
摘要:应用气相色谱和质谱联用仪,对采自湛江市特呈岛红树林区的半红树植物黄槿(Hibiscus tiliaceus)
叶片的挥发油和脂肪酸成分进行分析测定。 结果表明,从挥发油组分中分离出 63 个峰,鉴定出 54 种化
合物,其中,含有吡咯类、呋喃类、酚类、醛酮类、醇类、吲哚类等丰富的物质种类,分别占挥发油总量的
6.34%、9.78%、19.32%、25.59%、15.85%、4.06%; 脂肪酸组分中共分离出 34 个峰, 鉴定出主要脂肪酸 13
种,和特呈岛其他红树林植物相比,黄槿叶片中同样含有相对含量较高的棕榈酸及亚油酸,分别占脂肪
酸总量的 30.11%和 10.11%。
关键词:红树林;黄槿叶片;挥发油;脂肪酸;GC-MS
中图分类号:O657.63;Q949.757.3 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2011)09-1893-05
Study on the Volatile Oil and Fatty Acids from the Leaves of Hibiscus tiliaceus
by GC-MS
LI Xiao-fei1a,QIN Pei-wen1a,JI Li-li2,HU Shi-wei1b,SONG Wen-dong1c,LI Shi-jie1b
(1.Guangdong Ocean University, a.College of Agronomy; b.College of Food Science and Technology; c.College of Science, Zhanjiang 524088,
China; 2.Donghua University, School of Environment Science and Engineering, Shanghai 200051, China)
Abstract: The volatile oil and fatty acid of the leaves of Hibiscus tiliaceus from semi-mangrove plant in Techeng island of
Zhanjiang city were studied by GC-MS. 63 peaks were separated and 54 compounds were identified from the volatile oil.
Many kinds of chemical components were involved, such as pyrrole(6.34%), furan(9.78%), phenol(19.32%), aldehyde ke-
tone(25.59%), alcohol(15.85%), indole(4.06%), et al. And 34 peaks were separated, 13 compounds were identified from
the fatty acids, compared with other mangrove plants from Techeng island, the leaves of Hibiscus tiliaceus also contained
abundant hexadecanoic acid and octadecadienoic acid, they were 30.11% and 10.11% of fatty acids respectively.
Key words: mangrove; leaves of Hibiscus tiliaceus; volatile oil; fatty acid; GC-MS
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2011.09.025
湖 北 农 业 科 学 2011 年
