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壮药山芝麻抗炎镇痛止血有效部位的研究



全 文 :• 1672 • 中华中医药杂志(原中国医药学报)2010年 10月第25 卷第 10期 CJTCMP, October 2010, Vol . 25, No.10
明了详实的经络虚实辨别方法。其经络虚实辨别之方法,为针
灸临床针刺补泻提供了主要的依据。《灵枢·刺节真邪》所云:
“用针者,必先察其经络之虚实⋯⋯视其应动者,乃后取之而
下之”。临床上在针灸施治之前,须审察经络的虚实情况,而后
采用或补或泻,或“以经取之”的针刺手法。使变动的经络归于
平衡,而达到防病治病的目的。经络虚实辨证的结果,是正确
运用针刺补泻手法的依据,正确的经络虚实辨证方法,是针灸
疗法取得确切疗效的关键,应当引起相关学者的重视,值得针
灸工作者进一步学习研究。《黄帝内经》为经络虚实辨证指导
针刺补泻提供了详尽的理论依据,今后我们可在临床上进行更
多的相关研究。
参 考 文 献
[1] 杨杰,杜松.《黄帝内经》中诊法理论体系概要.中华中医药
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(收稿日期:2010年4月11日)
壮药山芝麻抗炎镇痛止血有效部位的研究
蒋才武1,2,3,杜冲1,伍敏2,覃青云2,孟宪丽3,陆斌1
(1广西中医学院药学院,南宁 530001; 2柳州两面针股份有限公司博士后工作站,柳州 545001;
3成都中医药大学药学院,成都 610075)
摘要:目的:研究山芝麻抗炎镇痛止血有效部位。方法:分别用小鼠耳肿胀法和大鼠足肿胀法观察其抗炎作
用,用小鼠扭体法和热板法观察镇痛作用,用玻片法和断尾法观察其止血作用。结果:山芝麻正丁醇部位在抑制
小鼠耳肿胀和大鼠足肿胀、减少小鼠扭体次数和延长痛阈值时间﹑缩短小鼠凝血和止血时间等方面与空白对照组
相比均有统计学意义(P<0.05),且其止血作用与云南白药相当。结论:山芝麻抗炎镇痛止血的有效部位是正丁
醇部位。
关键词:壮药;山芝麻;抗炎;镇痛;止血
Study on anti-infl ammatory, analgesic and hemostasis effects parts of Zhuang medicine
helicteres angustifoia L.
JIANG Cai-wu1,2,3, DU Chong1, WU Min2, QIN Qing-yun2, MENG Xiang-li3, LIU Bin1
(1College of Pharmacy,Guangxi TCM University,Nanning 53000,China;2Postdoctoral Workstation,Liuzhou Liangmianzhen
Co.,Ltd., Liuzhou 545001,China; 3Chengdu University of TCM,Chengdu 611137,China)
Abstract: Objective:To study the anti-inflammatory,analgesic and hemostasis effects parts of different extracting
fractions of helicteres angustifoia L.Methods:Anti-infl ammatory effect was observed by ear edema in mice and paw edema in
rat methods,analgesic action was observed by writhing assay and hot-plate test in mice,hemostasis action was observed by slide
and BT methods.Results:The n-butanol fraction of helicteres angustifoia L.showed signifi cant difference (P<0.05) by statistics
in inhibiting ear edema in mice and rat paw edema,decreasing the writhing times,increasing the pain threshold for hot plate,
and shortening the bleeding and blood coagulating time in mice compared with the control group,and it’ hemostasis effects was
as strong as Yunnan Baiyao Plaster.Conclusion:The n-butanol fraction of helicteres angustifoia L.was the anti-inflammatory,
analgesic,hemostasis effects part.