1 材料与方法
1.1 试验材料
新鲜的黄槿叶片于 2010 年春季采自湛江市特
呈岛红树林区,叶片经清洗晾干后,粉碎备用。 试验
所用试剂均为分析纯。
1.2 仪器
高速组织捣碎机(上海标本模型厂);挥发油提
取器 (长春市玻璃仪器厂);EV201 型旋转蒸发仪
(北京莱伯泰科仪器有限公司);QP-2010A 型气相
色谱-质谱联用仪(日本岛津公司)。
1.3 试验方法
1.3.1 挥发油的提取 称取粉碎后的黄槿叶片 500 g,
置于挥发油提取器中,参照《中国药典》(一部)附录
XD[9],并作改进,加入 600 mL 饱和氯化钠,浸泡 1 h
后,采用水蒸气蒸馏法,放置在电炉上直接加热蒸
馏,提取油质 3 h。 将接收到的油水混合液用乙醚进
行萃取,得到淡黄色乙醚萃取液。 取上层乙醚萃取
液,加入无水 MgSO4过夜除水,最后分离去除,将乙
醚挥发除去,得到淡黄色油状物,用 QP-2010A 型气
相色谱-质谱联用仪进行检测。
1.3.2 脂肪酸的提取及甲酯化 脂肪酸的提取:称
取干燥粉碎后的黄槿叶片 29 g,于索氏提取器中,用
250 mL的石油醚在 80 ℃的水浴中回流提取 6 h。 将
得到的提取液用旋转蒸发仪浓缩,得到软膏。
皂化甲酯化:称取上述所得的浓缩样品 0.5 g于
试管中, 加入 4 mL 0.5 mol / L 的 NaOH-CH3OH 于
60 ℃水浴回流 30 min 至油珠消失, 加入 2 mol / L
HCl 酸化,待溶液 pH 为 2 时,加入乙醚进行萃取,
得到油层,再加入 2.5%的 H2SO4-CH3OH 在 60 ℃水
浴中甲脂化 1 h,然后加入乙醚、饱和盐水各 2 mL,
振荡萃取,取上层油层,再加入 2 mL 乙醚重复萃取
1次。 将萃取液合并,加入无水 MgSO4过夜;次日用
胶头滴管吸取上清夜,将乙醚挥干,获得待测液 [10],
用 QP-2010A 型气相色谱-质谱联用仪进行检测。
1.4 挥发油和脂肪酸的检测条件
GC 条件:2010 型气相色谱仪,毛细管柱,氦气
为载气,柱温 60 ℃,进样温度 250 ℃,柱压 53.6 kPa,
载气流量 3 mL / min。
MS条件:EI 离子源,电子能量 70 eV,电离温度
200 ℃,界面温度 230 ℃,扫描时间:2~40 min,扫描
质量范围:20~500 u。
2 结果与分析
2.1 挥发油的测定结果
按试验方法所述 GC-MS 条件, 对黄槿叶片挥
发油进行 GC-MS 分析, 其总离子流色谱图共检出
63个峰(图 1)。
根据质谱图和标准图谱对照分析, 鉴定出 54
种化合物,采用色谱峰面积归一化法计算挥发油各
组成成分相对含量,见表 1。
由图 1 和表 1 可知,黄槿叶片提取的挥发油共
检测出 63 个峰,鉴定出 54 种化合物,其中主要成
分有 8 种 : 苯乙醇 8.25% ,2-乙烯呋喃 7.75% ,
3,4,4-三甲基-2-环戊烯-1-酮 7.62%,邻甲氧基苯
酚 5.01%, 吡咯 4.75%, 对甲基苯酚 4.03%, 吲哚
3.44%,对乙基苯酚 3.14%。
与同样采自湛江市特呈岛红树林区的红树林
植物秋茄、桐花树、白骨壤、木榄、露兜、海芒果相
比, 半红树植物黄槿叶片挥发油各组分含量均较
低,红树林植物叶片挥发油中含量普遍较高的成分
2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚,白骨壤叶片含41.09%,
海芒果树叶含 40.89%,秋茄树叶含 35.20%、桐花树
叶片含 20.60%、露兜叶片含 19.25%[11-15],在半红树
植物黄槿叶片中含量偏低,仅为2.13%,这与树种的
分布及生物合成途径有密切关系。
图 1 黄槿叶片挥发油的总离子流图


//m
AU
10.00 20.00 30.00 36.00
时间//min
1894
第 9 期
表 1 黄槿叶片挥发油化学成分及含量
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
保留时间//min
2.023
2.067
2.242
2.477
2.529
2.607
2.807
3.228
3.679
3.733
3.877
3.980
4.283
4.785
5.350
5.459
5.541
5.627
6.239
6.384
6.452
6.596
6.650
6.686
6.755
7.018
7.084
7.305
7.577
7.762
7.942
8.075
8.175
8.277
8.406
8.512
9.120
9.333
9.527
10.287
10.620
10.851
11.038
12.008
12.537
12.765
13.331
13.564
13.697
14.068
16.315
17.575
17.636
18.873
名称
3-甲基丁醛
2-甲基丁醛
正庚烷
3-甲基-丁醇
N-甲基-吡咯
吡咯
甲苯
N-乙基-吡咯
2-呋喃甲醇
1-羟基-3-已烯
甲酸乙酯
邻二甲苯
苯乙烯
3-甲基-2-戊酮
苯甲醛
2-乙烯呋喃
3-羟基-1-辛烯
6-甲基-5 烯基-2-庚酮
1-羟基-2-乙烯
1,2-二叔丁基二氮烯
苯甲醇
3-甲基-2-环己二烯-乙醛
苯乙醛
2-甲基苯酚
3,4,4-三甲基-2-环戊烯-1-酮
对甲基苯酚
2-(1,1-二甲基)-甲醇-5-甲基-5-乙烯基-呋喃
邻甲氧基苯酚
未鉴定出
未鉴定出
十二醛
苯乙醇
3,5,5-三甲基-2-环己烯酮
未鉴定出
4-甲基-3-环己烯-1-乙酮
苯甲腈
2,6,6-三甲基醌烯
1,4-二甲基-环己烯基-1-乙酮
对乙基苯酚
未鉴定出
对甲基异丙酮-3 环己烯
未鉴定出
二氢苯并呋喃
4,6,6-三甲基-2-甲酸双环庚烷
未鉴定出
2-甲氧基-4-乙基苯酚
吲哚
2-甲氧基-3-乙烯基苯酚
3,4-二甲氧基苯酚
未鉴定出
3-甲基吲哚
8,9-二甲基-十氢-1-萘醇
6,10-二甲基-5,9-二乙烯-2-十一烷酮
5-甲基-2-苯基-乙烯醛
2,6-二叔丁基-4 甲基苯酚
二环己烷酮
2,6,6-三甲基-2-环己基-呋喃酮
3,7,11-三甲基-1-十二醇
未鉴定出
未鉴定出
3,7,11,15-四甲基-2-十六烯醇
6,10,14-三甲基十五烷酮
十六酸
分子式
C5H10O
C5H10O
C7H16
C5H12O
C5H7N
C4H5N
C7H8
C6H9N
C5H6O2
C6H12O
C7H14O2
C8H10
C8H8
C8H12O
C7H6O
C6H6O
C8H16O
C8H14
C6H12O
C8H12N2
C7H8O
C9H14O
C8H8O
C7H8O
C8H12O
C7H8O
C10H18O2
C7H8O2
C12H24O
C8H10O
C9H14O
C9H14O
C8H7N
C9H12O2
C10H16O
C8H10O
C10H18O
C8H8O
C12H18O2
C9H12O2
C8H7N
C9H10O2
C8H10O3
C9H9N
C12H22O
C13H22O
C13H16O
C15H24O
C13H22O
C11H16O2
C15H32O
C20H40O
C18H36O
C16H32O2
相似度//%
95
95
89
93
91
93
91
93
95
92
87
94
93
87
97
94
89
84
83
92
97
78
92
93
98
89
97
85
96
94
92
72
88
82
96
96
90
81
81
94
87
80
96
91
93
79
85
81
87
90
91
95
92
含量//%
1.69
2.32
0.86
2.21
1.19
4.75
0.37
0.40
0.66
0.60
1.04
0.39
0.89
1.09
2.04
7.75
0.84
1.53
0.64
0.69
2.73
0.31
0.91
1.17
7.62
4.03
0.86
5.01