Key words: Zhuang medicine; Helicteres angustifoia L.; Anti-infl ammatory; Analgesic; Hemostasis
通讯作者:蒋才武,广西省南宁市明秀东路广西中医学院药学院,邮编:530001,电话:0771-3113202,传真:0771-3137377, E-mial:cwjiang@126.com
·研究报告·
• 1673 •中华中医药杂志(原中国医药学报)2010年 10月第25 卷第 10期 CJTCMP, October 2010, Vol . 25, No.10
山芝麻为梧桐科植物山芝麻的根或全株,主要分布于广西﹑
广东﹑云南等西南地区。味辛﹑微苦,性凉,有小毒。具有清热
化痰﹑消肿止痛﹑外伤止血等功效,用于治疗感冒﹑发热﹑扁桃
体炎﹑咽喉炎、腮腺炎、麻疹、痔疮、黄疸、刀伤出血等, 是一种
常用壮药[1]。具有抑制金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、
痢疾杆菌和降低转氨酶、对蛙离体横纹肌有增强收缩的作用[2],
但目前尚无抗炎镇痛止血作用的报道。故文章针对山芝麻提取
物的3个部位进行抗炎镇痛止血作用的研究。
材料
1. 动物 清洁级昆明种小鼠由广西医科大学实验动物中
心提供,许可证号:SCXK桂2003-0003。清洁级SD大鼠由长
沙开福区东创实验动物科技服务部提供,许可证号:SCXK湘
2006-0001。
2. 仪器和药品 RB-200智能热板仪(成都泰盟科技有限
公司,序列号:TM026-0710-02-022-009)。山芝麻药材经广
西中医学院刘寿养副教授鉴定为Helicteres angustifoia L.,二甲
苯(上海试剂一厂,批号:试-2004-12-08),0.6%的醋酸(自行
配制),弗氏完全佐剂(FCA)(Sigma公司 CAS 9007-81-2),罗
通定片(开封永康药业有限公司,批号:2007-12-02),阿司匹
林肠溶片(舒泰神(北京)药业有限公司,批号:08-03-06),云
南白药(云南白药集团股份有限公司,批号:2007-05-17)。
方法与结果
1. 山芝麻的提取 山芝麻全株772.3g,打粉过40目筛,75%
醇回流提取2次,浓缩得总浸膏111.1g,取28g总浸膏分别以石
油醚、乙酸乙酯、正丁醇为溶剂进行索氏提取得各分部位浸膏
1.6910、1.3475、24.8865g,用鼠粮研磨成粉,拌各部位浸膏配
置成相应浓度水溶液至冰箱备用。
2. 统计学方法 实验数据均以x-±s表示,统计学处理采用
SPSS 10.0统计软件进行方差分析,并作组间两两比较。
3. 山芝麻3个部位对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响[3] 选取
20g左右雌性健康小白鼠50只,随机分成5组,分别为空白对照组
(生理盐水)﹑阿司匹林阳性对照组﹑石油醚部位组﹑乙酸乙酯
部位组﹑正丁醇部位组各10只,连续给药5d,末次给药后1h,于小
鼠右耳两面涂以二甲苯0.02mL/只,左耳不涂为正常耳。1h后脱颈
椎处死小鼠,沿耳廓基线剪下两耳,用6mm打孔器冲下左、右两
耳同一部位的圆片,于分析天平称重。用右耳片重量减去左耳片
重量为肿胀度,比较药物的抗炎作用,计算肿胀抑制率:
跖厚度后,注射弗氏完全佐剂0.1mL/只,于致炎后3h,用游标卡
尺测量右后足厚度。以其致炎前后的足厚度差值为肿胀度,并
计算抑制率。结果见表2。由表2可知,对于3h后大鼠足跖肿胀
度,空白对照组与阳性对照组、正丁醇部位组之间的差异有统
计学意义(P<0.05)。
表1 山芝麻3个部位对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响(x- ±s)
组别
空白对照组
阳性对照组
石油醚部位组
乙酸乙酯部位组
正丁醇部位组
n
10
10
10
10
10
剂量(mg/kg)
-
100.0
15.1
11.9
220.6
肿胀度(g×103)
3.3±0.5△
1.8±0.6*
3.1±0. 4△
3.3±0.5△
2.4±0.4*△
肿胀抑制率(%)
-
46.8
6.3
0.6
27.0
注:与空白对照组比较,*P<0.05;与阳性对照组比较,△P<0.05。
下表同。
表2 山芝麻3个部位对弗氏完全佐剂所致大鼠足肿胀的影响(x- ±s)
组别
空白对照组
阳性对照组
石油醚部位组
乙酸乙脂部位组
正丁醇部位组
剂量(mg/kg)
-
100.0
10.5
8.3
153.6
n
10
10
10
10
10
肿胀度(cm)
0.12±0.03
0.04±0.03*
0.10±0.02△
0.10±0.03△
0.08±0.01*△
肿胀抑制率(%)
-
66.7
16.6
16.6
33.3
肿胀抑制率= 空白对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度
空白对照组平均肿胀度
×100%
5. 山芝麻3个部位对醋酸引起小鼠扭体反应(扭体法)[3]
选取20g左右健康雌性小白鼠50只,随机分为5组,每组10只,
分别为空白对照组、罗通定阳性对照组、石油醚部位组、乙酸
乙脂部位组、正丁醇组,连续给药5d,于末次给药1h后,每只均