1.52
8.25
0.74
0.77
0.50
1.46
0.51
3.14
2.22
1.17
0.57
1.32
3.44
2.02
0.50
0.62
0.57
1.29
0.78
2.13
0.39
0.44
0.60
0.83
1.64
0.86
李晓菲等:黄槿叶片挥发油和脂肪酸成分的 GC-MS 分析 1895
湖 北 农 业 科 学 2011 年
图 3 黄槿叶片脂肪酸甲酯化产物总离子流图
10.00 20.00 30.00 36.00
时间//min


//m
AU
相对而言,黄槿叶片挥发油含有丰富的物质种
类,如吡咯类、呋喃类、酚类、醛酮类、醇类、吲哚类、
烯烃类等,各类化学物分别占挥发油组分百分比含
量如图 2 所示, 醛酮类以及酚类相对含量较高,分
别占挥发油总含量的 25.59%、19.32%, 吡咯类占
6.34%。
2.2 脂肪酸的测定结果
按试验方法所述 GC-MS 条件, 对黄槿叶片脂
肪酸甲酯化产物进行 GC-MS 分析, 其总离子流色
谱图如图 3所示,共检出 34个峰。
对图 3 脂肪酸的总离子流色谱图进行分析,鉴
定出黄槿叶片提取液中脂肪酸 13 种,其含量如表 2
所示。
由表 2 可见,黄槿叶片脂肪酸的含量占总提取
液的 74.24%,其中,饱和脂肪酸占 46.73%,不饱和
脂肪酸占 27.51%,十六酸(棕榈酸)、9,12-十八碳二
烯酰氯(亚油酰氯)、9,12-十八碳二烯酸(亚油酸)
的含量较高 , 相对含量分别为 30.11% 、11.91% 、
10.11%,十五酸含量最低,仅为 1.41%。 其中还含有
2种同分异构体,十六酸有 2 个同分异构体,9-十六
碳烯酸有 2个同分异构体。 与其他特呈岛红树林植
物叶片的棕榈酸含量相比,桐花树叶片棕榈酸含量
16.17%,露兜叶片棕榈酸含量 35.39%,红海榄叶片
棕榈酸含量 40.36%[14-16],可见十六酸(棕榈酸)是红
树植物叶片脂肪酸中含量占优势的类别。
棕榈酸属饱和脂肪酸类,其用途广泛,常被用
作工业原料生产润滑脂、合成洗涤剂、软化剂等。 此
外,可适量食用以利于脂肪代谢,但过量食用会使
体内脂肪沉积,进而诱发高血脂和血管硬化,并影
响体内胰岛素的分泌[17]。
亚油酰氯及亚油酸可用于胰岛素 LysB29的选择
性修饰及新型稳定维生素 C 源的合成[18,19]。 亚油酸
在人体内可以转化为亚麻酸和花生四烯酸,花生四
烯酸能促进脑细胞代谢,是老年和婴幼儿配方食品
的重要功能因子之一 [20],同时,亚油酸还具有降低
血清胆固醇和甘油三酸酯、防止动脉粥样硬化及血
栓形成、防止心脑血管疾病、延长人类寿命的生理
作用[21]。
3 小结
由于植物天然活性成分资源的可再生性,近年
来,人们对植物挥发油、油脂开展了广泛深入的研
究。 目前,已经成功开发出多种天然精油及油脂,而
红树生态环境又是世界上最富有多样性、生产力最
表 2 黄槿叶片中脂肪酸的相对含量
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
保留时间
min
13.75
16.27
17.25
17.43
18.13
18.32
18.48
18.53
19.59
19.97
20.3
20.36
20.6
化合物
十二酸甲酯
十四酸甲酯
十五碳烯酸甲酯
十五酸甲酯
十六酸甲酯
9-十六碳烯酸甲酯
9-十六碳烯酸甲酯
十六酸甲酯
十七酸甲酯
丁酸-2-十二碳烯酯
9,12-十八碳二烯酸甲酯
9,12-十八碳二烯酰氯
十八酸甲酯
分子式
C13H26O2
C15H30O2
C16H30O2
C16H32O2
C17H34O2
C17H32O2
C17H32O2
C17H34O2
C18H36O2
C16H30O2
C19H34O2
C18H31ClO
C19H38O2
相似度//%
96
96
95
91
89
90
84
90
94
82
96
87
97
含量

1.44
6.73
1.75