ip0.6%的冰醋酸溶液0.2mL,观察20min内扭体次数,计算镇痛
率。结果见表3。由表3可知,对于小鼠20min内的扭体次数,空
白对照组与阳性对照组﹑正丁醇部位组之间的差异有统计学意
义(P<0.05)。
表3 山芝麻3个部位对扭体法所致小鼠扭体次数的影响(x- ±s)
组别
空白对照组
阳性对照组
石油醚部位组
乙酸乙脂部位组
正丁醇部位组
剂量(mg/kg)
-
60.0
15.1
11.9
220.6
n
10
10
10
10
10
扭体次数(次/20min)
29.0±2.02
4.9±1.52*
27.6±1.69△
28.0±1.22△
15.7±1.17*△
镇痛率(%)
-
83.1
4.8
3.4
45.9
6 . 山芝麻3个部位对热板致痛小鼠痛阈的影响(热板
法)[4] 选取20g左右健康雌性小鼠,置热板仪(温度调于55℃±
0.5℃)上,记录小鼠接触热板至舔后足的时间,即痛反应潜伏
期,痛反应潜伏期在5-30s内为合格小鼠。取合格小鼠50只,随
机分成5组,连续给药5d,于末次给药1h后测定其痛阈值(痛阈
值超过60s的按60s计算),计算痛阈提高率。
结果见表1。由表1可知,对于小鼠耳廓肿胀度,空白对照组与阳
性对照组﹑正丁醇部位组之间的差异有显著性意义(P<0.05)。
4. 山芝麻3个部位对完全弗氏佐剂所致大鼠足跖肿胀的影
响 选取200g左右健康雌雄大鼠50只,随机分为5组,连续给
药7d,末次给药后把大鼠装入固定器,测量致炎前大鼠右后足
• 1674 • 中华中医药杂志(原中国医药学报)2010年 10月第25 卷第 10期 CJTCMP, October 2010, Vol . 25, No.10
结果见表4。由表4知,空白对照组与阳性对照组﹑正丁醇部位组
之间的差异有统计学意义(P<0.05)。
结论
壮药在抗炎镇痛止血作用上常常表现为较强的活性,文章
对13种壮药药效筛选,发现山芝麻具有显著的抗炎镇痛止血活
性,进而对其进行有效部位研究,首次揭示了山芝麻有效部位
是正丁醇部位。
参 考 文 献
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(收稿日期:2010年4月18日)
7. 山芝麻3个部位对小鼠凝血时间的影响(玻片法)[5] 选取
20g左右雌性健康小鼠50只,随机分成5组,分别为空白对照组﹑
云南白药阳性组﹑石油醚部位组﹑乙酸乙脂部位﹑正丁醇部位组
各10只,各组按20mL/kg每日灌胃1次,连续给药5d,末次给药1h
后,用眼科弯镊迅速摘去一侧眼球,即有血液流出。于载玻片的
两端各滴1滴血,血液直径约5mm,立即用秒表记时。每隔30s用
清洁大头针自血滴边缘向里轻轻拨动1次,并观察有无血丝挑
起。从采血开始至挑起血丝止,所经历时间即凝血时间。另1滴
血供最后复检,最后取2滴血的凝血时间平均值。结果见表5。由
表5可知,对于小鼠给药1h后眼球取血,空白对照组与阳性对照
组、石油醚部位组、乙酸乙脂部位组之间的差异有高度统计学意义
(P<0.01),其中正丁醇部位组与阳性对照组作用相当。
表5 山芝麻3个部位对小鼠凝血时间的影响(x- ±s)
组别
空白对照组
阳性对照组
石油醚部位组
乙酸乙脂部位组
正丁醇部位组
剂量(mg/kg)
-
260.0
15.1
11.9
220.6
n
10
10
10
10
10
凝血时间(min)
14.4±2.3
6.7±1.2*
12.2±0.8*△
11.9±1.3*△
7.1±1.9*
8. 山芝麻3个部位对小鼠断尾出血时间(BT)影响(断尾法)[5] 选
取20g左右雌性健康小白鼠50只,随机分成5组,连续给药5d,
末次给药后1h,在小鼠尾尖上方5mm处剪断鼠尾,待血液自行溢
出开始计时,每隔30s滤纸吸去血滴1次,直至血液自然停止,计
算出血时间(出血时间超过5min的按5min计算)。结果见表6。
由表6可知,对于小鼠给药1h后断尾取血,空白对照组与阳性对照
组、石油醚部位组、乙酸乙脂部位组之间的差异有高度统计学性
意义(P<0.01),其中正丁醇部位组与阳性对照组作用相当。
表6 山芝麻3个部位对小鼠断尾出血时间的影响(x- ±s)
组别
空白对照组
阳性对照组
石油醚部位组
乙酸乙脂部位组
正丁醇部位组
剂量(mg/kg)
-
260.0
15.1
11.9
220.6
n
10
10
10
10
10
出血时间(s)
274.673±20.729
143.745±16.141*
222.955±32.631*△
221.755±50.684*△
154.091±23.229*
痛阈提高率= 给药后平均痛阈时间-给药前平均痛阈时间给药前平均痛阈时间 ×100%
表4 山芝麻3个部位对热板法所致小鼠鼠足痛阈值的影响
(x- ±s)
组别
空白对照组
阳性对照组
石油醚部位组
乙酸乙脂部位组
正丁醇部位组
n
10
10
10
10
10
剂量(mg/kg)
-
60.0
15.1
11.9
220.6
给药前时间(s)
18. 1±3.6
19.3±2.7
19.2±3.5
18.5±3.7
19.6±3.5
痛阈提高率(%)
11.3
200.6
10.7
11.2
49.4
痛阈时间差(s)
2.0±1.1
38.8±4.6*
2.1±1.3△
2.1±1.2△
9.7±3.5*△