1.41
1.08
1.01
1.01
29.03
1.46
1.72
10.11
11.91
5.58
图 2 黄槿树叶挥发油组分百分含量
吡咯类 呋喃类 酚类 醛酮类 醇类 烯烃类 吲哚类 其他
7.34% 4.06%
4.59% 6.34% 9.78%
19.32%
25.59%
15.85%
1896
第 9 期
(责任编辑 王晓芳)
高的海洋生态环境之一,由于其生态环境的极端特
殊性,其中所产化合物化学成分结构新颖、功能独
特,更具有独特的生物活性,是医学新药研究开发
的活跃领域,也可用于农业等不同领域的研究。
试验对黄槿叶片挥发油和脂肪酸进行了 GC-
MS 测定分析。 对黄槿叶片挥发油组分的测定分析
分离出 63 个峰,鉴定出 54 种化合物,其中,苯乙醇
含量相对较高, 占挥发油组分总含量的 8.25%,此
外,挥发油组分中还含有吡咯类、呋喃类、酚类、醛
酮类、吲哚类等多种化学组分,但与其他同样采自
特呈岛的红树林植物相比,其挥发油各组分含量均
较低。
对脂肪酸的分析结果表明: 已鉴定出的 13 种
脂肪酸中,棕榈酸和亚油酸相对含量较高,分别占
脂肪酸总量的 30.11%和 10.11%, 棕榈酸同样是特
呈岛其他红树植物含量相对较高的脂肪酸组分,这
可能与树种生长的环境因素有密切的关系,具体机
理有待进一步研究。
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Y 两优 302 系长沙年丰种业有限公司选育的籼型两系
杂交水稻。
品种来源:Y58S×F302
特征特性:在长江中下游作一季中稻种植,全生育期平
均 136.5 d,比对照Ⅱ优 838 长 2.3 d。 株型紧凑,叶姿挺直,叶
缘内卷,熟期转色好,叶鞘无色,柱头白色,稃尖无色,有短顶
芒, 每公顷有效穗数 247.5 万穗, 株高 131.9 cm, 穗长 26.6
cm,每穗总粒数 178.1 粒,结实率 84.1%,千粒重 26.5g。抗性:
稻瘟病综合指数 5.0 级,穗瘟损失率最高级 9 级;白叶枯病 7
级;褐飞虱 9 级;抽穗期耐热性弱。 米质主要指标:整精米率
65.2%,长宽比 2.8,垩白粒率 17%,垩白度 2.9%,胶稠度 74
mm,直链淀粉含量 16.2%,达到国家《优质稻谷》标准 2 级。
产量表现:2008 年参加长江中下游中籼迟熟组品种区域
试验,平均单产(公顷产量,下同)9 166.5 kg,比对照Ⅱ优 838
增产 6.8%(极显著);2009 年续试,平均单产 8 926.5 kg,比对
照Ⅱ优 838 增产 7.4%(极显著 )。 两年区域试验平均单产
9 046.5 kg, 比对照Ⅱ优 838 增产 7.1%, 增产点比率 92.9%。
2009 年生产试验,平均单产 8 689.5 kg,比对照Ⅱ优 838 增产
6.4%。
栽培技术要点:①适时播种,大田每公顷用种量 15 kg,
培育多蘖壮秧。②秧龄 30 d 内移栽,栽插密度 16.7 cm×30 cm
或 20 cm×26.7 cm,每公顷栽插 18 万~22.5 万穴,每穴栽插 2
苗。 ③每公顷纯氮不超过 180 kg,氮、磷、钾配合施肥,增施钾
肥,基蘖肥和穗肥比例以 6∶4 为宜。每公顷总苗数达到 225 万
后及时晒田,后期间歇灌溉,倒 3 叶期复水重施穗肥,抽穗后
保持湿润,收获前 5 d 断水。 ④注意及时防治稻瘟病、白叶枯
病、纹枯病、螟虫、稻曲病、稻飞虱等病虫害。
适宜范围:该品种熟期适中,产量高,高感稻瘟病,感白
叶枯病,高感褐飞虱,米质优。 适宜在江西、湖南、湖北、安徽、
浙江、江苏的长江流域稻区(武陵山区除外)以及福建北部、
河南南部稻区的稻瘟病、白叶枯病轻发区作一季中稻种植。
两系杂交稻 Y两优 302
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李晓菲等:黄槿叶片挥发油和脂肪酸成分的 GC-MS 分析 1897